兔病毒性出血癥的流行、診斷及防控

汪亮

（黑龍江省大慶市大同區(qū)畜牧獸醫(yī)水產(chǎn)局，黑龍江 大慶 163515）

兔病毒性出血癥的流行、診斷及防控

汪亮

（黑龍江省大慶市大同區(qū)畜牧獸醫(yī)水產(chǎn)局，黑龍江 大慶 163515）

兔病毒性出血癥又名兔瘟，是由兔病毒性出血癥病毒所引起的兔的一種急性敗血癥、高度接觸性、致死性、以全身實質器官出血為主要特征的傳染病。

1 流行病學

本病的主要傳染源是病兔和帶毒兔，傳播途徑主要為病兔或帶毒兔與健康兔接觸而感染，也可間接傳播。本病只發(fā)生于家兔，毛用兔的易感性略高于皮用兔，其中長毛兔最易感，哺乳仔兔很少發(fā)病死亡。本病發(fā)病急，病死率高，常呈爆發(fā)性流行，發(fā)病率和病死率均高達95%以上。一年四季均可發(fā)生，北方以冬春季多發(fā)，可能與冬季寒冷、飼料單一有關。

2 臨診癥狀

潛伏期1～3d?？煞?型：

2.1 最急性型多見于非疫區(qū)或流行初期，常發(fā)生于夜間，無任何前兆或僅表現(xiàn)短暫興奮，突然倒地，抽搐，尖叫數(shù)聲而死。

2.2 急性型病兔食欲減少或停止，精神沉郁，被毛粗亂，結膜潮紅，體溫升高達41℃以上。臨死前病兔癱軟，不能站立，但不時掙扎，高聲尖叫，抽搐，鼻孔流出泡沫性液體，死后呈角弓反張。

2.3 慢性型多見于老疫區(qū)或流行后期。潛伏期和病程較長，精神不振，采食減少，迅速消瘦，衰弱而死。耐過兔生長緩慢，發(fā)育較差。

3 病理變化

本病以實質器官淤血、出血為主要特征。氣管黏膜充血、出血，有多量帶血泡沫淤塞。肺充血、出血，支氣管管腔中有帶血泡沫阻塞。心肌變性，心內(nèi)膜及外膜下有點狀出血。腹腔積水，呈淡紅色乃至血色。肝腫大淤血，肝實質脂肪變性，呈淺棕色或土黃色。脾腫大呈紫黑色。腸系膜淋巴結腫大出血。

4 實驗室檢驗

兔病毒性出血癥檢疫檢驗常用方法有間接酶聯(lián)免疫吸附試驗、血凝試驗和血凝抑制試驗。

4.1 器材準備（1）96孔V型或U型微量板，微型振蕩器，50μL移液器。（2）pH7.2、0.01mol/L磷酸鹽緩沖液配制。甲液：十二水磷酸氫二鈉35.8g，加蒸餾水1000mL。乙液：二水磷酸二氫鈉15.6g，加蒸餾水1000mL。使用時取甲液72mL、乙液28mL，加氯化鈉8.76g，120℃高壓滅菌30min。（3）1%人“O”型血球：加入10～20倍的生理鹽水或磷酸鹽緩沖液于人“O”型抗凝血中，洗滌3～4次，每次以2000轉/分離心15min，吸取上層血漿、白細胞等上清液，制成1%紅細胞懸液。（4）被檢病料的處理：取病死兔肝臟剪碎，用生理鹽水或磷酸鹽緩沖液作1：10稀釋，研制成懸液待檢。

4.2 血凝試驗（檢測抗原）在血凝板上每排2～11孔各加入磷酸鈉緩沖液25μL，然后在第一孔和第二孔各加入病料懸液25μL，用微量稀釋器從第二孔依次將病毒作倍比稀釋至第十一孔，棄去25μL。第十二孔為正常兔肝懸液對照，每孔加入1%人“O”型紅細胞懸液25μL，于微型振蕩器搖均，置37℃溫箱45min，待對照孔紅細胞完全沉淀后，觀察血凝圖象判定。血凝試驗結果判定：以出現(xiàn)“＋＋”凝集的病毒最大稀釋度為該病毒的血凝價。血凝價高于1:2以上時，可判為陽性。多數(shù)病兔的肝組織懸液，病毒血凝價在1：80～1：640之間。計算含4個血凝單位的抗原濃度：抗原應稀釋倍數(shù)=血凝滴度（血凝價）/4。

4.3 血凝抑制試驗（檢測血清抗體）血凝抑制試驗可進一步鑒定病毒或進行免疫監(jiān)測等。（1）陽性血清：按常法對健康兔用兔瘟疫苗進行免疫。采集血液并分離血清，冰凍保存?zhèn)溆?。血凝抑制價應在1:320以上，用前作1：10稀釋。（2）陰性血清：血凝抑制價應在1：5以下，用前作1：10稀釋。（3）被檢血清：試驗前作1：5稀釋。于微量板的第二孔至第十二孔中加入磷酸鹽緩沖液各50μL。然后在第一孔和第二孔各加入1：5稀釋的被檢血清50μL，用微量稀釋器從第二孔依次作倍比稀釋至第十孔，最后棄去50μL。第十一孔為陽性血清對照，第十二孔為抗原對照。各孔加入濃度為4個單位的病毒抗原50μL。置室溫（18～20℃）作用20min。每孔加入1%入“O”型紅細胞懸液50μL，振蕩后室溫靜置30min，觀察結果。血凝抑制試驗結果判定：血清對照、紅細胞對照、陽性血清對照結果應為不凝集紅細胞，抗原對照、陰性血清對照應出現(xiàn)凝集現(xiàn)象，本試驗成立。以完全抑制紅細胞凝集的最大稀釋度為該血清的血凝抑制滴度。血凝抑制價在1：10以下的家兔，不能抵御兔出血癥病毒的攻擊。

5 防控措施

預防本病應主要采取消毒、隔離、封鎖、毀尸等綜合性措施。目前本病無有效治療藥物，但病初可用高免血清治療（成年兔2～3mL），療效較好。疫區(qū)定期用組織滅活疫苗進行接種，一年免疫二次，劑量1mL，皮下注射。免疫期可持續(xù)半年以上。

10．3969/J.ISSN．1671-6027．2015．10.006