手足口病患兒血清細(xì)胞因子及自然殺傷細(xì)胞表達(dá)的變化及臨床意義

路 燕

(江蘇省南通市第一人民醫(yī)院 兒科，江蘇 南通，226001)

手足口病(HFMD)是兒童常見(jiàn)病，以發(fā)熱和手、足、口腔等部位出現(xiàn)皮疹或皰疹為主要臨床特征，由腸道病毒(EV)感染引起，少數(shù)患兒可出現(xiàn)嚴(yán)重并發(fā)癥，甚至死亡［1-2］。最近10 多年來(lái)，HFMD 在亞太地區(qū)多次出現(xiàn)大規(guī)模流行，受到廣泛關(guān)注［3］。目前，重癥HFMD 尚無(wú)特效治療方案，早期診斷、識(shí)別危重癥患兒，及時(shí)給予呼吸、循環(huán)支持及防治腦損傷是降低病死率的關(guān)鍵［4］。目前尚未發(fā)現(xiàn)重癥HFMD 的特異性檢測(cè)指標(biāo)，但有研究表明，病情嚴(yán)重程度不同的EV71 感染患兒，其免疫功能存在差異［5］。因此，本研究檢測(cè)了56例HFMD 患兒血清細(xì)胞因子及自然殺傷細(xì)胞(NK 細(xì)胞)的表達(dá)水平，分析不同病情患兒免疫功能的差異，以期為臨床診治重癥HFMD 提供參考，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2013年1月—2014年12月在江蘇省南通市第一人民醫(yī)院兒科就診的HFMD 患兒56例，均根據(jù)臨床表現(xiàn)、實(shí)驗(yàn)室檢查等確診，根據(jù)病情輕重分為輕癥組31例和重癥組25例，病情診斷參考衛(wèi)生部指南［6］相關(guān)標(biāo)準(zhǔn):患兒表現(xiàn)為手、足、口腔、臀部皮疹，伴或不伴發(fā)熱為輕癥;出現(xiàn)嗜睡、譫妄、肢體抖動(dòng)、驚厥、腦膜刺激征等神經(jīng)系統(tǒng)受累表現(xiàn)為重癥。輕癥組男17例，女14例;年齡8 個(gè)月～8歲，平均(29.65±3.14)個(gè)月。重癥組男12例，女13例;年 齡9 個(gè)月～8歲，平 均(28.73±4.06)個(gè)月。另選取同期健康體檢兒童30例設(shè)為對(duì)照組，其中男14例，女16例;年齡7個(gè)月～9歲，平均(30.11±3.85)個(gè)月。3組性別、年齡等一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 方法

3組均于入組第2 天清晨抽取肘靜脈血，以酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清白介素(IL)-6、IL-12、腫瘤壞死因子?α(TNF?α)水平，試劑盒購(gòu)自美國(guó)Panomics 公司;以流式細(xì)胞儀檢測(cè)NK(以CD16+CD56+表示)比例，儀器購(gòu)自美國(guó)Becton Dickinson公司。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察3組血清IL-6、IL-12、TNF?α 水平及CD16+CD56+含量差異，并分析各指標(biāo)與病情的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0 軟件包處理數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示，組間比較采用t 檢驗(yàn)，生化指標(biāo)與病情的相關(guān)性采用Spearman 等級(jí)相關(guān)性分析。

2 結(jié)果

2.1 3組細(xì)胞因子及NK 含量比較

輕癥組血清IL-6、IL-12、TNF?α 水平顯著高于重癥組及對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，重癥組僅IL-12 水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，而IL-6 和TNF?α 水平與對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);重癥組CD16+CD56+細(xì)胞含量顯著高于輕癥組和對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，而輕癥組和對(duì)照組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表1。

表1 3組細(xì)胞因子及NK 含量比較()

表1 3組細(xì)胞因子及NK 含量比較()

與對(duì)照組比較，＊＊P＜0.01;與輕癥組比較，##P＜0.01。

2.2 各指標(biāo)與病情的相關(guān)性分析

經(jīng)spearman 等級(jí)相關(guān)性分析，結(jié)果表明IL-6和TNF?α 表達(dá)水平與病情嚴(yán)重程度呈負(fù)相關(guān)(r=－0.467，－0.518，P＜0.01)，IL-12 表達(dá)水平和CD16+CD56+含量與病情無(wú)顯著相關(guān)性(P＞0.05)，見(jiàn)表2。

3 討論

HFMD 已在全球多個(gè)國(guó)家和地區(qū)暴發(fā)或流行，近年來(lái)在中國(guó)的發(fā)病率呈升高趨勢(shì)，呈現(xiàn)全年散發(fā)和季節(jié)性流行趨勢(shì)。引起HFMD的病毒屬于小RNA 病毒科EV 屬，以EV71 和CVA16 最常見(jiàn)［7－8］。HFMD 是自限性疾病，目前對(duì)癥和支持治療是其主要治療方案，多數(shù)患兒可痊愈，但個(gè)別重癥患兒病情進(jìn)展迅速，可出現(xiàn)腦炎、無(wú)菌性腦膜炎、神經(jīng)源性肺水腫等嚴(yán)重并發(fā)癥，甚至死亡［9］。

表2 各指標(biāo)與病情的相關(guān)性分析

近年來(lái)大量研究［10］表明，HFMD 患兒血清細(xì)胞因子水平發(fā)生顯著變化，且與病情嚴(yán)重程度存在一定關(guān)系。唐漢慶等［11］報(bào)道，HFMD 患兒血清IL-17、IL-22、IL-23 及TNF?α 水平均較健康幼兒升高。謝金純等［12］報(bào)道，重癥和輕癥HFMD 患兒血清IL-10、IL-6、TNF?α 等多種細(xì)胞因子表達(dá)水平高于健康組。本研究選取IL-6、IL-12 及TNF?α這3 個(gè)前炎癥性細(xì)胞因子為觀察指標(biāo)，結(jié)果表明，輕癥組血清IL-6、IL-12、TNF?α 水平顯著高于重癥組及對(duì)照組，重癥組僅IL-12 水平高于對(duì)照組，與李春玲等［13］報(bào)道相似，分析其原因可能是:病毒感染機(jī)體后，刺激吞噬細(xì)胞等非特異性免疫反應(yīng)，大量分泌IL-6、IL-12、TNF?α 等前炎癥細(xì)胞因子，為疾病的快速自限提供免疫環(huán)境，屬于全身炎癥反應(yīng)時(shí)相，而隨著炎癥發(fā)展，這些炎癥因子的合成逐漸減少或逐漸被消耗，其表達(dá)水平會(huì)趨于下降，接近正常。

除炎性細(xì)胞因子外，淋巴細(xì)胞含量發(fā)生變化也是HFMD 常見(jiàn)的臨床特征［14］。曾慧慧等［15］報(bào)道，HFMD 患兒T 淋巴細(xì)胞亞群的均數(shù)顯著低于正常參考值。NK 細(xì)胞是機(jī)體抗抗病毒等微生物的第一道免疫防線，其可在免疫應(yīng)答早期就發(fā)揮生物學(xué)活性［16］。當(dāng)疫球蛋白A(IgA)與靶細(xì)胞結(jié)合，并與NK 細(xì)胞CD16結(jié)合，即可發(fā)揮對(duì)靶細(xì)胞的殺傷作用［17］。本研究結(jié)果表明，隨著病情的加重，HFMD 患兒NK 細(xì)胞的含量逐漸下降，提示重癥患兒免疫功能紊亂，與付丹等［5］報(bào)道一致。此外，相關(guān)性分析表明，IL-6 和TNF?α 表達(dá)水平與病情嚴(yán)重程度呈負(fù)相關(guān)，提示前炎癥因子在疾病起始階段處于分泌亢進(jìn)狀態(tài)，而重癥患兒可能處于代償性抗炎癥狀態(tài)，臨床治療時(shí)應(yīng)分階段調(diào)節(jié)患兒的免疫功能，實(shí)施個(gè)體化治療。

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