戒斷對(duì)嗎啡成癮大鼠活動(dòng)性的影響研究

崔躍 李欣欣 崔皓哲 徐暢

戒斷對(duì)嗎啡成癮大鼠活動(dòng)性的影響研究

崔躍 李欣欣 崔皓哲 徐暢

目的觀察戒斷對(duì)嗎啡成癮大鼠活動(dòng)性的影響。方法20只大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組和嗎啡組, 每組10只。用條件性位置偏愛(ài)實(shí)驗(yàn)(CPP)檢測(cè)大鼠成癮及活動(dòng)性的變化。結(jié)果經(jīng)皮下注射嗎啡7 d 建立大鼠CPP模型, 與對(duì)照組比較, 嗎啡組在伴藥箱停留時(shí)間增加, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。自然戒斷7 d 后, 與對(duì)照組比較, 嗎啡組穿梭次數(shù)明顯增加, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＜0.05)。結(jié)論嗎啡誘導(dǎo)大鼠CPP模型建立成功, 自然戒斷7 d后活動(dòng)性增強(qiáng), 提示嗎啡及其運(yùn)動(dòng)效應(yīng)之間的關(guān)系, 可能是大鼠覓藥行為的具體表現(xiàn)之一。

嗎啡；條件性位置偏愛(ài)；活動(dòng)性

藥物成癮是一種慢性復(fù)發(fā)性腦疾病, 有其復(fù)雜的神經(jīng)生物學(xué)基礎(chǔ)[1]。成癮物質(zhì)的反復(fù)使用, 可以增強(qiáng)模型動(dòng)物的運(yùn)動(dòng)敏感化, 這是成癮物質(zhì)的共有特征之一[2,3]。動(dòng)機(jī)敏化理論認(rèn)為反復(fù)使用致成癮物質(zhì), 將使與成癮動(dòng)機(jī)有關(guān)的神經(jīng)環(huán)路出現(xiàn)敏化, 進(jìn)而表現(xiàn)出對(duì)成癮藥物的持續(xù)渴求, 成癮藥物導(dǎo)致的行為敏化被認(rèn)為是成癮后復(fù)吸的重要原因之一[3,4]。本研究利用條件性位置偏愛(ài)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)嗎啡自然戒斷對(duì)大鼠運(yùn)動(dòng)活性的影響。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 材料 健康雄性SD大鼠20只(由沈陽(yáng)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供), 平均體重(225±25)g；鹽酸嗎啡(青島制藥廠有限公司, 中國(guó))。

1.2 方法

1.2.1 分組 大鼠隨機(jī)化分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組, 每組10只,分籠飼養(yǎng), 自由進(jìn)食飲水。

1.2.2 主要儀器設(shè)備 條件性位置偏愛(ài)箱(CPP箱)：CPP箱由兩個(gè)規(guī)格相同(長(zhǎng)53 cm, 寬30 cm, 高30 cm)的隔音箱組成。中間有擋板, 可以抽拉。擋板底端有小門(mén), 動(dòng)物可自由穿梭, 測(cè)試時(shí)用。另有一套無(wú)小門(mén)擋板, 實(shí)驗(yàn)訓(xùn)練用。其中一個(gè)箱子為黑色, 地板為網(wǎng)格狀, 另一個(gè)箱子為白色,地板為條紋狀。箱體的上方有攝像頭, 可以記錄動(dòng)物活動(dòng)情況。

1.2.3 CPP模型制備及戒斷后運(yùn)動(dòng)活性檢測(cè) CPP模型制備分3個(gè)階段[5,6]。預(yù)測(cè)試階段：建立模型之前, 連續(xù)3 d ,每天8:00, 讓大鼠自由穿梭于兩個(gè)箱體15 min(900 s), 第3天記錄大鼠在兩個(gè)箱體停留的時(shí)間, 確定其天然偏好。以大鼠非天然偏好箱為伴藥箱, 天然偏好箱為非伴藥箱。訓(xùn)練階段：用替代擋板封閉兩箱通道, 嗎啡組動(dòng)物8:00皮下注射嗎啡(10 mg/kg), 隨即放入伴藥箱30 min；16:00皮下注射等量的生理鹽水, 隨即放非伴藥箱30 min,1次/d。對(duì)照組除將嗎啡替換為生理鹽水之外, 其他訓(xùn)練相同。連續(xù)訓(xùn)練6 d 。測(cè)試階段：第7天進(jìn)行訓(xùn)練后測(cè)試, 將有小門(mén)的擋板置于兩箱之間,未做任何處理的大鼠放入箱內(nèi), 讓其自由活動(dòng)15 min(900 s),記錄其在右箱(伴藥箱)停留時(shí)間和穿梭次數(shù)。位置偏愛(ài)指標(biāo)：右箱(伴藥箱)停留時(shí)間(Time spent in the white chamber, TW)；運(yùn)動(dòng)活性檢測(cè)指標(biāo)：大鼠停藥后戒斷1周(第14天)進(jìn)行運(yùn)動(dòng)活性檢測(cè)。檢測(cè)指標(biāo)為穿梭次數(shù)(Shuttle times, ST),大鼠從一側(cè)箱子移動(dòng)到另一側(cè)箱子則判定穿梭1次, 累計(jì)得到穿梭次數(shù)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示, 對(duì)方差齊性的指標(biāo)用單因素方差分析, LSD-t檢驗(yàn)進(jìn)行均數(shù)間的多重比較；對(duì)方差不齊的指標(biāo)采用Kruskal-Wallis非參數(shù)檢驗(yàn), Mann-Whitney U法進(jìn)行兩兩比較的秩和檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

經(jīng)過(guò)CPP訓(xùn)練, 第7天測(cè)試, 嗎啡組大鼠在伴藥箱停留時(shí)間明顯高于對(duì)照組, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05), 提示嗎啡誘導(dǎo)的大鼠CPP模型建立成功。大鼠停藥后戒斷1周(第14天)進(jìn)行運(yùn)動(dòng)活性檢測(cè), 與戒斷前的活動(dòng)性比較, 明顯增強(qiáng), 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組大鼠嗎啡成癮及戒斷后條件性位置偏愛(ài)和運(yùn)動(dòng)活性情況比較(±s)

表1 兩組大鼠嗎啡成癮及戒斷后條件性位置偏愛(ài)和運(yùn)動(dòng)活性情況比較(±s)

注：與對(duì)照組比較,aP＜0.05；與第1天比較,bP＜0.05

時(shí)間 對(duì)照組 時(shí)間 嗎啡組右箱停留時(shí)間(s) 穿梭次數(shù)(次) 右箱停留時(shí)間(s) 穿梭次數(shù)(次)第1天 146.776±30.85 22.7±5.85 第1天 152.004±26.07 26.3±6.85第7天 139.950±18.18 16.6±6.95 第7天 396.330±67.03a 22.1±12.75第14天 143.824±22.62 18.4±4.35 第14天 192.327±87.85 39.3±6.80bF 0.196 2.905 χ2 19.667 12.896 P 0.823 0.072 P 0.000 0.000

3 . 小結(jié)

條件性位置偏愛(ài)實(shí)驗(yàn)是用于評(píng)價(jià)藥物成癮性的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ蚚7], 廣泛用于評(píng)價(jià)藥物的精神依賴(lài)情況。該實(shí)驗(yàn)的基本原理是將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物置于條件性位置偏愛(ài)箱的白箱, 并給予精神依賴(lài)性藥物, 經(jīng)過(guò)幾次訓(xùn)練后, 觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在條件性位置偏愛(ài)箱的活動(dòng)情況。實(shí)驗(yàn)觀察指標(biāo)有位置偏愛(ài)指標(biāo), 即伴藥箱停留時(shí)間；運(yùn)動(dòng)活性指標(biāo), 即穿梭次數(shù), 其檢測(cè)結(jié)果與藥物的精神依賴(lài)性相關(guān)。

本研究檢測(cè)了嗎啡成癮及戒斷后大鼠條件性位置偏愛(ài)和運(yùn)動(dòng)活性情況, 結(jié)果顯示經(jīng)訓(xùn)練后, 成癮大鼠在伴藥箱停留時(shí)間明顯增加。自然戒斷后1周, 其運(yùn)動(dòng)活性明顯增強(qiáng)。成癮敏感化理論認(rèn)為, 成癮物質(zhì)可以誘發(fā)運(yùn)動(dòng)敏感化, 從而引起強(qiáng)迫性覓藥行為, 進(jìn)而產(chǎn)生復(fù)吸行為[2,3]。實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示了嗎啡及其運(yùn)動(dòng)效應(yīng)之間的關(guān)系, 如果能深入研究其內(nèi)在機(jī)制, 將對(duì)研究成癮后復(fù)吸提供有益的線索。

[1]Merighi S, Gessi S, Varani K, et al. Morphine mediates a proinflammatory phenotype via μ-opioid receptor-PKCε-Akt-ERK1/2 signaling pathway in activated microglial cells. Biochem Pharmacol,2013,86(4):487-496.

[2]Robinson TE, Berridge KC. The neural basis of drug craving: an incentive-sensitization theory of addiction. Brain Res Brain Res Rev,1993,18(3):247-291.

[3]Robinson TE, Berridge KC. Addiction. Annu Rev Psychol,2003(54):25-53.

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[6]邵曉霞, 李潔, 何繁漪, 等. 嗎啡誘導(dǎo)條件位置性偏愛(ài)大鼠海馬CA1區(qū)NR2A、NR2B的變化. 昆明醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2013,34(6):17-20.

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Influence research of abstinence on mobility in rats with morphine addiction

CUI Yue, LI Xin-xin, CUI Hao-zhe, et al. School of Basic Medicine of Shenyang Medical College, Shenyang110034, China

ObjectiveTo observe influence of abstinence on mobility in rats with morphine addiction.MethodsA total of20 rats were randomly divided into control group and morphine group, with10 cases in each group. Conditioned place preference (CPP) was applied to detect changes of addiction and mobility of rats.ResultsRats CPP model was established by subcutaneous injection of morphine for7 d. Compared with the control group, the morphine group had increased residence time. Their difference had statistical significance (P＜0.05). After7 d of natural abstinence, the morphine group had obviously more shuttle times than the control group. Their difference had statistical significance (P＜0.05).ConclusionAfter successful CPP model establishment of morphine addiction rats and7 d of natural abstinence, increased mobility indicates that the correlation between morphine and motion effect can be one of the specific manifestations of drug-seeking behavior.

Morphine; Conditioned place preference; Mobility

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.16.190

2015-03-30]

國(guó)家自然科學(xué)基金資助(項(xiàng)目編號(hào)：81441110)；遼寧省教育廳科學(xué)研究一般項(xiàng)目(項(xiàng)目編號(hào)：L2014405)；沈陽(yáng)醫(yī)學(xué)院博士科研啟動(dòng)基金(項(xiàng)目編號(hào)：20133049)

110034 沈陽(yáng)醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院