布魯氏菌病患者實(shí)驗室檢查結(jié)果分析

布魯氏菌病患者實(shí)驗室檢查結(jié)果分析

王克迪，蘇建榮*

(首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京友誼醫(yī)院 臨床檢驗中心，北京100050)

布魯氏菌病(Brucellosis)又稱地中海弛張熱，馬爾他熱，波浪熱或波狀熱，簡稱布病，是由布魯氏菌引起的人畜共患性全身傳染病，主要傳播途徑是經(jīng)皮膚黏膜和消化道進(jìn)入人體而感染發(fā)病，并在局部淋巴結(jié)內(nèi)增殖形成病灶，繁殖到一定數(shù)量后破潰入血，并被帶到肝、脾、骨髓等處形成病灶。這些病灶中的病菌又可以多次入血，引起臨床癥狀的反復(fù)加重，形成波浪式熱型。其臨床特點(diǎn)為長期發(fā)熱、多汗、關(guān)節(jié)痛及肝脾腫大等[1]。近年來，養(yǎng)畜戶增多，牲畜交易活躍，而食品的檢疫管理和布病的防治工作相對滯后，使該病的發(fā)病率顯著升高。最近，我院布魯氏菌病檢出率也有所增加，為使臨床實(shí)驗室人員了解該病臨床及實(shí)驗室檢查特點(diǎn)，現(xiàn)將我院近3年來10例布病的實(shí)驗室檢查結(jié)果進(jìn)行總結(jié)。

1材料與方法

1.1一般資料選自2012年5月至2015年5月就診于北京友誼醫(yī)院感染內(nèi)科，并被明確診斷為布魯氏菌病的患者。共10例，均為男性，年齡在21-64歲，7例有明確牛羊接觸史，3例無明確接觸史。

1.2儀器與試劑Sysmex XE-5000血細(xì)胞分析儀(日本Sysmex公司)；VITEC-COMPACT II全自動微生物分析系統(tǒng)(法國生物梅里埃公司)；BD9120全自動血培養(yǎng)儀(美國BD公司)；血瓊脂平板培養(yǎng)基購自法國生物梅里埃公司。

1.3方法取入組者晨起空腹靜脈血2-3 ml，EDTA-K抗凝，進(jìn)行血常規(guī)測定并記錄數(shù)據(jù)。另取患者外周靜脈血8-10 ml注入血培養(yǎng)瓶(需氧瓶和厭氧瓶1瓶)，即刻進(jìn)行血培養(yǎng)。陽性報警后立即轉(zhuǎn)種血瓊脂平板培養(yǎng)基孵育，每8h觀察一次菌落生長情況并記錄。

2結(jié)果

2.1血常規(guī)白細(xì)胞均值為(5.6±2.3)×109/L，最高值9.21×109/L，最低值2.00×109/L，正常或輕度減少，淋巴細(xì)胞百分比為(44.6±8.5)%，相對或絕對增多，最高可達(dá)60%以上。病程較長者可有輕或中度貧血，血小板多正常。血沉均增速，均值為(19.1±7.9)mm/h，血漿C反應(yīng)蛋白升高，均值為(13.8±5.1)mg/L，見表1和圖1。

表1　10例布魯氏菌病的實(shí)驗室檢查結(jié)果

+：有相應(yīng)臨床癥狀或陽性，-：無相應(yīng)臨床癥狀或陰性，N：檢測結(jié)果在正常參考范圍內(nèi)。WBC：白細(xì)胞計數(shù)；GR%：中性粒細(xì)胞百分比；LY%%淋巴細(xì)胞百分比；RBC：紅細(xì)胞計數(shù)；PLT：血小板計數(shù)；CRP：C反應(yīng)蛋白；ESR：紅細(xì)胞沉降率

-3-+3：代表每例樣本檢測值與相應(yīng)指標(biāo)均值的距離。WBC：白細(xì)胞計數(shù)；GR%：中性粒細(xì)胞百分比；LY%：淋巴細(xì)胞百分比；RBC：紅細(xì)胞計數(shù)；ESR：紅細(xì)胞沉降率；CRP：C反應(yīng)蛋白

圖110例布魯氏菌病的實(shí)驗室結(jié)果分布圖

2.2免疫學(xué)檢查常用布氏桿菌虎紅試驗，其原理是用布氏桿菌制備凝集抗原，與不同稀釋度的患者血清混合，在玻片上做凝集實(shí)驗，發(fā)生凝集為陽性，能夠有效去除血清中非特異性凝集素，有較好的敏感性和特異性[2]。

2.3細(xì)菌學(xué)檢查診斷布魯氏菌病的金標(biāo)準(zhǔn)?；颊哐?、骨髓、乳汁、子宮分泌物均可做細(xì)菌培養(yǎng)。血和骨髓培養(yǎng)是最容易分離出布魯氏菌的，后者較前者陽性率高。布魯菌為專性需氧菌，生長緩慢是其特點(diǎn)，血培養(yǎng)陽性報警時間最短為82.6 h，最長為110 h，均值為(85.9±27.8) h，陽性血培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)種平皿形成肉眼可見的菌落時間最短為48 h，最長為96 h，均值為(64.0±19.2) h。因此，懷疑布魯氏菌的血標(biāo)本應(yīng)保留2周以上。血瓊脂平板上孵育2-5天，可形成直徑0.5-1 mm的光滑菌落，比臨床實(shí)驗室其他革蘭陰性菌小，無色，凸起，邊緣整齊(圖2)。涂片為革蘭陰性短小球桿菌，呈“細(xì)沙狀”(圖3)，氧化酶試驗陽性，過氧化氫酶試驗陽性。因此，臨床上懷疑布魯氏桿菌病的標(biāo)本應(yīng)延長培養(yǎng)時間，避免漏診。此外，布魯菌對人有極強(qiáng)的致病性，所有標(biāo)本均應(yīng)在生物安全2級以上水平實(shí)驗室中處理，并在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行[3]。

3討論

布魯氏菌病的易感人群包括在農(nóng)牧區(qū)有病畜接觸史人員、飲用過未經(jīng)消毒滅菌乳品人群及與含菌培養(yǎng)標(biāo)本接觸的實(shí)驗室工作人員。多數(shù)患者存在接觸史，也有一部分患者無明確接觸史[4]。本研究中5例患者從事牛羊養(yǎng)殖業(yè)，2例患者食用過不潔羊肉。發(fā)熱是布病的特點(diǎn)之一，本文中10例患者均有發(fā)熱，體溫波動于37.5-40.0℃，波動大于1℃，熱前多伴寒戰(zhàn)畏寒。本文中患者都曾經(jīng)在外院就診，但由于該病是少見病，臨床表現(xiàn)多樣、缺乏特異性，容易被臨床醫(yī)生忽視，此外，細(xì)菌生長極其緩慢，血培養(yǎng)容易假陰性，造成漏診，延誤治療。因此，臨床醫(yī)生對于不明原因發(fā)熱的患者應(yīng)仔細(xì)詢問病史，了解有無牛羊接觸史，結(jié)合臨床表現(xiàn)和體征，確定診斷方向，對于臨床考慮布病的患者，應(yīng)提高血培養(yǎng)和骨髓培養(yǎng)的送檢率[5]。

圖2　馬耳他布魯菌鏡下形態(tài)(×1000倍)

圖3　血瓊脂平板上馬耳他布魯菌菌落形態(tài)

實(shí)驗室對于臨床懷疑布病的血培養(yǎng)標(biāo)本應(yīng)延長培養(yǎng)時間至2周，以提高陽性率。血培養(yǎng)對布氏桿菌病的診斷和治療起著極其重要的作用；實(shí)驗室應(yīng)積極與臨床聯(lián)系，加強(qiáng)技術(shù)人員對不常見疑難菌的培訓(xùn)，擴(kuò)展細(xì)菌鑒定思路。由于菌血癥是臨床醫(yī)學(xué)急癥，準(zhǔn)確鑒定病原菌至關(guān)重要。臨床盡早采集血培養(yǎng)，實(shí)驗室盡快培養(yǎng)出病原菌，對危重患者感染的診斷，治療和預(yù)后有著極其重要的意義。

參考文獻(xiàn)：

[1]唐志堅.布魯氏菌病的流行病學(xué)調(diào)查及分析[J].中國衛(wèi)生產(chǎn)業(yè),2015,3:7.

[2]Díaz R,Casanova A,Ariza J.The Rose Bengal Test in human brucellosis:a neglected test for the diagnosis of a neglected disease[J].PLos Negl Trop Dis,2011,5:950.

[3]謝秀麗,徐英春,王輝.血培養(yǎng)對布氏桿菌病診治的意義[J].中國處方藥，2005,6(39):62.

[4]王艷玲,蔡靜明,劉穎,等.我國布氏菌病危險因素的Meta分析[J].醫(yī)學(xué)信息,2015,9:121.

[5]史艷玲,張翠花,趙紅九,等.血培養(yǎng)檢出馬耳他布魯氏菌1例報道分析[J].臨床醫(yī)學(xué),2015,4:125.

(收稿日期：2015-07-14)

*通訊作者

文章編號：1007-4287(2015)12-2122-03