鼻炎清顆粒治療變應(yīng)性鼻炎的免疫機(jī)制研究

胡紅芳

[摘要] 目的 觀察鼻炎清顆粒對(duì)大鼠變應(yīng)性鼻炎免疫系統(tǒng)的影響。 方法 用卵清蛋白、氫氧化鋁致敏大鼠建立變應(yīng)性鼻炎動(dòng)物模型，鼻炎清顆粒灌胃給藥14 d后，觀察大鼠的行為學(xué)表現(xiàn)，檢測(cè)大鼠血清IL-4、IgE的水平，并進(jìn)行比較。 結(jié)果 藥物治療后，鼻炎清顆粒組的行為學(xué)評(píng)分、血清IL-4、IgE的水平與模型組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 鼻炎清顆粒通過(guò)調(diào)節(jié)大鼠的免疫系統(tǒng)，改善大鼠的體質(zhì)，從而達(dá)到治療變應(yīng)性鼻炎的目的。

[關(guān)鍵詞] 鼻炎清顆粒；變應(yīng)性鼻炎；IL-4；IgE

[中圖分類(lèi)號(hào)] R392.11 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-9701（2015）04-0017-03

[Abstract] Objetive To observe effect of Biyanqing granules on immune system of rats with allergic rhinitis. Methods Rats were sensitized by ovalbumin and aluminum hydroxide，Allergic rhinitis animal model had been successfully established. Rat stomachs were pumped into the Biyanqing granules， after 14 days， observed the behavior of rats. IL-4， IgE in the serum of rats were detected and compared. Results After treatment， behavior scores， IL-4， IgE levels of Biyanqing granules group were significantly improved （P<0.05）. Conclusion Biyanqing granules can regulates the rat's immune system， improve the health of them. So as to achieve the purpose of the treatment of allergie rhinitis.

[Key words] Biyanqing granules；Allergie Rhinitis；Interleukin-4；Immunoglobulin E

變應(yīng)性鼻炎是臨床常見(jiàn)病和多發(fā)病，尤其是耳鼻喉科，其發(fā)病率更逐年上升，是全球患病率較高的疾病，約全球15%～20%人群均患有此病，空氣質(zhì)量差的地區(qū)發(fā)病率更高。隨著我國(guó)大氣污染的加重，患病人數(shù)已超過(guò)0.5億[1-2]。變應(yīng)性鼻炎的病變首先為個(gè)體接觸某種物質(zhì)，然后發(fā)生以IgE為主介導(dǎo)的變態(tài)反應(yīng)，局部黏膜組織中細(xì)胞因子、炎性介質(zhì)及嗜酸性細(xì)胞的浸潤(rùn)和肥大細(xì)胞增多等[1-2]，該病嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量，甚者能誘發(fā)或加重支氣管哮喘等疾病的病情，目前，全球都十分重視此病。中藥對(duì)此病的治療有著良好的療效，本研究分析自組方鼻炎清顆粒對(duì)變應(yīng)性鼻炎大鼠的血漿中IL-4 和IgE影響，探討鼻炎清顆粒治療變應(yīng)性鼻炎的免疫機(jī)制。

1 資料與方法

1.1 動(dòng)物及分組

選擇2014年1～2月飼養(yǎng)的SPF級(jí)SD45只大鼠，雄性，體質(zhì)量（150±20）g（由遼寧中醫(yī)藥實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供），隨機(jī)分為3組，每組15只。正常對(duì)照組（簡(jiǎn)稱(chēng)正常組）15只，變應(yīng)性鼻炎模型組（簡(jiǎn)稱(chēng)模型組）15只，鼻炎清顆粒治療組（簡(jiǎn)稱(chēng)治療組）15只。動(dòng)物飼養(yǎng)在空調(diào)房?jī)?nèi)，飼養(yǎng)房?jī)?nèi)保持清潔，避免變應(yīng)原存在。

1.2 藥物及試劑

鼻炎清顆粒由我院制劑室加工。氫氧化鋁粉（濟(jì)南金盈泰試劑廠生產(chǎn)，批號(hào)：80321）；卵清蛋白（Sigma公司生產(chǎn)，A5253）；IL-4試劑盒及IgE試劑盒為美國(guó)bender公司生產(chǎn)（批號(hào)為BMS542和BMS614）。

1.3造模方法

根據(jù)文獻(xiàn)建立大鼠實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，除正常?duì)照組外的大鼠，每只大鼠均采用腹腔注射卵清蛋白混懸液1 mL方式造模，卵清蛋白液需新鮮配制的，卵清蛋白混懸液組成為：卵清蛋白0.3 mg+氫氧化鋁32 mg+生理鹽水1 mL，注射頻率為隔日1次，造模時(shí)間為14 d。再用2%卵清蛋白懸濁液滴鼻，劑量為每次50 μL，每日1次，共需滴鼻7次。檢測(cè)造模是否成功，成功后仍維持滴鼻至實(shí)驗(yàn)結(jié)束[4]。

1.4給藥方法與劑量

自實(shí)驗(yàn)開(kāi)始卵清蛋白滴鼻起，正常組和模型組大鼠每天口飼生理鹽水3 mL；治療組大鼠每天口飼生理鹽水稀釋后的藥物溶液3 mL。給藥時(shí)間為每次滴鼻前，每日1次，共給藥14 d。治療組給藥濃度為5 g/（kg·d），模型組為5 g/（kg·d）。

1.5標(biāo)本采集及指標(biāo)檢測(cè)

末次給藥24 h后，用20%烏拉坦腹腔注射（5 mL/kg）麻醉大鼠，取各組大鼠頸靜脈血4 mL，室溫下靜置1 h，3000 r/min離心，離心10 min后，分離血清，按試劑盒說(shuō)明書(shū)，采用酶聯(lián)試驗(yàn)檢測(cè)每組大鼠血清IL-4、IgE含量，于酶標(biāo)儀450 nm波長(zhǎng)處讀取OD值，繪制曲線計(jì)算血清IL-4、IgE濃度值。

1.6 評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

每次滴鼻后30 min觀察動(dòng)物噴嚏、搔鼻、流涕癥狀，打分標(biāo)準(zhǔn)如下：搔鼻：僅輕搔鼻幾次，為輕度，計(jì)1分；到處擦磨，抓搔鼻甚至面部不止為重度，計(jì)2分。噴嚏：1～3個(gè)計(jì)1分，4～10個(gè)計(jì)2分，10個(gè)以上計(jì)3分。流涕：以流液位置計(jì)算，流液最遠(yuǎn)達(dá)前鼻孔計(jì)1分；流液最遠(yuǎn)超過(guò)前鼻孔計(jì)2分；涕液遍布滿(mǎn)面計(jì)3分。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)以SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件分析處理，計(jì)量資料以（x±s）表示，多組間計(jì)量資料比較采用差分析，兩兩比較采用t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 治療前后行為學(xué)評(píng)分比較

給藥前，正常組的行為學(xué)評(píng)分為（1.28±0.81）分，模型組的行為學(xué)評(píng)分（7.42±1.85）分，兩組比較t=5.78，P<0.05，說(shuō)明造模成功。正常組與模型組治療前、后行為學(xué)評(píng)分比較無(wú)差異（P>0.05）；治療組的治療后評(píng)分明顯較治療前改善（P<0.05）。模型組與治療組的治療前評(píng)分無(wú)差異（P>0.05）；治療組的治療后評(píng)分較模型組明顯改善（P<0.05），說(shuō)明鼻炎清顆粒在治療大鼠變應(yīng)性鼻炎方面顯示了較好的療效。

3討論

現(xiàn)代研究已經(jīng)證實(shí)，變應(yīng)性鼻炎患者主要是Th細(xì)胞反應(yīng)，Th細(xì)胞由Th1和Th2二個(gè)亞群組成，Th1、Th2分別參與細(xì)胞免疫、體液免疫，它們之間的不同的免疫調(diào)節(jié)功能相互制約，處于動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)[5]。當(dāng)由于某些因素的作用，導(dǎo)致Th2細(xì)胞因子呈優(yōu)勢(shì)發(fā)展?fàn)顟B(tài)時(shí)，就打破了Th1/Th2平衡系統(tǒng)，導(dǎo)致變應(yīng)性鼻炎的發(fā)生，也就是變應(yīng)性鼻炎發(fā)作時(shí)T輔助細(xì)胞亞群功能是失衡的，T輔助細(xì)胞亞群釋放細(xì)胞因子，IgE的合成與分泌增加，炎性細(xì)胞的濕潤(rùn)也增加[6]，可見(jiàn)Th1/Th2之間的失衡是變應(yīng)性鼻炎發(fā)病的中心病理機(jī)制。在發(fā)病過(guò)程中釋放的細(xì)胞因子有IL-4、IL-5、IL-13、IL-10等多種，促進(jìn)Eos生長(zhǎng)、遷移和活化，同時(shí)促進(jìn)MC分化和IgE產(chǎn)生[7]，其中起關(guān)鍵作用的是IL-4，其通過(guò)促進(jìn)B細(xì)胞分化和增殖來(lái)增加合成IgE，同時(shí)促進(jìn)嗜堿細(xì)胞活化，釋放組胺、白三烯等化學(xué)介質(zhì)，引起變態(tài)反應(yīng)的發(fā)生[8]。IL-4還可抑制Th1細(xì)胞因子IL-2、IFN-Y的表達(dá)，并誘導(dǎo)Th細(xì)胞以向Th2分化為主，因此，IL-4經(jīng)常被作為檢測(cè)Th2細(xì)胞因子水平的指標(biāo)[9]。

變應(yīng)性鼻炎是多種免疫活性細(xì)胞和細(xì)胞因子參與的，由IgE介導(dǎo)的I型變態(tài)反應(yīng)性疾病。血清總IgE水平的增高既是變應(yīng)性鼻炎的重要識(shí)別標(biāo)志，又是變應(yīng)性鼻炎的主要特點(diǎn)[10]，在血清中的含量高低也反應(yīng)了變態(tài)反應(yīng)的嚴(yán)重程度，因此檢測(cè)血清中IgE的含量是診斷、治療變應(yīng)性鼻炎的一個(gè)參考指標(biāo)[11]。

變應(yīng)性鼻炎屬于祖國(guó)醫(yī)學(xué)“鼻鼽”之范疇，又有“鼽鼻”、“鼽水”等稱(chēng)。古人早就認(rèn)識(shí)到鼽嚏與氣候的變化有密切關(guān)系，并提出了當(dāng)四時(shí)季節(jié)的變化時(shí)，肺氣被郁而咳嗽、鼻流清涕。盡管眾多醫(yī)家認(rèn)為變應(yīng)性鼻炎以肺、脾、腎之虛損為主，大致分為肺虛、脾虛、腎陽(yáng)虛三型，但目前卻沒(méi)有權(quán)威的、統(tǒng)一的辨證分型。而筆者據(jù)臨床實(shí)踐觀察，認(rèn)為東北地區(qū)風(fēng)寒之邪入侵為其最主要邪氣，邪氣引起肺失宣發(fā)，肺開(kāi)竅于鼻，鼻竅不利是病機(jī)特點(diǎn)，治療當(dāng)以宣肺、散寒、祛風(fēng)、通竅為治則，鼻炎清顆粒正是基于此組方用藥的，方中麻黃性溫，味辛，可宣發(fā)肺氣；防風(fēng)性辛微溫，祛風(fēng)止癢，與麻黃配伍可祛邪外出；辛夷、蒼耳性溫味辛，散風(fēng)寒、通鼻竅。

本實(shí)驗(yàn)證實(shí)，鼻炎清顆?？梢种芓h2細(xì)胞的細(xì)胞因子IL-4的產(chǎn)生，抑制Th細(xì)胞向Th2細(xì)胞極化，促使Th1/Th2之間的動(dòng)態(tài)平衡，抑制變應(yīng)性鼻炎的啟動(dòng)機(jī)制，從而抑制變應(yīng)性鼻炎的發(fā)生。鼻炎清顆粒可明顯降低血清中總IgE含量，減輕變應(yīng)性鼻炎的免疫反應(yīng)程度，緩解變應(yīng)性鼻炎的癥狀，改善患者的生活質(zhì)量。實(shí)驗(yàn)證明，鼻炎清顆粒通過(guò)調(diào)節(jié)患者免疫系統(tǒng)，改善患者體質(zhì)，從而達(dá)到治療變應(yīng)性鼻炎的目的。

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（收稿日期：2014-07-21）