枇杷化學(xué)成分研究概況

蘇加樂，潘為高，羅 彭

(廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西 南寧 530001)

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枇杷化學(xué)成分研究概況

蘇加樂，潘為高，羅 彭*

(廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西 南寧 530001)

枇杷葉、花、核均可入藥。目前眾多學(xué)者分別對枇杷各植株部位化學(xué)成分進行了研究，枇杷葉、花、核均含有皂苷類、三萜酸類、揮發(fā)油類及黃酮類等多種化學(xué)成分。對枇杷葉、花、核的化學(xué)成分研究情況、枇杷葉化學(xué)成分影響因素及提取工藝等研究情況進行綜述，以供研究者學(xué)習(xí)及查閱。

枇杷；化學(xué)成分；研究綜述

枇杷在醫(yī)療保健方面具有廣泛的應(yīng)用價值，因此已有植物化學(xué)工作者對枇杷的主要功能成分進行了相關(guān)研究。枇杷葉、花、果實、種子中含有的多種重要化學(xué)成分，決定了枇杷的藥用價值。目前，主要分離出皂苷類化合物、三萜類化合物和黃酮類等成分。

1 枇杷化學(xué)成分

1.1 枇杷葉化學(xué)成分

目前，已從枇杷葉中分離出皂苷類、三萜酸類、揮發(fā)油類、黃酮類等成分。

1.1.1 皂苷類化合物 洪燕萍等[1]采用香草醛-高氯酸法直接測定枇杷葉皂苷含量，實驗結(jié)果表明：香草醛-高氯酸法直接測定枇杷葉中皂苷含量適于樣品中糖雜質(zhì)含量較低的樣品，而系數(shù)倍率法適于測定樣品中糖雜質(zhì)含量較高的樣品。

1.1.2 三萜類化合物 呂寒等[2]采用硅膠柱、ODS柱、制備薄層、制備液相等方法分離枇杷葉中化學(xué)成分，運用化學(xué)及有機波譜分析方法鑒定化合物結(jié)構(gòu)。從枇杷葉中分離得到 9種三萜類化合物，通過鑒定分別確定為白樺脂酸甲酯、齊墩果酸、烏蘇酸、2α-羥基齊墩果酸甲酯、科羅索酸甲酯、2α-羥基齊墩果酸、科羅索酸、委陵菜酸、薔薇酸等?；衔锇讟逯峒柞?、齊墩果酸均為首次從該植物及其屬植物中分離得到。

鞠建華等[3]進行中藥枇杷葉的化學(xué)和藥效學(xué)研究，利用溶劑提取、萃取、柱色譜和化學(xué)衍生化等方法進行分離純化，根據(jù)化合物的光譜數(shù)據(jù)(IR，MS，1H-NMR，13C-NMR)和理化性質(zhì)進行結(jié)構(gòu)鑒定。該研究從正丁醇萃取物中分離并鑒定得到6種三萜酸類化合物，即齊墩果酸(oleanolic acid)、2α-羥基齊墩果酸(maslinic acid)、烏蘇酸(ursolic acid)、2α-羥基烏蘇酸(2α-hydrox yursolic acid)、坡模酸(pomo licacid)和薔薇酸(euscaphic acid)，首次從該植物中分離得到坡模酸。

李邇娜等[4]采用多種色譜技術(shù)對枇杷葉化學(xué)成分進行分離，并根據(jù)化合物的理化性質(zhì)和光譜數(shù)據(jù)鑒定結(jié)構(gòu)，從枇杷葉中分離得到齊墩果酸(oleanolic acid)、熊果酸(ursolic acid)、2α羥基熊果酸(2α-hydroxyursolic acid)、2α-羥基齊墩果酸(maslinicacid)等14種化合物。

鞠建華等[5]采用高效液相色譜法測定中藥枇杷葉中熊果酸的含量，并建立了中藥枇杷葉中抗炎鎮(zhèn)咳有效成分熊果酸的含量測定方法。

韓小龍等[6]運用薄層掃描法測定枇杷葉中熊果酸，試驗結(jié)果表明，枇杷葉中熊果酸含量較高。

1.1.3 黃酮類化合物 陳劍等[7]取干燥枇杷葉，粉碎，用75%工業(yè)乙醇回流提取，減壓濃縮得浸膏。浸膏用適量體積蒸餾水混懸，依次采用石油醚、醋酸乙酯及正丁醇萃取，得到極性不同的3個部分。各部分反復(fù)用硅膠柱層析、RP-18反相硅膠柱層析、Sephaex LH-20柱層析處理，得到10種化合物，其中3種經(jīng)結(jié)構(gòu)鑒定為黃酮類成分(山柰酚、金絲桃苷、枇杷甲素)，枇杷甲素(5-羥基-4’-甲氧基-O-7-β-O-D-吡喃葡萄糖基-(6→1)-α-L-吡喃鼠李黃酮苷)為首次在枇杷葉中發(fā)現(xiàn)。

呂寒等[8]用高效液相色譜與多級質(zhì)譜聯(lián)用法(HPLC-MSN)從枇杷葉中檢測并鑒定出3種黃酮類物質(zhì)，其中 1 種為黃酮苷類成分。該研究表明，HPLC-MSN法可迅速鑒定黃酮類化合物。

1.1.4 揮發(fā)油成分 臺琪瑞等[9]采用同時蒸餾萃取法從枇杷葉中提取揮發(fā)油，對分離物質(zhì)采用氣相色譜—質(zhì)譜(GC-MS)鑒定，采用歸一法確定其相對百分含量，共鑒定出77種成分，占總離子流圖峰面積的73.15%，其中主要成分為： A-紅沒藥醇(1.93%)、十六酸 (13.79%)、 (E)-橙花叔醇(10.95%)、亞麻醇( 5.45% )、(+)-香芹酮(2.56%)、欖香素(2.4%)、2-己酰呋喃(2.23%)、二氫獼猴桃內(nèi)酯(2.37%)、金合歡醇(1.82%)、醋酸法呢基酯(3.09%)。

王義潮等[10]用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，運用 GC-MS技術(shù)，結(jié)合計算機檢索對其化學(xué)成分進行了分析和鑒定，采用峰面積歸一化法計算各組分的相對含量。其中已鑒定組分共 47種，占流出組分總量的86.33%，含量較高的組分包括：β-倍半水芹烯(4.14%)、環(huán)己酮(5.25%)順-3 -己烯-1-醇(5.30%)、異桉葉油(5.0 7%)、香葉烯 D(5.35%)、10，10 -二甲基-2，6二(亞甲基)-雙環(huán)[7.2.0]十一烷 (7.95%)、水楊酸甲酯(11.72%)等。

1.2 去毛枇杷葉及其絨毛化學(xué)成分分析

俞長芳等[11]研究去毛枇杷葉及其絨毛，結(jié)果表明去毛枇杷葉及其絨毛所含化學(xué)成分基本相同，且絨毛中不含其他致咳或產(chǎn)生副作用的特異化學(xué)成分，但葉中所含皂苷明顯高于絨毛中含量。

1.3 枇杷花化學(xué)成分

1.3.1 揮發(fā)性成分 宋艷麗等[12]采用頂空固相微萃取法技術(shù)抽取枇杷花揮發(fā)油，使用氣相色譜/質(zhì)譜法結(jié)合保留指數(shù)法對其化學(xué)成分進行分析鑒定，使用面積歸一化法確定相對質(zhì)量百分含量，分別從枇杷花的花蕾和花中鑒定出10種和13種化合物，各占總峰面積的98.63%和97.18%，結(jié)果表明枇杷花花蕾和花的主要成分相同，均為苯甲醛，為枇杷花的賦香成分。

張麗華等[13]利用固相微萃取技術(shù)富集枇杷花的香氣成分，并結(jié)合GC-MS法對香氣成分進行分離和鑒定；采用氣相色譜-質(zhì)譜共分離出64個色譜峰，其中確定化合物49種，峰面積占總揮發(fā)性成分峰面積的93.34%，相對含量最高成分為苯乙醇(8.84%)，其次為苯甲醛(7.00%)、大茴香醛(6.84%)、乙酸(5.41%)、4-甲氧基苯甲酸甲酯(4.36%)、辛酸(4.21%)等成分。

1.3.2 總黃酮、三萜皂苷成分 成麗等[14]通過化學(xué)方法從枇杷花中提取分離得到4種三萜皂甙元類成分，并通過波譜分析手段(IR，MS，1HNM R，13CNMR)確定化學(xué)結(jié)構(gòu)分別為：齊墩果酸(oleanolic acid)、熊果酸(ursolic acid)、2α，3α，19α-三羥基熊果-5，12-二烯-28-酸、2β，3β，23α-三羥基齊墩果-12-烯-28-酸。

李琪等[15]采用紫外分光光度法及高效液相色譜法對枇杷花中總黃酮、齊墩果酸、熊果酸含量進行測定，研究不同產(chǎn)地、不同年份枇杷花總黃酮和三萜化合物的含量差異，以確定其含量較高的產(chǎn)地及年際變化情況。結(jié)果表明：同一產(chǎn)地不同年份樣品中總黃酮和三萜化合物含量變化較??；根據(jù)地理、氣候因子相關(guān)性分析，表明齊墩果酸與緯度、經(jīng)度等具有一定相關(guān)性，而其他成分的相關(guān)性不大。

1.4 枇杷核化學(xué)成分

翁愛彬等[16]采用膠束電動毛細(xì)管色譜法測定枇杷核中苦杏仁苷、綠原酸、阿魏酸、山奈酚、槲皮素和熊果酸等6種有效成分的含量，研究表明：枇杷核中6種物質(zhì)可完全分離，采用大體積樣品堆積的富集方法，富集電壓為-20kV，富集時間為3min，綠原酸、阿魏酸、山奈酚、槲皮素和熊果酸等具有較好的富集效果。

林國榮等[17]通過提取枇杷核淀粉，對枇杷核淀粉的顆粒形貌、晶體結(jié)構(gòu)、直鏈淀粉含量、糊化溫度、溶解度和膨脹度等特性進行評價；研究表明：枇杷核淀粉顆粒大小為5.2～13.9μm，平均粒徑為9.3μm，具有典型的偏光十字。

2 枇杷葉化學(xué)成分提取方法研究

主要包括枇杷葉中三萜類、總黃酮及多糖等成分的提取。

2.1 超聲-微波協(xié)同萃取枇杷葉多糖工藝研究

王志高等[18]經(jīng)單因素和正交組合實驗，研究超聲-微波協(xié)同作用提取多糖最佳工藝，當(dāng)料水比為1∶15、提取溫度為85℃、提取時間90min時，提取效果較好。超聲-微波協(xié)同萃取法相較于微波提取法、水提醇沉法，具有提取率高、提取時間短等特點，是一種枇杷葉多糖提取優(yōu)選的新型方法。

2.2 超聲波提取枇杷葉總黃酮及鑒別

黃鎖義等[19]采用超聲波乙醇浸提法從枇杷葉中提取黃酮類物質(zhì)，并對提取的黃酮類物質(zhì)進行驗證，采用紫外分光光度法測定含量；測得樣品中總黃酮的含量C=0.909 0mg/mL，回收率為 100.9%，純度和產(chǎn)率均較高。研究表明，該方法為枇杷葉黃酮類物質(zhì)的有效提取工藝。

2.3 超聲波與回流技術(shù)對枇杷葉中烏索酸提取效果

李開泉等[20]研究超聲波和回流提取方法對烏索酸的提取效果：采用相同原料、相同介質(zhì)，分別采用超聲波和回流兩種方式進行提取，經(jīng)濾過、定容、離心和微孔濾膜過濾后測定，用外標(biāo)法計算質(zhì)量分?jǐn)?shù)；研究結(jié)果表明，超聲波提取效率為熱回流法的2.63 倍。

2.4 枇杷葉齊墩果酸超聲波輔助提取效果

李開泉[21]利用超聲波輔助提取枇杷葉有效成分齊墩果酸，并用HPLC法測定提取液中齊墩果酸的含量。結(jié)果表明，超聲波可作為枇杷葉齊墩果酸提取的有效輔助手段，而傳統(tǒng)乙醇回流提取效果不理想，提取率僅為50%，且提取次數(shù)多，提取效率亦無明顯提高，加酸水解也不能提高收率。

2.5 枇杷葉中熊果酸的提取、分離工藝研究

李躍中等[22]采用正交試驗法篩選其有效成分熊果酸的最佳提取及精制工藝條件，使用90%乙醇進行超聲提取2次，每次提取20min，將提取物采用石油醚除雜3次，可除去脂溶性雜質(zhì)，每次加入量為沉淀的 15～20倍。采用活性炭脫色，活性炭用量為3g/100mL，70℃下脫色30min；脫色后采用薄層分離，展開劑為氯仿∶丙酮(V/V)= 4∶1，收集得到熊果酸樣品，經(jīng)HPLC 測定純度達(dá)到95.8%。

2.6 正交試驗法優(yōu)選枇杷葉中科羅索酸提取工藝

陳龍勝等[23]以科羅索酸提取率為指標(biāo)，通過正交試驗考察枇杷葉中4種三萜酸成分提取效果的影響因素，研究最佳提取工藝條件為：80%乙醇，溫度80℃，回流提取2次，提取3h，科羅索酸得率為0.984%。

3 枇杷活性成分影響因素研究

3.1 不同干燥方法對枇杷葉化學(xué)成分的影響

在實際加工中，枇杷葉需進行干燥處理，有學(xué)者針對不同干燥方法對枇杷葉中功能性成分的影響因素進行研究?？v偉等[24]分別采用冷凍干燥、真空干燥、熱風(fēng)干燥和自然干燥等方法對枇杷樣品進行干燥處理，測定枇杷葉中總黃酮含量(采用比色法)及枇杷葉中熊果酸含量(采用RP-HPLC法)，分析經(jīng)不同干燥方法處理樣品的羥基清除作用。結(jié)果表明：冷凍干燥和真空干燥對枇杷葉中總黃酮含量影響較小，且不會破壞其抗氧化作用，4種干燥方法對枇杷葉中熊果酸的影響不顯著。

3.2 不同采收季節(jié)枇杷葉藥材化學(xué)成分的變化規(guī)律

韓秀奇等[25]采用高效液相法測定不同采收季節(jié)枇杷葉中槲皮素和山柰酚的含量，研究發(fā)現(xiàn)枇杷葉中槲皮素與山柰酚的含量隨季節(jié)變化而有所不同。槲皮素含量的變化趨勢大致與總黃酮含量相同，其中以4月份采收樣品最高；山柰酚的含量總體波動較小，其中5月份含量最高，3月份含量最低。不同季節(jié)采收的枇杷葉中總黃酮類成分及槲皮素、山柰酚的含量變化有一定規(guī)律。

3.3 不同產(chǎn)地枇杷葉中化學(xué)成分含量比較

呂寒等[26]采用高效液相色譜法，測定不同產(chǎn)地枇杷葉中齊墩果酸、熊果酸、科羅索酸、山楂酸等成分含量。不同產(chǎn)地的枇杷葉山楂含量變化為0.244%～0.571%，齊墩果酸含量為0.146%～0.192%，科羅索酸含量為0.352%～0.808%，熊果酸含量為0.548%～0.834%。研究指出，不同產(chǎn)地枇杷葉中各種三萜酸類成分的含量有顯著差異。

3.4 不同提取方法對枇杷化學(xué)成分的影響

賢景春[27]采用超聲提取法對枇杷核中黃酮類物質(zhì)進行提取，通過正交試驗對總黃酮的超聲提取工藝進行全面優(yōu)化，研究乙醇的濃度、提取的時間、溫度等因素對提取率的影響，確定了超聲提取最佳工藝條件。

3.5 炮制方法對枇杷化學(xué)成分的影響

魯湘鄂等[28]通過水蒸汽蒸餾法分別從枇杷葉生品和炮制品中提取揮發(fā)油，并用歸一化法測定各組分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，采用GC法對其化學(xué)成分進行鑒定。結(jié)果顯示：炮制前后揮發(fā)油成分的含量變化較大。該研究為枇杷葉飲片的質(zhì)量評價及炮制品的規(guī)范化提供了依據(jù)。

4 展望

枇杷在食品、中醫(yī)藥開發(fā)、植物有效成分研究和種植業(yè)等方面具有較好的經(jīng)濟效益。枇杷的臨床應(yīng)用價值較大，隨著對枇杷化學(xué)成分研究的不斷深入，使用將會更科學(xué)、更廣泛。

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(責(zé)任編輯：李嵐春)

2014-11-24

廣西壯族自治區(qū)教育廳科研項目(2013YB125)；廣西高等學(xué)校高水平創(chuàng)新團隊及卓越學(xué)者計劃資助項目(桂教人[2014]7號)；廣西高校重點實驗室(桂教科研[2014]6號)

蘇加樂(1987-)，男，廣西中醫(yī)藥大學(xué)碩士研究生，研究方向為中草藥；潘為高(1977-)，男，瑤族，廣西中醫(yī)藥大學(xué)教授，碩士生導(dǎo)師，研究方向為中草藥。

羅彭(1982-)，女，廣西中醫(yī)藥大學(xué)講師，研究方向為民族藥學(xué)。E-mail：luopeng3399@sina.com

R284

A

1673-2197(2015)04-0048-03

10.11954/ytctyy.201504022