丹參中幾種脂溶性成分的含量分析

冷英梅

丹參中幾種脂溶性成分的含量分析

冷英梅

目的建立丹參中3種脂溶性成分含量的高效液相測(cè)定方法。方法色譜柱：ODS-C18（4.6 mm×250 mm，5μm），流動(dòng)相：乙腈（A）-0.03%磷酸水溶液（B），0～60 min，10%A→68%A；60～70 min，68%A→80%A；70～80 min，80%A→100%A，流速：1.0 ml/min檢測(cè)波長(zhǎng)280 nm，柱溫：25℃，進(jìn)樣10μl。結(jié)果丹參酮I、二氫丹參酮I、丹參酮IIA具有良好線性關(guān)系，精密度、穩(wěn)定性、回收率等均符合藥典要求。結(jié)論高效液相法測(cè)定丹參中3種脂溶性成分具有準(zhǔn)確性高、精密程度好、有良好的線性關(guān)系，可考慮作為丹參脂溶性成分含量測(cè)定方法。

丹參；脂溶性成分；二氫丹參酮Ⅰ；丹參酮Ⅰ；丹參酮ⅡA

丹參（Salvia miltiorrhiza Bge），為唇形科植物鼠尾草屬的干燥根及根莖[1]，味苦，性微寒[2-3]，是較為常見(jiàn)的中藥材之一。丹參因其根赤肉紫，形狀似參，故得名[4]，主產(chǎn)于河南、四川等地[5]，具有養(yǎng)血安神、調(diào)經(jīng)止痛、活血祛瘀等功效[6]。其脂溶性成分丹參酮類(lèi)為主，如：異丹參酮I、異隱丹參酮II、丹參酮IIA等[7]。由于丹參中成分較多，為全面控制其質(zhì)量，常規(guī)檢測(cè)丹酚酸 B、丹參酮ⅡA存在一定不足，為能有效鑒定丹參有效成分含量，本文旨在建立丹參脂溶性成分的含量測(cè)定方法，以期為其質(zhì)量控制提供參考。

1 材料

島津LC-20A型高效液相色譜儀，配置有紫外檢測(cè)器；十萬(wàn)分位天平，乙腈由國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司提供，為色譜醇，水為超純水（自制），其他試劑均為分析純；二氫丹參酮Ⅰ，丹參酮Ⅰ，丹參酮ⅡA均由中國(guó)食品藥品檢定研究院提供；丹參藥材安徽亳州（批號(hào)20140125-20150413），粉碎過(guò)40目篩，待用。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：ODS-C18（4.6 mm×250 mm，5μm），流動(dòng)相：乙腈（A）-0.03% 磷酸水溶液（B），0～60 min，10%A→68%A；60～70 min，68%A→80%A；70～80 min，80%A→100%A，流速：1.0 ml/min檢測(cè)波長(zhǎng)280 nm，柱溫：25℃，進(jìn)樣10 μl。

2.2 供試品溶液的制備

丹參藥材打粉后，過(guò)四號(hào)篩，采用萬(wàn)分位天平精密稱定0.523 1 g藥材置250 ml具塞錐形瓶中，采用50 ml移液管精密移取甲醇溶液50 ml，記錄總計(jì)重量后，超聲20 min，放置室溫后，繼續(xù)稱重，用甲醇溶液補(bǔ)足損傷重量，搖勻后經(jīng)濾紙濾過(guò)，量取5 ml續(xù)濾液于50 ml棕色容量瓶中，加甲醇溶液至刻度，搖勻后密封，低溫保存?zhèn)溆?，使用前需放置室溫?/p>

2.3 對(duì)照溶液的制備

分別精密稱取各對(duì)照品適量，轉(zhuǎn)移至10 ml棕色容量瓶中，加甲醇定容，得到貯備液備用。后各取適量于25 ml容量瓶，甲醇加至刻度，制備混標(biāo)，低溫避光備用。

2.4 方法學(xué)考察

根據(jù)藥典方法進(jìn)行精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性、回收率考察，所得RSD分別是1.1%、0.9%、1.2%、1.3%，均符合標(biāo)準(zhǔn)，用移液管分別量取混標(biāo)溶液1 ml、2 ml、4 ml、6 ml、8 ml，保存于對(duì)應(yīng)的容量瓶?jī)?nèi)，通過(guò)甲醇均將其稀釋為10 ml，混勻，即得到各濃度梯度的溶液。采用“2.1項(xiàng)”色譜條件，分別取10 μl各溶液完成進(jìn)樣，然后制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，其中橫坐標(biāo)為各濃度梯度，縱坐標(biāo)為峰面積，曲線方程式為：二氫丹參酮Ⅰ：y=53 422x-12 358，r=0.999 3（1.12-9.23 μg/ml），丹參酮Ⅰ：y=52 424x-23 358，r=0.999 5（3.13-10.23 μg/ml），丹參酮ⅡA：y=4 356x-7 576，r=0.999 2（1.12-9.53 μg/ml）。

2.5 樣品脂溶性成分測(cè)定

參照以上樣品制作方法和相關(guān)檢測(cè)條件，對(duì)各批次樣品中3種脂溶性成分的含量進(jìn)行測(cè)定。

3 結(jié)果

結(jié)果顯示，批號(hào)：141209、141218、150112脂溶性成分含量，分別是二氫丹參酮Ⅰ（0.732 mg/g、0.621 mg/g、0.583 0 mg/g）、丹參酮Ⅰ（1.234 mg/g、1.352 mg/g、1.631 mg/g）、丹參酮ⅡA（1.492 mg/g、1.576 mg/g、1.832 mg/g）。

4 討論

本組實(shí)驗(yàn)采用梯度洗脫方式，成功建立了丹參中3種脂溶性成分的含量測(cè)定方法，所測(cè)樣品含量與文獻(xiàn)[8]結(jié)果基本一致，本法準(zhǔn)確性高、精密程度好、有良好的線性關(guān)系，可考慮作為丹參脂溶性成分含量測(cè)定方法。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì). 中華人民共和國(guó)藥典[M]. 北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2010：70.

[2]馬丙祥，董寵凱. 丹參的藥理作用研究新進(jìn)展[J]. 中國(guó)藥房，2014，25（7）：663-665.

[3]李衛(wèi)祥. 丹參的藥理作用與臨床應(yīng)用[J]. 北方藥學(xué)，2013，（3）：34-35.

[4]曹金儀. 丹參的化學(xué)成分及臨床用途[J]. 中國(guó)醫(yī)藥指南，2012，10（29）：53-55.

[5]王煒辰，吳學(xué)輝，鄭芳. 丹參藥理學(xué)研究進(jìn)展[J]. 海峽藥學(xué)，2013，25（10）：24-25.

[6]劉靜，戴忠，王鋼力，等. 丹參活性成分及相關(guān)分離分析方法研究進(jìn)展[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2012，18（11）：288-295.

[7]王洋，陳濤，潘霖，等. 液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)在丹參成分分析中的應(yīng)用[J]. 中草藥，2014，45（23）：3494-3502.

[8]程沛，韓東岐，胡偉慧，等. 高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定丹參中10種水溶性和4種脂溶性成分的含量[J]. 藥物分析雜志，2015，35（6）：991-996.

Determination of Several Fat-soluble Components of Salvia

LENG Yingmei, Market Supervision Administration of Haiyang city, Haiyang 265100, China

ObjectiveTo establish salvia HPLC determination of three kinds of fat-soluble component content.MethodsColumn: ODS-C18 (4.6 mm ×250 mm, 5μm), mobile phase: acetonitrile (A) -0 03% aqueous solution of (B) phosphoric acid, 0～60 min, 10% A → 68% A, 60～70 min, 68% A → 80% A, 70～80 min, 80% A→100% A, fow rate: 1.0 ml/ min and the detection wavelength 280 nm, column temperature: 25℃, injection 10 μl.ResultsTanshinone I, dihydrotanshinone I, tanshinone IIA respectively range with good linearity, precision, stability and recovery etc. in line with pharmacopoeia requirements.ConclusionThe HPLC method for the determination of three kinds of fat-soluble components of salvia with high accuracy, good degree of precision, a good linear relationship can be considered as a method for the determination of fat-soluble components of Salvia.

Salvia, Fat-soluble ingredients, Dihydrotanshinone I, Tanshinone I, Tanshinone IIA

S567.53

A

1674-9308（2015）32-0180-02

10.3969/j.issn.1674-9308.2015.32.133

265100 海陽(yáng)市市場(chǎng)監(jiān)督管理局