慢性阻塞性肺疾病患者T淋巴細胞及細胞因子的表達與分析

余志輝 林濤

慢性阻塞性肺疾病患者T淋巴細胞及細胞因子的表達與分析

余志輝 林濤

目的探討慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者T淋巴細胞及細胞因子水平的變化, 進一步確認其臨床意義。方法170例COPD患者作為研究對象, 按照病情分為急性期組(97例)和緩解期組(73例)。同時選取同期在本院進行健康體檢的100例健康人群作為健康對照組。檢測并對比三組T淋巴細胞亞群和白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)等細胞因子水平。結(jié)果COPD急性期組患者的CD3細胞、輔助性T細胞(Th細胞)和自然殺傷細胞(NK細胞)水平均低于緩解期組, 而健康對照組均顯著高于急性期組和緩解期組患者, 差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。同時急性期組患者的IL-6、IL-8和TNF-α的水平均高于緩解期組, 而健康對照組均顯著低于急性期組和緩解期組患者, 三組差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。結(jié)論細胞免疫功能和細胞因子可能在COPD的發(fā)病及病情進展中發(fā)揮重要作用。

慢性阻塞性肺疾??；T淋巴細胞；細胞因子

慢性阻塞性肺疾病(COPD)作為一種常見呼吸系統(tǒng)疾病,以持續(xù)存在的氣流受限為主要特征, 并且伴有氣道和肺對有害顆粒或氣體所致慢性炎性反應的增加。該病一旦患病無法治愈, 只能夠延緩病情的進展, 嚴重影響其生活質(zhì)量, 給患者及家庭帶來巨大的經(jīng)濟負擔。目前, 對于該病的發(fā)病機制尚不完全清楚。相關研究顯示, T淋巴細胞亞群及相關細胞因子可能在COPD炎癥反應中發(fā)揮重要作用[1]。為進一步探討它們在COPD發(fā)病中的作用, 本研究對COPD患者T淋巴細胞亞群和IL-6、IL-8、TNF-α等細胞因子水平進行了測定,旨在進一步確認其在COPD病程中的臨床意義?，F(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2011年1月～2013年1月住院治療的170例COPD患者作為研究對象。患者年齡50～74歲,平均年齡(62.8±7.8)歲, 其中男94例, 女76例, 病程2～22年, 平均病程(10.5±3.9)年。所有患者均符合《慢性阻塞性肺疾病診治指南》制定的COPD診斷標準。排除其他肺部疾病、腫瘤、糖尿病等慢性消耗性疾病患者, 并且所有患者近1個月內(nèi)均未使用過免疫抑制劑、激素等影響免疫狀態(tài)的藥物。按照患者病情的不同分為急性期組(97例)和緩解期組(73例)。同時選取同期在本院進行健康體檢的健康人群100例作為健康對照組。COPD與健康人群在年齡、性別等一般資料方面比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05), 具有可比性。

1.2 測定方法 抽取研究對象空腹靜脈血2 ml, 抗凝。取抗凝血100 μl, 用simule Test試劑直接標記全血細胞,4℃避光培養(yǎng)20 min后加入2 ml紅細胞裂解液, 混勻后室溫培養(yǎng)10 min,然后采用PBS液洗滌2遍, 最后加入200 ml PBS液混勻, 立刻檢測[2]。血清中IL-6、IL-8、TNF-α的檢測采用酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA), 標本的處理、檢測步驟和含量計算均按試劑盒操作說明進行。

1.3 統(tǒng)計學方法 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析應用SPSS16.0統(tǒng)計學軟件處理。計量資料以均數(shù)±標準差(±s)表示, 采用t檢驗,多組間比較采用方差分析；計數(shù)資料采用χ2檢驗。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者T細胞亞群的比較 COPD急性期組患者的CD3細胞、Th細胞、抑制性T細胞(Ts細胞)和NK細胞水平均低于緩解期組, 而健康對照組均高于急性期組和緩解期組患者, 三組CD3細胞、Th細胞和NK細胞水平比較, 差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。見表1。

2.2 兩組細胞因子的比較 COPD急性期組患者的IL-6、IL-8和TNF-α的水平均高于緩解期組患者, 而健康對照組均顯著低于急性期組和緩解期組患者, 三組比較, 差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。見表2。

表1 三組患者T細胞亞群的比較(±s)

表1 三組患者T細胞亞群的比較(±s)

組別 例數(shù) CD3細胞 Th細胞 Ts細胞 NK細胞急性期組 97 50.68±2.51 27.88±1.90 17.12±2.49 15.68±2.77緩解期組 73 55.46±4.15 35.30±2.98 20.58±2.62 20.02±2.13健康對照組 100 61.52±3.39 43.52±3.88 23.51±3.02 25.24±2.61 F -8.71 -18.62 -1.26 -11.55 P <0.001 <0.001 0.167 <0.001

表2 三組相關細胞因子的比較(±s, ng/ml)

表2 三組相關細胞因子的比較(±s, ng/ml)

組別 例數(shù) IL-6 IL-8 TNF-α急性期組 97 76.42±22.08 143.82±20.74 191.84±24.49緩解期組 73 59.11±18.33 119.18±19.29 135.39±16.03健康對照組 100 43.65±16.17 58.69±9.36 97.26±20.51 F8.12 7.03 7.45 P <0.001 <0.001 <0.001

3 討論

COPD作為一種全身性疾病, 具有患病率高、病死率高等特點, 其繼心血管、腦血管及癌癥之后, 位居全球死亡原因第四位。目前為止其發(fā)病機制尚未完全清楚。該病以氣流受限為主要特征, 呼吸道氣道炎癥是該病發(fā)作的根本原因。氣道炎癥主要與小氣道、肺泡對有害物質(zhì)產(chǎn)生的氣道炎癥反應有關。首先致病原刺激炎性細胞釋放炎性因子, 炎性因子對炎癥細胞進行調(diào)節(jié), 炎癥細胞反過來對機體發(fā)揮作用[3]。適量的炎性因子對機體具有保護作用, 如果含量過高, 就會對身體產(chǎn)生損害, 使肺部組織損傷, 從而加重病情。

相關研究發(fā)現(xiàn), T淋巴細胞亞群表達異?？赡茉贑OPD發(fā)病中起著重要作用。COPD患者外周血中輔助性T細胞減少, 抑制性T細胞增加, 且與肺泡損害程度及氣流阻塞的嚴重程度呈正比[4]。此外, IL-6、IL-8和TNF-α等細胞因子參與了COPD氣道炎性反應。其機制可能為：當呼吸道受到外部感染時, 能夠激活肺泡巨噬細胞釋放趨化因子, 吸引循環(huán)中的炎性反應細胞, 釋放炎性細胞因子擴大炎性反應,從而最終導致血中相關細胞因子的升高[5]。相關研究顯示, COPD患者血液中多種炎癥因子含量均高于正常健康人, 并且與病情具有相關性[6]。

本研究顯示, COPD患者CD3細胞、Th細胞和NK細胞水平均低于健康對照組, 而IL-6、IL-8和TNF-α的水平均高于健康對照組。而不同時期的比較結(jié)果顯示, COPD急性期組患者的CD3細胞、Th細胞和NK細胞水平均低于健康對照組和緩解期組, 此外, 急性期組患者的IL-6、IL-8和 TNF-α的水平均高于緩解期組, 三組比較差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。研究結(jié)果與相關研究相符[7,8]。

總之, 隨著COPD嚴重程度的增高, 其T淋巴細胞亞群呈降低趨勢, 而細胞因子呈現(xiàn)出上升趨勢。提示T淋巴細胞亞群和細胞因子在COPD炎癥反應中發(fā)揮重要作用, 可以將其作為該病嚴重程度的監(jiān)測指標。

[1]劉景艷, 修清玉.細胞因子在慢性阻塞性肺疾病發(fā)病中的作用.國外醫(yī)學呼吸系統(tǒng)分冊,2005,26(5):420-422.

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[3]中華醫(yī)學會呼吸病學分會慢性阻塞性肺疾病學組.慢性阻塞性肺疾病診治指南(2007年修訂版).中華內(nèi)科雜志,2007,46(3):254-261.

[4]胡蓉. COPD患者治療前后血清hs-CRP、TNF-α、IL-6、IL-8檢測的臨床意義.放射免疫雜志,2007,20(6):503-505.

[5]趙雪峰, 王紅陽, 楊萬杰. COPD患者血細胞因子水平與肺功能的相關性分析.安徽醫(yī)學,2010,31(6):559-562.

[6]胡云衢, 任海波, 宋宣, 等.慢性阻塞性肺病患者T淋巴細胞及細胞因子水平的變化.武警醫(yī)學,2013,24(6):485-487.

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[8]朱斌, 郝建, 王偉.慢性阻塞性肺疾病患者血清細胞因子的變化及其臨床意義.臨床肺科雜志,2008,13(12):1570-1571.

Expression and analysis of T lymphocyte and cytokines in chronic obstructive pulmonary disease patients

YU Zhi-hui, LIN Tao. Department of Inspection, Foshan City the Fifth People’s Hospital,528211, China

ObjectiveTo investigate the level changes of T lymphocyte and cytokines in chronic obstructive pulmonary disease (COPD) patients, in order to further confirm its clinical significance.MethodsThere were170 COPD patients as the study subjects, and they were divided into acute stage group (97 cases) and remission stage group (73 cases) by their disease state. Another100 healthy people were selected as health control group. Detection and comparisons were made on T lymphocyte subsets, and levels of interleukin-6 (IL-6), interleukin-8 (IL-8), tumor necrosis factor-α (TNF-α) in the three groups.ResultsThe acute stage group had lower levels of CD3 cell, helper T cell (Th cell), and natural killer cell (NK cell) than the remission stage group, while these were higher in the health control group than in acute stage group and remission stage group. The difference had statistical significance (P<0.05). Levels of IL-1β, IL-6, IL-8, and TNF-α in the acute stage group were higher than the remission stage group, while these in the control group were higher than the other two groups. The difference had statistical significance (P<0.05).ConclusionCellular immune function and cytokines may play important roles in morbidity and progress of COPD.

Chronic obstructive pulmonary disease; T lymphocyte; Cytokines

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.08.009

2014-12-12]

528211 佛山市第五人民醫(yī)院檢驗科