IL-10-592A/C基因多態(tài)性與結(jié)核病易感性關(guān)系的Meta分析

方紅偉 郭向東 李 峰

IL-10-592A/C基因多態(tài)性與結(jié)核病易感性關(guān)系的Meta分析

方紅偉1郭向東2,*李 峰1

目的：探討白細(xì)胞介素-10(IL-10)基因592A/C位點(diǎn)多態(tài)性與結(jié)核病易感性的關(guān)系。方法：檢索PubMed、Medline、EMbase等數(shù)據(jù)庫，搜集相關(guān)病例對(duì)照研究文獻(xiàn)。文獻(xiàn)經(jīng)篩選和方法學(xué)質(zhì)量評(píng)價(jià)后，采用Stata12.0軟件進(jìn)行Meta分析，計(jì)算合并OR值及其95%CI，最后進(jìn)行敏感性分析及發(fā)表偏倚評(píng)估。結(jié)果：共16篇文獻(xiàn)納入研究，包括結(jié)核病患者(病例組)4 115例，健康體檢者(對(duì)照組)5 441例。Meta分析顯示，在各個(gè)遺傳模型中，IL-10-592A/C基因多態(tài)性與結(jié)核病總體發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)關(guān)系不大。對(duì)納入研究以世界各洲為分層因素進(jìn)行分析，在亞洲人群中等位基因A者結(jié)核病發(fā)病率高于等位基因C者(OR=1.26, 95%CI=1.08-1.28，P<0.05)；純合子基因型AA者結(jié)核病發(fā)病率高于純合子基因型CC者(OR=1.50, 95%CI=1.07-2.12，P<0.05)；純合子基因型AA者結(jié)核病發(fā)病率高于AC+CC基因型者(OR=1.33, 95%CI=1.10-1.62，P<0.05)。經(jīng)Begg’s與Egger’s檢驗(yàn)，納入的所有研究未見明顯發(fā)表偏倚。結(jié)論：IL-10-592A/C基因多態(tài)性中等位基因A可能與亞洲人群結(jié)核病易感性風(fēng)險(xiǎn)增高有關(guān)。

白細(xì)胞介素10；基因多態(tài)性；結(jié)核??；Meta分析

結(jié)核病傳染性強(qiáng),有報(bào)道全世界有1/3的人感染過結(jié)核[1]，但只有1/10發(fā)展為活動(dòng)性結(jié)核病，提示宿主易感性、環(huán)境因素和其它因素等對(duì)結(jié)核病的發(fā)生發(fā)展可能起重要作用[2]。白細(xì)胞介素-10(IL-10)是炎癥反應(yīng)多功能調(diào)節(jié)因子，可以抑制細(xì)胞增殖及Th細(xì)胞介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)[3]。有研究表明，IL-10基因啟動(dòng)子區(qū)單核苷酸多態(tài)性592A/C可影響其轉(zhuǎn)錄水平，從而影響宿主的免疫功能[4]。目前關(guān)于IL-10 -592A/C多態(tài)性與結(jié)核病易感性關(guān)系的病例對(duì)照研究結(jié)論不一，使結(jié)果可信度受限。本文對(duì)1990-01-01-2014-05-01國內(nèi)外有關(guān)結(jié)核病易感性相關(guān)的病例對(duì)照研究文獻(xiàn)進(jìn)行Meta分析，探討IL-10-592A/C多態(tài)性與結(jié)核病易感性的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 檢索策略

采用主題詞法對(duì)數(shù)據(jù)庫PubMed、Medline和Embase進(jìn)行檢索，分別以“IL-10” 或“Interleukin-10”和“tuberculosis”，或“TB”，或“TB infection”，或“TB disease”，以及“polymorphism”，或“genotype”，或“variant”為英文檢索詞進(jìn)行檢索；同時(shí)以“IL-10”或“白介素-10”以及“結(jié)核病”，或“TB”，或“結(jié)核感染”和“多態(tài)性”，或“基因型”，或“基因變異”為中文關(guān)鍵詞檢索中國知網(wǎng)(CNKI)、中國生物醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫(CBM)、維普資訊(VIP)和萬方數(shù)據(jù)庫(WanFang Data)。

1.2 納入和排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：IL-10-592A/C基因多態(tài)性與結(jié)核病易感性的相關(guān)性病例對(duì)照研究，相關(guān)數(shù)據(jù)詳細(xì)；若為重復(fù)發(fā)表文獻(xiàn)，選擇質(zhì)量最高且樣本量最大者(1篇)。排除標(biāo)準(zhǔn)：重復(fù)文獻(xiàn)；綜述文獻(xiàn)；無法獲取有效數(shù)據(jù)的文獻(xiàn)。

1.3 文獻(xiàn)質(zhì)量評(píng)價(jià)與資料提取

根據(jù)Newcastle-Ottawa Scale (NOS)原則[5]對(duì)納入文獻(xiàn)從3個(gè)方面進(jìn)行質(zhì)量評(píng)估。(1)選擇性：疾病診斷標(biāo)準(zhǔn)是否清楚，病例是否具有代表性，對(duì)照組描述是否清楚及定義是否明確；(2)可比性：所設(shè)計(jì)的病例對(duì)照研究是否具有可比性；(3)暴露性：病例對(duì)照研究是否發(fā)生暴露、暴露的方式及頻率。滿分10分，達(dá)到7分者為高質(zhì)量研究。本研究納入7分以上的文獻(xiàn)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用Stata 12.0軟件進(jìn)行分析并計(jì)算納入研究各模型基因頻率的OR值及其 95%CI，計(jì)算對(duì)照組的Hardy-Weinberg 平衡，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。采用χ2檢驗(yàn)分析各研究結(jié)果間的異質(zhì)性(檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.10)，若各研究間不存在異質(zhì)性，采用固定效應(yīng)模型進(jìn)行Meta分析，相反則采用隨機(jī)效應(yīng)模型進(jìn)行Meta分析。采用逐一排除研究的方法進(jìn)行敏感性分析，重新估計(jì)合并效應(yīng)量，并與排除前的合并效應(yīng)量進(jìn)行比較。采用Begg’s及Egger’s檢驗(yàn)評(píng)估文獻(xiàn)的發(fā)表偏倚。

2 結(jié) 果

2.1 文獻(xiàn)檢索結(jié)果及質(zhì)量評(píng)價(jià)

初檢出相關(guān)文獻(xiàn) 88 篇，經(jīng)逐層篩選后，最終納入16個(gè)病例對(duì)照研究[6-21]，共有結(jié)核病患者(病例組)4 115例，健康體檢者(對(duì)照組)5 441例。其中研究對(duì)象為亞洲人4篇，歐洲人3篇，美洲人4篇，非洲人5篇。納入研究的基本信息見表1。文獻(xiàn)質(zhì)量評(píng)價(jià)結(jié)果顯示，納入研究的診斷標(biāo)準(zhǔn)明確、基因檢測(cè)方法正確、結(jié)果數(shù)據(jù)合理，16個(gè)研究均有等位基因數(shù)據(jù)，其中12個(gè)研究的對(duì)照組符合Hardy-Weinberg平衡；4個(gè)研究的對(duì)照組不符合Hardy-Weinberg平衡(本量不足的情況下，Hardy-Weinberg不平衡的研究也被納入)。

表1 納入研究的基本特征

2.2 Meta分析結(jié)果

異質(zhì)性分析結(jié)果顯示，除雜合子遺傳模型不存在明顯異質(zhì)性，采用固定效應(yīng)模型進(jìn)行Meta分析外，其它模型均存在一定的異質(zhì)性，故采用隨機(jī)效應(yīng)模型。在各個(gè)遺傳模型中，IL-10-592A/C基因多態(tài)性與結(jié)核病總體發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)關(guān)系不大。對(duì)納入研究以洲別為分層因素進(jìn)行分析的結(jié)果表明，亞洲人群中等位基因A者結(jié)核病發(fā)病率高于等位基因C者(OR=1.26, 95%CI=1.08-1.28，P<0.05)；純合子基因型AA者結(jié)核病發(fā)病率高于純合子基因型CC者(OR=1.50, 95%CI=1.07-2.12，P<0.05)；純合子基因型AA者結(jié)核病發(fā)病率高于AC+CC基因型者(OR=1.33, 95% CI=1.10-1.62，P<0.05)。見圖1、表2。

圖1 IL-10 -592A/C基因多態(tài)性各遺傳模型森林圖

表2 IL-10 -592A/C基因多態(tài)性與結(jié)核病易感性關(guān)系的Meta分析結(jié)果

2.3 發(fā)表偏倚分析

各研究間均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上的發(fā)表偏倚。見圖2、表3。

表3 各研究的發(fā)表偏倚評(píng)估

圖2 文獻(xiàn)發(fā)表偏倚分析的Begg’s漏斗圖

3 討 論

目前，發(fā)展中國家的結(jié)核病發(fā)病率最高。以往研究[2]表明，遺傳因素與結(jié)核病的發(fā)生有關(guān)，故本研究對(duì)IL-10基因多態(tài)性與結(jié)核病的易感性進(jìn)行系統(tǒng)分析。本研究所納入的16篇文獻(xiàn)中，12項(xiàng)研究的對(duì)照組符合Hardy-Weinberg平衡，并按前述質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)所有納入文獻(xiàn)進(jìn)行評(píng)分，納入文獻(xiàn)均為高質(zhì)量文獻(xiàn)。 本研究結(jié)果顯示，IL-10-592A/C基因多態(tài)性與結(jié)核病總體發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)關(guān)系不大。但對(duì)納入研究以洲別為分層因素進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，亞洲人群中等位基因A者結(jié)核病發(fā)病率高于等位基因C者；純合子遺傳模型中純合子基因型AA者結(jié)核病發(fā)病率高于純合子基因型CC者；隱性遺傳模型中純合子基因型AA者結(jié)核病發(fā)病率高于AC+CC基因型者。說明IL-10-592A/C的A等位基因能增加亞洲人群患結(jié)核病的風(fēng)險(xiǎn)，其生物學(xué)機(jī)制可能為與等位基因A相比，C等位基因可明顯提高IL-10轉(zhuǎn)錄位點(diǎn)與轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合能力，導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄活性增高，上調(diào)IL-10蛋白表達(dá)水平，有利于機(jī)體清除外來病原菌，從而使結(jié)核病易感性降低。進(jìn)一步分析表明，除亞洲人群外，其它各洲人群在各個(gè)模型中的差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示IL-10-592A/C基因多態(tài)性與結(jié)核病易感性的關(guān)系可能僅僅存在于亞洲人群中。

本研究的Begg’s與Egger’s檢驗(yàn)分析未發(fā)現(xiàn)各研究間存在顯著發(fā)表偏倚，因而認(rèn)為所納入的文獻(xiàn)質(zhì)量較高，其結(jié)果也具有一定的可信度。但是，本研究尚存在以下局限性：各洲研究數(shù)量差異較大，進(jìn)行分析時(shí)有可能得出假陽性結(jié)果；且對(duì)所納入的病例對(duì)照研究沒有進(jìn)行更深入的亞組分析。

綜上所述，亞洲人群IL-10-592A/C基因多態(tài)性中等位基因模型、純合子模型以及隱性模型與結(jié)核病易感性有關(guān)，但上述結(jié)論仍需更多高質(zhì)量、大規(guī)模的研究進(jìn)一步證實(shí)。

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本文第一作者簡介：

方紅偉(1976-)，男，漢族，主治醫(yī)師，主要從事呼吸道細(xì)菌耐藥性研究

1 Gouzy A, Nigou J, Gilleron M, et al. Tuberculosis 2012: biology, pathogenesis and intervention strategies;an update from the city of light[J]. Research in Microbiology, 2013, 164(3):270-280.

2 Hill AV. Aspects of genetic susceptibility to human infectious diseases[J]. Annual Review of Genetics, 2006, 40(12):469-486.

3 de Waal Malefyt R, Abrams J, Bennett B, et al. Interleukin 10(IL-10) inhibits cytokine synthesis by human monocytes: an autoregulatory role of IL-10 produced by monocytes[J]. The Journal of Experimental Medicine, 1991,174(5): 1 209-1 220.

4 Howell WM, Rose-Zerilli MJ. Cytokine gene polymorphisms, cancer susceptibility, and prognosis[J]. The Journal of Nutrition, 2007,137(1 Suppl): S194-S199.

5 Stang A. Critical evaluation of the Newcastle-Ottawa scale for the assessment of the quality of nonrandomized studies in meta-analyses[J]. European Journal of Epidemiology, 2010, 25(9):603-605.

6 Amirzargar AA, Rezaei N, Jabbari H, et al. Cytokine single nucleotide polymorphisms in Iranian patients with pulmonary tuberculosis[J]. European Cytokine Network, 2006,17(2): 84-89.

7 Bellamy R, Ruwende C, Corrah T, et al. Assessment of the interleukin 1 gene cluster and other candidate gene polymorphisms in host susceptibility to tuberculosis[J]. Tubercle and Lung Disease, 1998,79(2): 83-89.

8 Fitness J, Floyd S, Warndorff DK, et al. Large-scale candidate gene study of tuberculosis susceptibility in the Karonga district of northern Malawi[J]. The American Journal of Tropical Medicine and Hygiene, 2004,71(3): 341-349.

9 Shin HD, Park BL, Kim YH, et al. Common interleukin 10 polymorphism associated with decreased risk of tuberculosis[J]. Experimental &Molecular Medicine, 2005,37(2): 128-132.

10 Oral HB, Budak F, Uzaslan EK, et al. Interleukin-10 (IL-10) gene polymorphism as a potential host susceptibility factor in tuberculosis[J]. Cytokine, 2006,35(3-4):143-147.

11 Henao MI, Montes C, Paris SC, et al. Cytokine gene polymorphisms in Colombian patients with different clinical presentations of tuberculosis[J]. Tuberculosis, 2006,86(1):11-19.

12 Ates O, Musellim B, Ongen G, et al. Interleukin-10 and tumor necrosis factor-alpha gene polymorphisms in tuberculosis[J]. Journal of Clinical Immunology, 2008,28(3):232-236.

13 Wu F, Qu Y, Tang Y, et al. Lack of association between cytokine gene polymorphisms and silicosis and pulmonary tuberculosis in Chinese iron miners[J]. J Occup Health, 2008,50(6):445-454.

14 Thye T, Browne EN, Chinbuah MA, et al. IL10 haplotype associated with tuberculin skin test response but not with pulmonary TB[J]. PLoS One, 2009,4(5):e5 420.

15 Trajkov D, Trajchevska M, Arsov T, et al. Association of 22 cytokine gene polymorphisms with tuberculosis in Macedonians[J].Indian J Tuberc,2009,56(3):117-131.

16 Taype CA, Shamsuzzaman S, Accinelli RA, et al. Genetic susceptibility to different clinical forms of tuberculosis in the Peruvian population[J]. Infect Genet Evol, 2010,10(4):495-504.

17 Ben-Selma W, Harizi H, Boukadida J. Association of TNF-alpha and IL-10 polymorphisms with tuberculosis in Tunisian populations[J]. Microbes Infect, 2011,13(10):837-843.

18 Liang L, Zhao YL, Yue J, et al. Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and their protein production in pleural fluid in patients with tuberculosis[J]. FEMS Immunology &Medical Microbiology, 2011,62(1): 84-90.

19 Spinass L, Lopes M, Miranda A, et al. Partial mapping of the IL-10 promoter region: identification of new SNPs and association with tuberculosis outcome in brazilians[J].Understanding Tuberculosis,2012,24(2):357-366.

20 Garcia-Elorriaga G, Vera-Ramirez L, del Rey-Pineda G, et al. 592 and 1082 interleukin-10 polymorphisms in pulmonary tuberculosis with type 2 diabetes[J]. Asian Pac J Trop Med, 2013,6(7):505-509.

21 Mhmoud N, Fahal A, van de Sande WJ. Association of IL-10 and CCL5 single nucleotide polymorphisms with tuberculosis in the Sudanese population[J]. Tropical Medicine &International Health，2013,18(9):1 119-1 127.

促生長激素釋放肽通過mTOR/P70S6K信號(hào)通路抑制高糖誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡

本刊編委，湖北省武漢市一醫(yī)院崔天盆教授(通訊作者)指導(dǎo)朱建華(第一作者)等在《Peptides》(2014，52：23-28，IF=2.6)發(fā)表了題為“Ghrelin proects human umbilical vein endothelial cells against high glucose-induced apoptosis via mTOR/P70S6K signaling pathway”的研究論文，主要內(nèi)容如下：

1 研究背景和目的：促生長激素釋放肽(ghrelin)是從胃中分離出的一種新的能促進(jìn)垂體生長激素分泌的肽。研究表明ghrelin在多種細(xì)胞中發(fā)揮抗凋亡作用，但其抗凋亡分子機(jī)制仍不清楚。本文探討ghrelin通過與其受體GHSR1a結(jié)合發(fā)揮抗凋亡效應(yīng)的分子機(jī)制。

2 主要方法：(1)采用Western Blotting檢測(cè)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVECs)表面促生長激素釋放肽受體(GHSR1a)的表達(dá)。(2)經(jīng)高糖誘導(dǎo)HUVECs凋亡；分別用ghrelin、ghrelin受體拮抗劑D-Lys-3-GHRP-6或哺乳類雷帕霉素靶蛋白抑制劑Rapamycin處理HUVECs后，采用流式和TUNEL方法檢測(cè)HUVECs凋亡情況，采用Western Blotting檢測(cè)mTOR信號(hào)通路分子的磷酸化水平以及凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2和Bax的表達(dá)。

3 結(jié)果：(1)HUVEC能表達(dá)GHSR1a。(2)ghrelin可以抑制高糖誘導(dǎo)的HUVECs凋亡；而D-Lys-3-GHRP-6或Rapamycin能夠消除ghrelin的抗凋亡效應(yīng)。(3)ghrelin可誘導(dǎo)HUVECs的mTOR、P70S6K、S6磷酸化，D-Lys-3-GHRP-6能抑制ghrelin的這種誘導(dǎo)作用。(4)ghrelin還能促進(jìn)抗凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá)，下調(diào)凋亡抑制蛋白Bax的表達(dá)。

4 結(jié)論：ghrelin通過與HUVEC表面GHSR1a結(jié)合活化mTOR/P70S6K信號(hào)通路而發(fā)揮抗凋亡效應(yīng)；可減輕和緩解糖尿病患者因高血糖導(dǎo)致的血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷。

Association of IL-10-592A/C Gene Polymorphism with Tuberculosis Risk: A Meta-analysis

FANG Hong-wei1, GUO Xiang-dong2,*, LI Feng1

1Department of Respiratory;2Department of Infections Disease, The Fourth Affiliated Hospital of Shihezi University, Shihezi 843000, China;*

Objective: To investigate the association between interleukin-10 (IL-10) gene promoter -592A/C polymorphism and tuberculosis(TB) susceptibility.Method: Such databases as PubMed, MEDLINE and EMbase data were searched to collect the case-control studies published. According to the inclusion and exclusion criteria, the studies were screened, the data were extracted, and the methodological quality of the included studies was evaluated. Then meta-analysis was conducted using Stata 12.0 sotware, the pooled odds ratio (ORs) with 95% conidence interval (CI) were calculated, and the sensitivity and publication bias were evaluated at the same time.Results: A total of 16 studies were included, which involved 4115 cases and 5441 healthy controls. The results of meta-analysis showed that, the IL-10 -592A/C polymorphism had no association with a increased risk of TB. In the stratified analysis by ethnicity, significantly increased risk of TB was associated with Asians in IL-10 -592A/C polymorphism (A vs. C: OR=1.26, 95% CI=1.08-1.28，P<0.05;AA vs. CC: OR=1.50, 95% CI= 1.07-2.12，P<0.05;AA vs. AC+CC: OR=1.33, 95% CI=1.10-1.62，P<0.05). All of the included studies showed no publication bias by Begg's and Egger's test.Conclusion: IL-10 -592A/C polymorphism in allele A might be a genetic risk factor that increases TB susceptibility for Asians.

Interleukin 10;Gene polymorphism;Tuberculosis;Meta-analysis

石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院第四附屬醫(yī)院，石河子 843000；1呼吸科；2感染科 ;*

，E-mail:229497912@qq.com

本文2014-09-17收到，2014-10-16修回

R521

A

1005-1740(2015)01-0046-05