張真真,邱立軍,劉博文,徐超紅,徐建國(guó)
(1.舟山市定海區(qū)林業(yè)工作站,浙江舟山 316000;2.浙江省柑橘研究所,浙江臺(tái)州 318020)
柑橘抗寒相關(guān)基因及抗寒基因工程研究進(jìn)展
張真真1,邱立軍1,劉博文1,徐超紅1,徐建國(guó)2?
(1.舟山市定海區(qū)林業(yè)工作站,浙江舟山 316000;2.浙江省柑橘研究所,浙江臺(tái)州 318020)
柑橘是我國(guó)南方重要經(jīng)濟(jì)樹(shù)種,而低溫是影響柑橘產(chǎn)量和分布的重要制約因素?;虿町惐磉_(dá)分析技術(shù)是尋找植物抗寒基因的重要技術(shù)手段,而基因工程是獲得植物抗寒品種的重要方法。本文綜述了利用基因差異表達(dá)分析技術(shù)獲得柑橘抗寒基因的方法,重點(diǎn)介紹了近年來(lái)在柑橘中已被分離鑒定的抗寒相關(guān)基因,分析了這些基因的抗寒功能及抗寒調(diào)控分子機(jī)制,并探討了通過(guò)基因工程轉(zhuǎn)化寒敏感柑橘的研究進(jìn)展。
柑橘;低溫誘導(dǎo)基因;抗寒基因;基因表達(dá)調(diào)控;基因工程
柑橘屬(Citrus)是全球產(chǎn)量最大的水果,同時(shí)我國(guó)柑橘年產(chǎn)量位居全球第一[1]。柑橘是亞熱帶植物,喜溫暖,對(duì)低溫的反應(yīng)敏感,所以低溫是影響柑橘品質(zhì)和產(chǎn)量的重要制約因素。同時(shí)低溫影響柑橘的區(qū)域分布,限制柑橘這一重要經(jīng)濟(jì)植物在我國(guó)廣大北方地區(qū)的栽培種植。因此,研究柑橘寒敏感原因,培育柑橘耐寒品種,對(duì)于提高柑橘品質(zhì)和產(chǎn)量,打破柑橘地域,促進(jìn)柑橘產(chǎn)業(yè)快速發(fā)展具有重大意義。
基因差異表達(dá)分析技術(shù)是尋找植物抗性基因的重要技術(shù)手段,而基因工程是獲得植物抗性品種的重要方法,因此利用基因差異表達(dá)和基因工程技術(shù)能夠獲得柑橘抗寒相關(guān)基因,揭示柑橘寒敏感本質(zhì),有助于今后通過(guò)人工方法,調(diào)控柑橘抗寒過(guò)程,提高柑橘抗寒性,培育柑橘抗寒品種。迄今為止,已有80多篇涉及柑橘抗寒基因研究的文章發(fā)表,這些文章從柑橘屬植物溫州蜜柑、葡萄柚、甜橙中,分離鑒定了一部分低溫差異表達(dá)基因,分析了這些基因與植物抗寒性之間的關(guān)系,并通過(guò)基因工程轉(zhuǎn)化了部分柑橘類(lèi)寒敏感品種,從而增加柑橘抗寒性。
高等生物的基因表達(dá)不僅受到發(fā)育和組織特異性的影響,而且還受到環(huán)境變化的影響。任何細(xì)胞的基因90%是基礎(chǔ)性表達(dá),只有10%是選擇性表達(dá)。而生物表現(xiàn)出來(lái)的各種特性,正是由于這10%基因的差異表達(dá)導(dǎo)致的,這里面包含了新基因的表達(dá)與表達(dá)量差異基因的表達(dá)。所以,分析低溫誘導(dǎo)下不同基因的表達(dá)差異,并克隆這些差異表達(dá)的基因與模式植物比對(duì)了解其抗寒功能,對(duì)于深入研究柑橘抗寒分子機(jī)理,獲得柑橘抗寒基因,轉(zhuǎn)化柑橘寒敏感品種,提高柑橘抗寒性具有重要作用。
獲得柑橘低溫差異表達(dá)基因的主要技術(shù)有mRNA差異顯示(mRNA differential display)、差別雜交(differential hybridization)、交互扣除RNA差別顯示技術(shù)(reciprocal subtraction differential RNA display)、扣除雜交(subtractive hybridization of cDNA)、抑制消減雜交法(suppression subtractive hybridization)、定量(quantitative interpretation)PCR、半定量(semi?quantitative interpretation)PCR、電子消減(electronic subtraction)、基因表達(dá)系列(serial analysis of gene expression)分析和DNA微列陣分析(DNA microarray)[2]。
Weiser[3]在1970年首先提出,植物在抗寒性誘導(dǎo)過(guò)程中基因表達(dá)發(fā)生了改變。隨后利用各種基因差異表達(dá)分析技術(shù),已在苜蓿、菠菜、冬小麥、馬鈴薯和冬油菜以及其他植物中,分離鑒定了多個(gè)與植物抗寒性相關(guān)的低溫誘導(dǎo)基因[4],而柑橘植物的抗寒相關(guān)基因也在研究中越來(lái)越多地被分離鑒定出來(lái)。
在柑橘的抗寒性基因研究中,柑橘被認(rèn)為是對(duì)低溫比較敏感的植物,而同為蕓香科柑橘亞科的枳是與柑橘親緣關(guān)系很近的柑橘類(lèi)植物,常用做柑橘砧木,對(duì)低溫抗性好,耐寒[5],是研究柑橘抗寒性很好的比較材料。在柑橘抗寒能力的研究過(guò)程中,科學(xué)家通過(guò)各種差異表達(dá)分析法在低溫脅迫的柑橘和枳中分離鑒定了一些低溫誘導(dǎo)基因,而這些基因的功能大多通過(guò)與模式植物中已知功能的抗寒基因進(jìn)行同源序列比對(duì)得知,并比較其抗寒性的差異,分析柑橘寒敏感分子機(jī)理,旨在獲得能夠提高柑橘抗寒性的基因。陳文榮等[6]利用mRNA差異顯示技術(shù)分析鑒定寒敏感佛手低溫脅迫相關(guān)的基因,最終獲得121個(gè)低溫差異片段,經(jīng)過(guò)半定量和生物學(xué)分析,最終確定29個(gè)上調(diào)基因和5個(gè)下調(diào)基因,這些基因主要涉及植物防御/應(yīng)激反應(yīng),信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),細(xì)胞壁修飾,轉(zhuǎn)錄,蛋白質(zhì)的合成和氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)。張真真[2]研究了低溫脅迫前后這些基因在佛手和枳的表達(dá)量變化情況,其中14個(gè)基因在佛手中的表達(dá)發(fā)生變化,但在枳中表達(dá)量卻不變,這些基因可能與佛手寒敏感相關(guān),它們所介導(dǎo)的分子途徑可能是揭示佛手寒敏感特性的有利證據(jù)。近15年來(lái),柑橘類(lèi)植物低溫脅迫后分離鑒定的低溫誘導(dǎo)基因列于表1。
表1 近15年柑橘類(lèi)植物中分離鑒定的低溫誘導(dǎo)基因
在低溫脅迫后,植物能夠誘導(dǎo)體內(nèi)表達(dá)某些基因,這些基因的表達(dá)蛋白直接參與低溫脅迫應(yīng)答或間接調(diào)控其他靶基因的表達(dá)[20]。陳得波等[21]歸納了自馬鈴薯、黑麥、小麥、菠菜、苜蓿和大麥以及其他植物里面分離鑒定的62個(gè)低溫誘導(dǎo)基因,這些基因與植物抗寒能力有關(guān)系,而且這些基因的作用與膜脂相變、抗凍脫水、抗凍活性及低溫下酶活性的變化有關(guān)。從表1中已經(jīng)獲得的柑橘類(lèi)植物低溫誘導(dǎo)基因,分析其合成的蛋白在抗寒中的作用可以分為3大類(lèi):1)編碼具有催化作用的蛋白;2)促進(jìn)新蛋白生成并附著細(xì)胞膜的表面或者鑲嵌在膜脂之間,對(duì)于細(xì)胞膜的冷穩(wěn)定性有促進(jìn)作用;3)作為蛋白調(diào)節(jié)因子在信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和低溫表達(dá)過(guò)程中起調(diào)節(jié)作用。下面對(duì)已經(jīng)被分離鑒定的與柑橘低溫誘導(dǎo)相關(guān)基因在抗寒方面的作用進(jìn)行介紹。
2.1 酶活性蛋白
柑橘在低溫脅迫過(guò)程中誘導(dǎo)合成具有催化作用的蛋白,參與一些重要的生理活動(dòng),如苯丙氨酸解氨酶(PAL)[19]、ACC合成酶[18]、硫氰酸酶[6]、甘油?3?磷酸酰基轉(zhuǎn)移酶[22]、核苷二磷酸激酶Ⅲ[16]、氨基酸透酶[16]、酮還原酶[11]等。
苯丙氨酸解氨酶(PAL)是催化苯丙烷類(lèi)代謝第一步反應(yīng)的關(guān)鍵酶和限速酶。Sanchez?Ballesta等[19]從經(jīng)低溫脅迫下寒敏感的福瓊橘(Fortune)和耐寒的赫南蒂娜克力邁丁紅橘(Hernandina)中分離獲得2個(gè)全序列PAL1和PAL2。研究發(fā)現(xiàn)低溫脅迫后寒敏感柑橘的PAL表達(dá)量升高而耐寒柑橘的PAL表達(dá)量和PAL活性均下降,表明低溫脅迫下PAL的表達(dá)量積累與柑橘受到低溫傷害有關(guān),PAL表達(dá)量的變化是區(qū)分柑橘品種抗寒性強(qiáng)弱的一種指標(biāo)。
氨基環(huán)丙烷羧酸(ACC)合成酶基因ACS,是編碼乙烯合成的關(guān)鍵酶,乙烯主要調(diào)節(jié)植物的生長(zhǎng)發(fā)育及多種生理反應(yīng),如植物逆境脅迫反應(yīng)。Wong等[18]從低溫脅迫的甜橙中分離鑒定了2個(gè)低溫誘導(dǎo)表達(dá)的ACC合成酶基因ACS1和ACS2,這2個(gè)基因不僅被低溫誘導(dǎo)表達(dá),同時(shí)也被傷害誘導(dǎo)表達(dá)。
硫氰酸酶具有植物組織解毒作用,能使細(xì)胞中有毒的氰化物,轉(zhuǎn)變?yōu)闊o(wú)毒的硫氰酸化合物。陳文榮等[6]在寒敏感的柑橘植物佛手中,獲得硫氰酸酶基因,這說(shuō)明即使是抗寒性差的柑橘植物種,也同樣會(huì)產(chǎn)生抗寒物質(zhì),用于對(duì)抗低溫下氰化物積累對(duì)細(xì)胞造成的傷害。
Lang[16]和Zhang等[11]利用mRNA差異顯示和定量PCR技術(shù),從低溫馴化的溫州蜜柑中獲得6個(gè)正調(diào)控低溫誘導(dǎo)基因,其中2個(gè)基因編碼具有催化作用的氨基酸透酶6和核苷二磷酸激酶Ⅲ。從低溫馴化的枳中獲得8個(gè)正調(diào)控基因,其中1個(gè)編碼具催化作用的酮還原酶。
2.2 冷保護(hù)蛋白
低溫傷害的主要部位是生物膜,研究表明低溫脅迫過(guò)程中柑橘誘導(dǎo)新的蛋白質(zhì)合成,附著于膜表面或位于膜脂間,具有保護(hù)細(xì)胞生物膜,維持水相,及防止蛋白變性等功能。如防止蛋白質(zhì)受凍而失活的COR(cold?regulated)蛋白[8,15],保護(hù)細(xì)胞機(jī)能及抗脫水的LEA(late?embryogenesis abundant)蛋白[8],及一些與LEA蛋白、脫水蛋白類(lèi)似的蛋白[23-25]。
在柑橘植物中報(bào)道最多的COR基因有COR11,COR15,COR19,這3個(gè)基因受低溫、高鹽、干旱等逆境誘導(dǎo),能形成一類(lèi)獨(dú)特的LEA蛋白基因家族,均與柑橘的抗寒性相關(guān)。Porat等[8]從葡萄柚中獲得COR15基因,編碼一個(gè)15.1 ku的蛋白質(zhì)COR15。Hara等[15]從低溫馴化的溫州蜜柑葉片中獲得COR19基因,從枳中獲得CORc115基因和CORc119基因,分別編碼蛋白質(zhì)COR19和COR11。這2種基因和溫州蜜柑低溫誘導(dǎo)表達(dá)的COR19,氨基酸序列都富含賴(lài)氨酸豐富區(qū)[24],且高度同源。溫州蜜柑作為柑橘中抗寒性較強(qiáng)的品種,在低溫脅迫下與抗寒性極強(qiáng)的枳均有COR19類(lèi)似蛋白的表達(dá)形成,表明該基因可增加溫州蜜柑的抗寒性。
另外Guy等[25]在低溫馴化柑橘葉片里,觀察到脫水蛋白CAP160和CAP85的累積,這體現(xiàn)出脫水蛋白參與了柑橘的抗寒過(guò)程。而且柑橘的CAP160與菠菜的CAP160無(wú)論分子量還是等電點(diǎn)都很相似,這體現(xiàn)了即使沒(méi)有親緣關(guān)系的植物同樣也能生成一樣的抗寒蛋白。2011年P(guān)orat等[17]在甜橙和葡萄柚熱激后的低溫誘導(dǎo)過(guò)程中獲得脫水蛋白基因DHN,熱激后冷藏時(shí)DHN的表達(dá)量明顯增加。同時(shí),發(fā)現(xiàn)葡萄柚在熱激后放在常溫下,被誘導(dǎo)增加表達(dá)的DHN是短暫的,而如果把熱激后的葡萄柚進(jìn)行冷藏,其誘導(dǎo)提高的DHN水平可以維持8周。Porat等[26]也曾有研究證實(shí),柑橘冷藏前進(jìn)行熱處理可以提高柑橘儲(chǔ)藏期間抗寒性。
2.3 植物的AFP抗凍蛋白
抗凍蛋白(antifreeze protein,AFP)首先發(fā)現(xiàn)于極地的魚(yú)類(lèi)中,它們與其他冷誘導(dǎo)蛋白的基本區(qū)別是:降低溶液冰點(diǎn)、抑制重結(jié)晶、修飾冰晶形態(tài)[27]??箖龅鞍譇FP已在冬黑麥、小麥、大麥、胡蘿卜、燕麥、冬青、苔蘚、裸子植物、細(xì)菌及真菌等生物中被發(fā)現(xiàn)[28-29],目前未見(jiàn)柑橘類(lèi)植物獲得AFP的報(bào)道。
2.4 轉(zhuǎn)錄因子
轉(zhuǎn)錄因子(transcription factor)指能結(jié)合基因上游特異核苷酸序列的蛋白質(zhì)并起到調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄的作用,轉(zhuǎn)錄因子與植物抗逆、發(fā)育及生命活動(dòng)調(diào)控有重要聯(lián)系。轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)控作用研究一直是柑橘抗寒研究的熱點(diǎn),其中CBF(CRT/DRE binding factor)是目前柑橘中研究最深入的,參與低溫逆境應(yīng)答的轉(zhuǎn)錄因子。CBF是啟動(dòng)低溫調(diào)節(jié)基因表達(dá)的重要轉(zhuǎn)錄因子,含有AP2結(jié)構(gòu),該結(jié)構(gòu)域能與COR基因的CRT/DRE結(jié)合,啟動(dòng)COR蛋白,從而提高植物抗寒性[30]。2007年Champ等[5]從枳和葡萄柚中分離獲得CBF,低溫誘導(dǎo)下枳的CBF1比葡萄柚的CBF1積聚更多且達(dá)到更高的表達(dá)水平,而且枳的CBF1能夠更迅速地識(shí)別并結(jié)合CRT/DRE片段,從而更早并更高水平地表達(dá)冷保護(hù)蛋白CORc115,從而增加枳的抗寒性。這項(xiàng)研究首次為2種親緣關(guān)系相近但是抗寒性差距較大的柑橘植物,提供其抗寒差異與CBF表達(dá)(數(shù)量、時(shí)間)和低溫脅迫程度相關(guān)性的證據(jù)。
乙烯應(yīng)答因子(ethylene response factor,ERF)轉(zhuǎn)錄因子家族基因也受低溫脅迫誘導(dǎo)表達(dá),同樣具有AP2結(jié)構(gòu),也在柑橘抗寒中起著重要作用。2011年曹詣斌等[12]通過(guò)RACE擴(kuò)增從枳和佛手中獲得ERF6,并使用定量PCR技術(shù)發(fā)現(xiàn)抗寒性不同的枳和佛手的ERF6低溫脅迫下表達(dá)變化量完全不同,低溫脅迫下佛手的ERF6表達(dá)量上升12倍,而枳的ERF6表達(dá)量上升4 000倍,說(shuō)明ERF6表達(dá)量的變化與柑橘品種的抗寒性差異呈現(xiàn)正相關(guān)。2006年Sahin?Cevik等[9]通過(guò)扣除雜交法在枳的低溫誘導(dǎo)cDNA文庫(kù)中篩選獲得Pl?B05和Pl?C10 2個(gè)基因,均含AP2/ERF結(jié)構(gòu)域。在寒冷的不同時(shí)期對(duì)枳和葡萄柚的這2個(gè)基因表達(dá)量進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)這2個(gè)基因在枳中被誘導(dǎo)表達(dá),葡萄柚中未被表達(dá),說(shuō)明ERF轉(zhuǎn)錄因子與柑橘抗寒性具有重要相關(guān)性。
GRAS是高等植物特有的轉(zhuǎn)錄因子家族,參與植物的生長(zhǎng)發(fā)育、解毒作用、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、生物和非生物脅迫的應(yīng)答過(guò)程[31]。葉杰君等[14]2013年采用定量PCR,檢測(cè)GRAS基因在低溫脅迫的佛手、甌柑、本地早、處紅柚和枳,這5種抗寒性不同的柑橘中的表達(dá)量差異。這5種柑橘類(lèi)植物半致死溫度測(cè)定確定抗寒性強(qiáng)弱順序是枳>本地早>甌柑>處紅柚>佛手,最終發(fā)現(xiàn)低溫脅迫下GRAS基因在這5種柑橘中表達(dá)量均上調(diào),并且表達(dá)量上調(diào)的幅度大小與植株的抗寒能力的強(qiáng)弱呈正相關(guān)。
柑橘抗寒基因工程是指將外源抗寒基因?qū)氲礁涕偌?xì)胞,并培養(yǎng)成整個(gè)植株的過(guò)程。近15年來(lái),國(guó)內(nèi)外學(xué)者發(fā)現(xiàn)了大量植物低溫誘導(dǎo)基因,并逐步探明低溫脅迫的分子機(jī)理,柑橘抗寒基因工程取得了巨大的進(jìn)步,通過(guò)導(dǎo)入植物抗寒基因進(jìn)而提高柑橘抗寒性的方法已成為現(xiàn)代柑橘育種的重要手段。植物抗寒基因主要包括,與膜脂不飽和相關(guān)的酶基因,防止低溫對(duì)細(xì)胞傷害的酶(SOD、脂脫氫酶)基因,抗凍及防止蛋白受凍失活的COR基因,抗脫水及保護(hù)胞體機(jī)能的LEA蛋白基因等。以下對(duì)柑橘中已有報(bào)道的抗寒基因工程途徑做具體的介紹。
3.1 魚(yú)類(lèi)抗凍基因途徑
抗凍蛋白(AFP)首先在魚(yú)類(lèi)中被發(fā)現(xiàn),人們通過(guò)分離純化獲得高活性AFP,并篩選、克隆抗凍基因,以期能改良其他生物的抗凍性能,已有在昆蟲(chóng)和魚(yú)類(lèi)中獲得AFP基因成功轉(zhuǎn)化煙草和胡蘿卜的報(bào)道[32-33]。萬(wàn)巧蘭[34]利用含AFP基因的根癌農(nóng)桿菌菌株感染錦橙、椪柑和枳的實(shí)生苗上胚軸部分,經(jīng)卡那霉素篩選出抗性芽,并微嫁接成株,最后獲得3株轉(zhuǎn)基因柑橘(1株錦橙、2株枳)。通過(guò)Southern雜交和斑點(diǎn)雜交檢測(cè)證實(shí)AFP基因已整合到柑橘基因組中。該研究結(jié)果初步表明,這種動(dòng)物AFP能夠在柑橘細(xì)胞中得到表達(dá),但對(duì)柑橘抗寒性的影響尚待進(jìn)一步研究。
3.2 脂肪酸去飽和代謝關(guān)鍵酶基因途徑
植物的細(xì)胞膜是整個(gè)細(xì)胞中對(duì)外界脅迫反應(yīng)最大的部位,所以細(xì)胞膜的組成成分與植物的抗寒性有著密切的關(guān)系。植物受到低溫脅迫時(shí)不飽和脂肪酸含量會(huì)增加,同時(shí)質(zhì)膜中磷脂含量及其與蛋白質(zhì)的比值也會(huì)發(fā)生改變。有研究發(fā)現(xiàn)74種植物的抗寒性與反式單不飽和磷脂酸的含量密切相關(guān)[35],其不飽和度越高,抗寒性也就越強(qiáng),因此在柑橘中導(dǎo)入脂肪酸去飽和酶基因,減少脂肪酸的飽和程度,能夠大大提高柑橘的抗旱能力。甘霖等[36]研究證明抗寒性強(qiáng)的金柑和宜昌橙葉片的亞油酸、棕櫚酸含量低,亞麻酸含量高,相對(duì)的脂肪酸不飽和度程度也高;然后抗寒能力比較差的哈姆林甜橙、伏令夏橙和粗檸檬卻與此相反,由此可見(jiàn)脂肪酸不飽和程度與質(zhì)膜的相變及流動(dòng)性有著密切關(guān)系。孫中海等[37]同樣認(rèn)為柑橘質(zhì)膜的不飽和程度與抗寒性呈正相關(guān)。
通過(guò)基因工程手段改變植物膜脂脂肪酸的組成,從而提高植物抗寒性的研究已有報(bào)道[23]。郭惠紅等[22]將從枳中獲得甘油?3?磷酸?;D(zhuǎn)移酶(glycerol?3?phosphat?e?acyl?transferase,GPAT)基因?qū)霚刂菝鄹毯吞鸪戎?,以提高這2個(gè)柑橘品種的抗寒性,GPAT是磷酰甘油PG生成的關(guān)鍵酶,很大程度上決定了細(xì)胞膜PG的不飽和度。
3.3 外源抗氧化酶基因途徑
低溫脅迫下寒敏感植物細(xì)胞膜的傷害,可能與活性氧的升高有關(guān)。細(xì)胞原本就具有抗氧化能力,能夠清除活性氧和自由基,其中包括超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化物酶(POD)、谷胱甘肽還原酶(GR)、過(guò)氧化氫酶(CAT)等。細(xì)胞的抗氧化能力與柑橘的抗寒性呈正相關(guān),因此細(xì)胞的氧化應(yīng)激機(jī)制可能是調(diào)節(jié)柑橘抗寒性的另一重要機(jī)制。Sala等[38]發(fā)現(xiàn)柑橘品種間的抗旱性能的不同主要在于CAT,GR對(duì)過(guò)氧化氫的清除能力不同,經(jīng)低溫馴化后的柑橘,體內(nèi)POD和SOD活性顯著增強(qiáng),葉片抗寒能力也顯著提高。另一方面,有研究表明低溫馴化提升了柑橘細(xì)胞體內(nèi)抗氧化劑的含量和抗氧化酶活性,從而提高了柑橘的抗寒性。瞿金旺[39]利用根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)法,將蘋(píng)果中獲得的亞精胺合成酶基因MSPDS1轉(zhuǎn)入金錢(qián)橘,設(shè)想通過(guò)基因工程技術(shù)手段來(lái)提高柑橘內(nèi)源多胺的含量,從而增強(qiáng)金錢(qián)橘抗寒性。研究結(jié)果表明低溫脅迫下轉(zhuǎn)入亞精胺合成酶基因MSPDS1的金錢(qián)橘葉片比對(duì)照植株葉片的相對(duì)電導(dǎo)率低,表現(xiàn)出更強(qiáng)的抗寒性。
對(duì)柑橘抗寒基因的研究其最大意義在于通過(guò)基因工程方法提高一些寒敏感柑橘的抗寒能力。目前,已從魚(yú)類(lèi)抗凍基因途徑、脂肪酸去飽和代謝關(guān)鍵酶基因途徑、外源抗氧化酶基因途徑這3個(gè)方面取得了一定的進(jìn)展,其應(yīng)用前景非常廣闊[40]。柑橘作為重要的經(jīng)濟(jì)物種,在進(jìn)行抗寒育種的同時(shí)應(yīng)將基因工程技術(shù)手段與遺傳育種、化學(xué)調(diào)控及科學(xué)栽培方法相結(jié)合,以最終提高柑橘抗寒性,防止冷害,打破柑橘種植地域限制,提高柑橘品質(zhì)和產(chǎn)量。
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(責(zé)任編輯:張 韻)
S 666
A
0528?9017(2015)11?1845?06
文獻(xiàn)著錄格式:張真真,邱立軍,劉博文,等.柑橘抗寒相關(guān)基因及抗寒基因工程研究進(jìn)展[J].浙江農(nóng)業(yè)科學(xué),2015,56(11):1845-1850.
DOI 10.16178/j.issn.0528?9017.20151146
2015?07?02
浙江省果品農(nóng)業(yè)新品種選育(2012C12904);國(guó)家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專(zhuān)項(xiàng)(CARS?27)
張真真(1983-),浙江舟山人,農(nóng)藝師,碩士研究生,主要從事浙江省特色經(jīng)濟(jì)植物生物技術(shù)研究工作。E?mail:zhangzhenzhen1983@sina.com。
徐建國(guó)。E?mail:xujg@m(xù)ail.zaas.ac.cn。