輕度認(rèn)知障礙和阿爾茨海默病血、尿β2-MG及尿mALB水平觀察

謝冰許順江王學(xué)義張睿王嵐崔冬生

·短著述·

輕度認(rèn)知障礙和阿爾茨海默病血、尿β2-MG及尿mALB水平觀察

謝冰*許順江*王學(xué)義△※張睿*王嵐※崔冬生*

β2微球蛋白 微量白蛋白 輕度認(rèn)知障礙阿爾茨海默病 腎功能

輕度認(rèn)知障礙（mild cognitive impairment，MCI）是介于正常衰老和癡呆之間的一種中間狀態(tài)，是一種認(rèn)知障礙癥候群。與年齡和教育程度匹配的正常老人相比，患者存在輕度認(rèn)知功能減退，但日常能力沒(méi)有受到明顯影響。隨著社會(huì)的老齡化，MCI已成為近年來(lái)研究阿爾茨海默?。ˋlzheimer’s disease，AD）的熱點(diǎn)問(wèn)題[1]。文獻(xiàn)報(bào)道慢性腎臟病患者存在認(rèn)知功能損害[2-4]。然而，認(rèn)知功能障礙患者是否存在早期腎功能改變，目前尚未見(jiàn)報(bào)道。目前通常采用血肌酐（creatinine，Cr）、尿素氮（blood urea ni?trogen，BUN）、尿蛋白等指標(biāo)對(duì)患者的腎功能進(jìn)行評(píng)估，但這些指標(biāo)的改變往往提示腎臟病變已進(jìn)展到一定程度。因此，本研究選擇血清和尿液β2-微球蛋白（β2-microglobu?lin，β2-MG）以及尿液微量白蛋白（microalbumin，mALB）等更為敏感的指標(biāo)來(lái)觀察MCI和AD患者是否存在早期腎功能改變，并探討這些指標(biāo)與認(rèn)知功能的相關(guān)性。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象MCI組來(lái)自2010年12月至2012年12月河北省老年期癡呆發(fā)病因素調(diào)查中確診的MCI患者。納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡＞60歲；②符合國(guó)際MCI工作組標(biāo)準(zhǔn)（有認(rèn)知功能減退的主訴或有知情人提供臨床顯著的認(rèn)知功能減退；有記憶減退的客觀檢查證據(jù)；日常生活能力良好，日常生活能力量表＜26分；無(wú)癡呆）[5]；③根據(jù)既往史，3個(gè)月內(nèi)未采取臨床治療措施；④聽(tīng)力及視力無(wú)明顯障礙，能夠順利完成問(wèn)卷調(diào)查。排除帕金森病、糖尿病、高血壓、腫瘤、腎臟疾病、免疫系統(tǒng)疾病、血液系統(tǒng)疾病及腦外傷等患者。最終MCI組共計(jì)67例，其中男性32例，女性35例，年齡61～88歲，平均（67.45±5.02）歲。

AD組來(lái)自2011年1月至2012年12月在河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院住院的AD患者。納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡＞60歲；②符合《美國(guó)精神障礙診斷與統(tǒng)計(jì)手冊(cè)第四版》（Diagnostic and Sta?tistical Manual of Mental Disorders,Fourth Edition，DSM-Ⅳ）中AD的診斷標(biāo)準(zhǔn)；③根據(jù)既往史，3個(gè)月內(nèi)未采取臨床治療措施；④聽(tīng)力及視力無(wú)明顯障礙，能夠順利完成問(wèn)卷調(diào)查。排除標(biāo)準(zhǔn)同MCI組。最終AD組共計(jì)53例患者，其中男性26例，女性27例，年齡62～84歲，平均（68.98±5.69）歲。

對(duì)照者來(lái)自于2010年12月至2012年12月河北省老年期癡呆發(fā)病相關(guān)危險(xiǎn)因素調(diào)查。納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡＞60歲；②認(rèn)知功能正常，通過(guò)量表初篩和臨床評(píng)估不符合上述MCI和AD的入組標(biāo)準(zhǔn)；③根據(jù)既往史，3個(gè)月內(nèi)未采取臨床治療措施；④聽(tīng)力及視力無(wú)明顯障礙，能夠順利完成問(wèn)卷調(diào)查。排除標(biāo)準(zhǔn)同MCI組。對(duì)照組共計(jì)82名，其中男性46名，女性36名，年齡60～87歲，平均（70.15±5.38）歲。

以上三組研究對(duì)象年齡（F=0.397,P=0.543）、性別（χ2= 1.196，P=0.550）及教育程度（χ2=4.452,P=0.189）差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。所有研究對(duì)象均簽署知情同意書。

1.2 研究方法

1.2.1 認(rèn)知功能評(píng)估 由神經(jīng)科醫(yī)生采用簡(jiǎn)易智能狀態(tài)檢查量表（mini-mental state examination，MMSE）和蒙特利爾認(rèn)知評(píng)估量表（Montreal cognitive assessment，MoCA）對(duì)所有受試者進(jìn)行認(rèn)知功能評(píng)價(jià)。滿足以下兩個(gè)條件者定義為認(rèn)知功能障礙：MMSE評(píng)分文盲8～20分，小學(xué)文化程度21～23分，中學(xué)及以上24～27分；同時(shí)MoCA得分＜26分[6]。

1.2.2 標(biāo)本采集與處理 血液標(biāo)本采集：所有受試者于清晨8時(shí)空腹采集靜脈血3 mL于促凝管中，4℃離心15 min（轉(zhuǎn)速3000 r/min）后分裝血清，-86℃冰箱保存待檢。尿液標(biāo)本采集：所有受試者將膀胱尿排盡后飲水300～500 mL，收集飲水后1 h內(nèi)全部尿液，充分混勻并準(zhǔn)確稱量尿量，離心15 min（轉(zhuǎn)速3000 r/min）后取上清分裝，-86℃冰箱保存待檢。

1.2.3 β2-MG、mALB和BUN、Cr實(shí)驗(yàn)室檢測(cè) β2-MG和mALB采用放射免疫定量分析方法測(cè)定[7]，檢測(cè)試劑盒購(gòu)于北京北方生物技術(shù)研究所（試劑批號(hào)：20130820），采用北京核海高科技術(shù)開發(fā)公司γ免疫分析儀進(jìn)行檢測(cè)（型號(hào)：HH6003）。BUN和Cr的檢測(cè)采用脲素酶速率、苦味酸速率法（試劑購(gòu)于貝克曼公司，批號(hào)：Z310221，Z304216），由Beckman Dxc 800全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)過(guò)程嚴(yán)格遵守說(shuō)明書。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法用SPSS 17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。各組間認(rèn)知功能比較和β2-MG、mALB水平的比較采用方差分析，LSD法進(jìn)行兩兩比較。采用Pearson相關(guān)分別分析β2-MG、mALB水平與認(rèn)知功能的相關(guān)性。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α為0.05，雙側(cè)檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 各組認(rèn)知功能檢查結(jié)果MCI組、AD組和對(duì)照組之間MMSE分值（F=5.177，P=0.007）和MoCA分值（F=86.986，P＜0.001）差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，經(jīng)兩兩比較，MCI組和AD組患者M(jìn)MSE和MoCA得分較對(duì)照組均降低（P＜0.05），見(jiàn)表1。

2.2 各組血清和尿液β2-MG及尿液mALB水平MCI組、AD組與對(duì)照組三者之間血清β2-MG（F=18.476，P＜0.001）、尿液β2-MG（F=17.273，P＜0.001）和尿液mALB（F=12.587，P＜0.001）水平的差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。AD組血清β2-MG水平較MCI組升高（P＜0.001），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。BUN和Cr在三組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表2。

2.3 血清和尿液β2-MG及尿液mALB水平與認(rèn)知功能的相關(guān)性 MCI組患者的MMSE和MoCA得分與血清β2-MG、尿液β2-MG和尿液mALB水平均未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)（均P＞0.05）。AD患者的MMSE（r=-0.272，P=0.034）和MoCA得分（r=-0.309，P=0.015）與血清β2-MG水平呈負(fù)相關(guān)；MMSE（r=-0.279，P=0.041）和MoCA得分（r=-0.355，P= 0.010）與尿液β2-MG水平呈負(fù)相關(guān)；AD患者的MMSE（r=-0.348，P=0.006）和MoCA得分（r=-0.618，P＜0.001）與尿液mALB水平呈負(fù)相關(guān)。見(jiàn)表3。

表1 MCI組、AD組和對(duì)照組MMSE和MoCA得分（±s）

表1 MCI組、AD組和對(duì)照組MMSE和MoCA得分（±s）

1）與對(duì)照組比較，經(jīng)LSD-t檢驗(yàn)，P＜0.05；2）與MCI組比較，經(jīng)LSD-t檢驗(yàn)，P＜0.05

M o C A 2 4 . 1 5 ± 2 . 3 81)1 7 . 3 1 ± 2 . 2 81)2)2 7 . 8 1 ± 2 . 8 9組別M C I組A D組對(duì)照組n 6 7 5 3 8 2 M M S E 2 7 . 0 2 ± 2 . 5 11)1 9 . 3 8 ± 2 . 1 11)2)2 8 . 6 8 ± 3 . 0 2

3 討論

β2-MG是由100個(gè)氨基酸殘基組成的單鏈多肽低分子蛋白?？捎赡I小球自由濾過(guò)，β2-MG約99.9%在近端腎小管重吸收并降解，不會(huì)重新進(jìn)入血液循環(huán)。因此，在正常人的血液和尿液中是極微量的。血清β2-MG的升高提示腎小球?yàn)V過(guò)功能受損或?yàn)V過(guò)負(fù)荷增加，是反映腎小球?yàn)V過(guò)功能比較靈敏的指標(biāo)，各種原發(fā)或繼發(fā)性腎小球病變累及腎小球?yàn)V過(guò)功能時(shí)均可使血β2-MG增高，與腎小球?yàn)V過(guò)率呈負(fù)相關(guān)。近端腎小管是β2-MG在體內(nèi)處理的唯一場(chǎng)所，近端腎小管輕度受損時(shí)，尿液β2-MG明顯增加，而且尿液β2-MG與腎小管重吸收率有關(guān)。尿液中β2-MG增高，則提示腎小管近端損害[8-9]。因此β2-MG可以作為早期腎損害的檢測(cè)指標(biāo)。尿液中mALB，在生理?xiàng)l件下含量很少。微量白蛋白尿反映腎臟出現(xiàn)異常蛋白質(zhì)滲漏[10]，一旦濾過(guò)屏障受損，mALB濾過(guò)量會(huì)增多，原尿中mALB含量超過(guò)腎小管重吸收的閾值，尿中便可檢測(cè)出mALB。尿mALB也是反映腎功能損害的敏感指標(biāo)之一。

表2 三組血清和尿液β2-MG水平以及尿液mALB水平（±s）

表2 三組血清和尿液β2-MG水平以及尿液mALB水平（±s）

1）與對(duì)照組比較，經(jīng)LSD-t檢驗(yàn)，P＜0.05；2）與MCI組比較，經(jīng)LSD-t檢驗(yàn)，P＜0.05

組別M C I組A D組對(duì)照組n 6 7 5 3 8 2血清β2-M G（m g / L）3 . 4 0 ± 1 . 0 11)4 . 2 2 ± 1 . 4 51)2)2 . 7 9 ± 0 . 8 2尿液β2-M G（m g / h）4 . 1 3 ± 1 . 5 71)4 . 9 9 ± 2 . 0 11)2 . 5 3 ± 0 . 8 7尿液m A L B（μ g / h）3 6 2 . 3 9 ± 1 1 5 . 6 11)3 8 1 . 3 0 ± 1 1 6 . 1 81)2 5 6 . 7 1 ± 9 5 . 6 9 B U N（m m o l / L）4 . 2 4 ± 0 . 8 0 4 . 5 6 ± 1 . 1 0 4 . 1 6 ± 1 . 1 0 C r（m m o l / L）6 7 . 4 7 ± 1 1 . 3 7 6 7 . 1 7 ± 1 4 . 9 4 6 4 . 7 0 ± 1 3 . 8 4

本研究表明，MCI患者和AD患者血清和尿液β2-MG以及尿液中mALB水平均較對(duì)照組升高；血清和尿液β2-MG以及尿液中mALB水平均與AD患者的認(rèn)知功能呈負(fù)相關(guān)。本文所有對(duì)象無(wú)帕金森病、糖尿病、高血壓、腎臟疾病及免疫系統(tǒng)疾病，且尿蛋白檢查陰性，血常規(guī)、肝功能正常，排除了可能引起血清和尿液β2-MG以及尿液中mALB水平改變的疾病，其檢查結(jié)果真實(shí)反映了MCI和AD患者腎功能情況。

研究結(jié)果說(shuō)明MCI和AD患者存在早期腎臟功能改變，而且AD組血β2-MG水平高于MCI組，提示血β2-MG水平可能與疾病相關(guān)，AD組與MCI組相比尿中β2-MG和mALB的水平雖然差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但有增高的趨勢(shì)。在既往研究中我們發(fā)現(xiàn)，同屬腦退行性疾病的帕金森病亦有腎功能的改變[11-12]，因此本研究并沒(méi)有將患有帕金森病患者納入。Sajjad等[13]研究發(fā)現(xiàn)尿白蛋白/肌酐比值增高者在認(rèn)知功能方面的下降速度是其他人的2～7倍。Seliger等[14]對(duì)477例老年慢性腎臟病患者進(jìn)行長(zhǎng)達(dá)6年的隨訪發(fā)現(xiàn)，中等程度的腎功能不全可使癡呆的患病風(fēng)險(xiǎn)增加37%。此外，近年來(lái)有報(bào)道顯示，β2-MG可以通過(guò)抑制腦組織中β淀粉樣蛋白的聚積，防止認(rèn)知損害的發(fā)生，β2-MG水平增高與認(rèn)知功能損害有關(guān)[15-16]。有研究發(fā)現(xiàn)早期AD患者存在腎功能的改變[17-18]。本研究也證實(shí)在MCI和AD患者中存在腎臟功能的早期改變。但究竟是腎臟疾病引起的認(rèn)知功能損害還是認(rèn)知功能損害引起的腎臟功能改變，目前尚不清楚。在未來(lái)如何繼續(xù)研究二者關(guān)系是一個(gè)值得探討的問(wèn)題。

綜上所述，MCI和AD患者血清和尿液β2-MG以及尿液mALB水平明顯升高，且血中BUN和Cr正常，提示MCI和AD患者存在早期腎功能損害。

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R749.16 (

2014-09-04）

A （責(zé)任編輯:肖雅妮）

10.3936/j.issn.1002-0152.2015.01.012

* 河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室（石家莊 050031）△河北省腦老化與認(rèn)知神經(jīng)科學(xué)實(shí)驗(yàn)室

※ 河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院精神衛(wèi)生科