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      丹參酮ⅡA乳劑對(duì)小鼠腦缺血的保護(hù)作用

      2015-02-12 20:21:32
      醫(yī)藥與保健 2015年9期
      關(guān)鍵詞:丹參酮乳劑腦缺血

      趙 敏

      丹參酮ⅡA乳劑對(duì)小鼠腦缺血的保護(hù)作用

      趙 敏

      目的 探討丹參酮ⅡA對(duì)腦損傷、腦缺血或腦缺血再灌注誘導(dǎo)的小鼠的保護(hù)作用。方法 采用小鼠斷頭模型、小鼠腦卒中模型、小鼠腦缺血再灌注模型,觀察丹參酮ⅡA注射乳劑對(duì)小鼠斷頭后存活時(shí)間、喘氣次數(shù),小鼠腦卒中后的神經(jīng)行為,小鼠腦缺血再灌注后腦內(nèi)SOD活性、MDA含量的影響。結(jié)果 丹參酮ⅡA能延長(zhǎng)小鼠斷頭后的存活時(shí)間、增加斷頭后的喘氣次數(shù),改善腦卒中小鼠的神經(jīng)行為,提高腦缺血再灌注損傷后小鼠腦組織中SOD酶活性,降低MDA含量。結(jié)論 丹參酮ⅡA注射乳劑對(duì)小鼠腦缺血及腦缺血再灌注損傷具有保護(hù)作用。

      丹參酮ⅡA注射乳劑;腦缺血;腦缺血再灌注

      為了解決丹參酮ⅡA不溶于水,成鹽后注射給藥不易透過血腦屏障,將丹參酮ⅡA做成微乳制劑,在不改變其理化性質(zhì)的基礎(chǔ)上,保持其原有的脂溶性和穿過脂雙層生物膜、透過血腦屏障的能力。[1,2]本文利用小鼠腦缺血及腦缺血再灌注模型[3],觀察丹參酮ⅡA對(duì)腦缺血的保護(hù)作用,探討其作用機(jī)制。

      1 準(zhǔn)備

      丹參酮ⅡA注射乳劑(0.3mg/mL),用5%葡萄糖注射液稀釋至所需濃度[4],MDA、SOD 試劑盒[5]。昆明種小鼠,體質(zhì)量 18~24g。CL-7200全自動(dòng)生化分析儀。所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以表示,采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,組間比較采用LSD檢驗(yàn),以P<0.05為差異有顯著性。

      2 方法

      2.1 小鼠斷頭喘氣模型 取小鼠50只,隨機(jī)分為5組,每組10只,雌雄各半。實(shí)驗(yàn)組分別尾靜脈TanⅡA注射乳劑7.8、3.9、1.9mg/kg;陽性對(duì)照組尾靜脈注射TanⅡA磺酸鈉注射液5.2mg/kg;空白對(duì)照組尾靜脈注射等容量的5%葡萄糖注射液20mL/kg。[6]給藥10min后,迅速?gòu)男∈箅p耳后頸部斷頭,觀察小鼠喘氣次數(shù)及喘氣的時(shí)間,實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行LSD檢驗(yàn)。

      2.2 小鼠腦卒中模型 取小鼠雄性50只,分組、給藥同“2.1”。給藥后10min小鼠用乙醚淺麻醉,分離兩側(cè)頸總動(dòng)脈及迷走神經(jīng),左側(cè)頸總動(dòng)脈連同迷走神經(jīng)下置一根直徑為0.2mm的細(xì)鋼絲,結(jié)扎后鋼絲抽出,右側(cè)頸總動(dòng)脈及迷走神經(jīng)完全結(jié)扎。術(shù)后每0.5小時(shí)記錄1次,并計(jì)算3次分?jǐn)?shù)總和。[7]

      評(píng)分標(biāo)準(zhǔn):①毛蓬亂豎起,動(dòng)作緩慢或活動(dòng)減少,觸耳反應(yīng)加強(qiáng),眼瞼下垂,腦卒中指數(shù)各1分,總計(jì)4分;②頭翹起,眼球固定,后肢向外向后伸展,轉(zhuǎn)圈,抽搐或痙攣,腦卒中指數(shù)各3分,總計(jì)15分;③昏迷,腦卒中指數(shù)為6分。

      2.3 小鼠腦缺血再灌注模型 取小鼠雄性60只,隨機(jī)均分成6組,實(shí)驗(yàn)組與陽性對(duì)照組分組與給藥劑量同“2.1”,假模型組及模型組尾靜脈注射等容量的5%葡萄糖注射液20mL/kg。給藥后10min,各組小鼠用乙醚麻醉,分離兩側(cè)頸總動(dòng)脈并結(jié)扎,結(jié)扎20min后松開,恢復(fù)頸總動(dòng)脈血流,小鼠術(shù)后縫合并繼續(xù)飼養(yǎng)。連續(xù)給藥3d,每天1次。假模型組只分離雙側(cè)頸總動(dòng)脈而不結(jié)扎。末次給藥后30min將小鼠處死,取腦,測(cè)定MDA的含量及SOD酶活性。[8-10]

      3 結(jié)果

      實(shí)驗(yàn)2.1:TanⅡA注射乳劑7.8、3.9mg/kg可以顯著延長(zhǎng)小鼠斷頭后的存活時(shí)間,增加喘氣次數(shù),與空白對(duì)照組比較差異顯著(P<0.05,P<0.01)。

      實(shí)驗(yàn)2.2:小鼠腦卒中后腦卒中指數(shù)明顯增加;TanⅡA預(yù)防給藥后,小鼠腦卒中指數(shù)明顯降低,丹參酮各劑量組腦卒中指數(shù)與模型組比較差異均有顯著性(P<0.05,P<0.01)。

      實(shí)驗(yàn)2.3:小鼠在腦缺血再灌注后,腦組織SOD活性明顯下降,MDA含量顯著升高,模型組與假手術(shù)組比較差異顯著(P<0.01)。與模型組比較,TanⅡA注射乳劑7.8、3.9mg/kg的腦組織SOD活性顯著上升(P<0.05,P<0.01),MDA 含量極顯著下降(P<0.01)。

      4 討論

      自由基損傷也是防治腦缺血再灌注損傷的機(jī)理之一。MDA是自由基與生物膜不飽和脂肪酸發(fā)生脂質(zhì)過氧化的產(chǎn)物,它的含量反映氧自由基的水平及脂質(zhì)過氧化的程度。此外,MDA可與核酸及蛋白質(zhì)發(fā)生交聯(lián),使之受損。因此,MDA不僅是細(xì)胞損傷的代謝產(chǎn)物,而且也是導(dǎo)致細(xì)胞損傷的機(jī)制之一。SOD酶可以催化超氧自由基發(fā)生岐化反應(yīng),能夠清除氧自由基,保護(hù)生物膜免受自由基的攻擊損害。

      本次試驗(yàn)結(jié)果可見,TanⅡA注射乳劑對(duì)腦缺血及腦缺血再灌注損傷具有明顯的保護(hù)作用,該作用的產(chǎn)生可能與其抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng)有關(guān)。

      [1]宋寧寧,魏欣冰,劉睿,等.丹皮酚對(duì)原代培養(yǎng)的大鼠皮質(zhì)和海馬神經(jīng)元缺糖缺氧再灌注損傷的保護(hù)作用 [J].中國(guó)藥學(xué)雜志,2007,42(5):353-357.

      [2]王改合,王婭菲.血小板四項(xiàng)參數(shù)檢測(cè)在腦缺血性疾病中的變化分析[J].中國(guó)臨床研究,2013,26(5):500.

      [3]穆雪俠.ABCD評(píng)分和ABCD2評(píng)分在短暫性腦缺血發(fā)作中應(yīng)用比較[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥,2009,4(15):10-11.

      [4]胡小勤.血瘀證與血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷研究進(jìn)展[J].中華中醫(yī)藥雜志,2012,27(1):153-155.

      [5]李陽.參麥注射液上市后的安全性評(píng)價(jià)及在荷瘤小鼠的過敏試驗(yàn)研究[D].廣州中醫(yī)藥大學(xué),2012.

      [6]張愛珍,崔巧珍.耐甲氧西林金黃色葡萄球菌染色體mec盒基因分型及耐藥性分析[J].中國(guó)藥物與臨床,2013,13(2):155-158.

      [7]K Heer.News in emergency medicine 2007[J].Praxis,2008,97(9):501-505.

      [8]Chen RL,Balami JS,Esiri MM.Ischemic stroke in the elderly:an overview of evidence[J].Nat Rev Neurol,2010,6(5):256.

      [9]董永書,田中華.邱保國(guó)“血瘀同源論”治療心腦缺血性疾病理論淺析[J].中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志,2013,11(10)1260-1262.

      [10]Tim M,Buckenham.Where has carotid stenting gone?[J].The New Zealand medical journal,2009,122(1304):9-12.

      Protective effects of TanⅡA emulsion against cerebral ischemia in mice

      Zhao Min
      (Shangqiu City First People's Hospital,Henan,476000)

      ObJective To investigate TanⅡ A brain inJury,cerebral ischemia or cerebral ischemia-reperfusion in mice induced protection.Methods decapitated mice model of stroke model in mice,mice with cerebral ischemia-reperfusion model was TanⅡA inJectable emulsion survival time of mice after decapitation,breathing frequency,neural behaviors mice after stroke,the small cerebral ischemia brain SOD activity,MDA content after reperfusion.Results TanⅡA inJectable emulsion can prolong the survival time of mice after decapitation,and increase the number of breath after decapitation,improve neurobehavioral stroke in mice,increased SOD activity,decreased MDA content.Conclusion TanⅡA emulsion inJection of mice with cerebral ischemia and cerebral ischemia-reperfusion inJury in rats.

      TanⅡA;cerebral ischemia;cerebral ischemia-reperfusion

      R285

      B

      作者單位:476000河南省商丘市第一人民醫(yī)院藥劑科

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