豬傳染性萎縮性鼻炎的診斷方法

周鳳萍，周云峰，翟宇，莫添添，王敏

（1.吉林省梅河口市一座營鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，吉林梅河口 135014；2.吉林省鎮(zhèn)賚縣疫病預(yù)防控制中心，吉林鎮(zhèn)賚 137300；

3.吉林省梅河口市動物疫病預(yù)防控制中心，吉林梅河口 135000；4.吉林省動物衛(wèi)生監(jiān)督所，吉林 13000）

豬傳染性萎縮性鼻炎的診斷方法

周鳳萍1，周云峰2，翟宇3，莫添添3，王敏4

（1.吉林省梅河口市一座營鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，吉林梅河口 135014；2.吉林省鎮(zhèn)賚縣疫病預(yù)防控制中心，吉林鎮(zhèn)賚 137300；

3.吉林省梅河口市動物疫病預(yù)防控制中心，吉林梅河口 135000；4.吉林省動物衛(wèi)生監(jiān)督所，吉林 13000）

豬傳染性萎縮性鼻炎是由支氣管敗血波氏桿菌或/和產(chǎn)毒素性多殺性巴氏桿菌感染而引起的豬的一種嚴(yán)重的慢性呼吸道傳染病。該病的診斷可以從臨床癥狀進(jìn)行初步診斷，實(shí)驗(yàn)室診斷可以分為血清學(xué)、X線檢查及分子生物學(xué)方法。本文著重對該病的診斷方法進(jìn)行了概述。

豬萎縮性鼻炎；波氏桿菌；多殺性巴氏桿菌；診斷

豬傳染性萎縮性鼻炎是由支氣管敗血波氏桿菌（Bb）引起的豬的一種嚴(yán)重的慢性呼吸道傳染病，亦或與產(chǎn)毒素性多殺性巴氏桿菌混合感染。臨床上表現(xiàn)為漿液性卡他型鼻炎、嚴(yán)重的發(fā)展為化膿性鼻炎、鼻甲骨萎縮扭曲、顏面部變形、采食困難、生長遲緩和生產(chǎn)能力下降。本病廣泛存在于全世界所有養(yǎng)豬國家，是對養(yǎng)豬業(yè)危害最大的疾病之一。國際動物衛(wèi)生組織（OIE）將其歸為B類動物傳染疫病。近幾十年來根據(jù)臨床癥狀、血清學(xué)、細(xì)菌學(xué)檢測和流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，本病在我國也有較高的感染率，且存在廣泛。由于臨床癥狀非常明顯，該病的診斷可以從臨床癥狀進(jìn)行初步診斷，如需進(jìn)一步確診，可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷，目前的實(shí)驗(yàn)室診斷可以分為病原學(xué)、血清學(xué)、X線檢查及分子生物學(xué)方法。

1 臨床癥狀

本病感染豬的臨床表現(xiàn)程度與豬只的年齡存在明顯的相關(guān)性。表現(xiàn)為豬齡越小感染率越高，臨床癥狀越為明顯。任何年齡的豬都可發(fā)生本病，但是最為常見于2～5月齡的豬。本病特征性的病變?yōu)楸羌坠前l(fā)育受阻或者是明顯可見的鼻部萎縮、顏面部變形。1.5～2月齡豬感染本病后，出現(xiàn)鼻炎的癥狀，打噴嚏，呼吸時有鼾聲。青年豬或成年豬感染，由于骨骼的發(fā)育已經(jīng)成熟，往往在外觀無面部歪斜，只發(fā)生不同程度的鼻甲骨萎縮病變。但是病豬的體溫、采食、糞便、精神等一般表現(xiàn)為正常。由于臨床癥狀明顯，靠本病的臨床癥狀作出診斷并不難，必要時可通過實(shí)驗(yàn)室進(jìn)一步做出確切的診斷。

2 血清學(xué)診斷

目前只有針對支氣管敗血波氏桿菌的診斷方法，尚未有多殺性巴氏桿菌的血清學(xué)診斷方法方面的報道。豬在感染Bb后2～4周后，血清中就能檢測出凝集抗體，有的稍晚，可能在12周齡以后才能檢測出來，凝集抗體至少可以維持4個月以上。采用血清學(xué)檢測方法中的試管凝集試驗(yàn)（Ta）或者平板凝集試驗(yàn)，將待檢血清作系列倍比稀釋，然后加入等量抗原，充分震蕩或用移液器充分混勻，同時作陰性對照，37℃，溫濕環(huán)境下放置一天左右，從溫箱中取出，在室溫環(huán)境下放置2h候判定結(jié)果，1：80以上即為陽性。

3 X線檢查

X線診斷可以作為臨床診斷的輔助，主要用于表面觀察并不是太明顯時。該方法可以準(zhǔn)確地反映出活體鼻甲骨的萎縮病變特征，檢查時要以拍攝豬鼻背部位片為主，如果有需要時，也可以拍攝側(cè)位片作為補(bǔ)充，以輔助作出準(zhǔn)確的診斷。健康豬只的鼻背部位片顯示為鼻中隔筆直，兩側(cè)鼻道呈現(xiàn)為均勻的白底狹隙，兩側(cè)鼻甲骨表現(xiàn)為致密的對稱的梭型結(jié)構(gòu)，均勻排列。病變的X線則顯示為鼻中隔萎縮彎曲變形、兩側(cè)的鼻道增寬，兩側(cè)不對稱、鼻甲骨萎縮顯而易見，結(jié)構(gòu)密度降低等。

4 分子生物學(xué)方法

隨著分子生物學(xué)研究的快速發(fā)展，更多的分子生物學(xué)診斷方法得以建立起來并被廣泛應(yīng)用。最先使用PCR方法的為Nagai等學(xué)者，該方法可以檢測并區(qū)分產(chǎn)毒和不產(chǎn)毒的多殺性巴氏桿菌，特異性的引物可以擴(kuò)增毒素基因中的特異性片斷，PCR方法特異性好、敏感性高，最低可檢測到l0pg的DNA。美國學(xué)者Register KB等應(yīng)用一種菌落雜交分析法，該方法是應(yīng)用雙色雜交法同時檢測AR的病原體敗血性波氏桿菌和多殺性巴氏桿菌。優(yōu)點(diǎn)為不需要對受檢細(xì)菌進(jìn)行純代培養(yǎng)，同時雜交出Bb的alcA基因和T+Pm的toxA基因探針，其中alcA為地高辛標(biāo)記，toxA為熒光標(biāo)記，雜交后有Bb存在處顯粉紅色，有T+Pm存在處顯紫色，取樣3天后即可獲得準(zhǔn)確的結(jié)果。國內(nèi)學(xué)者魯承等研究出一種多重PCR方法，其優(yōu)點(diǎn)是可同時檢測Bb和T+Pm兩種致病菌的存在，其敏感性也高于常規(guī)PCR方法，根據(jù)toxA基因和編碼Bb鞭毛的fla基因上游序列，設(shè)計一對特異性引物，提取基因組后，進(jìn)行PCR，之后作電泳觀察結(jié)果。

5 結(jié)語

豬萎縮性鼻炎是世界上影響?zhàn)B豬業(yè)的重大細(xì)菌傳染病之一。在我國也有著廣泛的流行，制約著養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展。為了能夠?qū)Ρ静∽鞒隹焖佟?zhǔn)確診斷，需要未來高效、靈敏、方便、快捷的診斷方法，進(jìn)而才能預(yù)防、控制、凈化該病的流行發(fā)展。

10．3969/J.ISSN．1671-6027．2015．12.054