不同方法檢測(cè)尿液標(biāo)本中紅細(xì)胞結(jié)果比較分析
趙文祥
【摘要】目的 探討3種常用尿檢方法檢測(cè)尿標(biāo)本中紅細(xì)胞的作用和價(jià)值。方法 收集5 000例患者分別進(jìn)行顯微鏡檢測(cè)、干化學(xué)分析儀及UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析儀。結(jié)果 UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析儀的檢測(cè)結(jié)果與干化學(xué)分析儀的檢測(cè)結(jié)果相比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P < 0.05)。結(jié)論 3種方法對(duì)尿中紅細(xì)胞的檢測(cè)結(jié)果存在差異,干化學(xué)法和流式細(xì)胞分析法易出現(xiàn)假陰性和假陽(yáng)性,建議3種方法聯(lián)合應(yīng)用,以提高尿中紅細(xì)胞的陽(yáng)性檢出率。
【關(guān)鍵詞】紅細(xì)胞;顯微鏡檢查;流式細(xì)胞術(shù)
作者單位:138001松原市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科
尿液有形成分檢測(cè)是臨床上最常見(jiàn)的實(shí)驗(yàn)室檢查項(xiàng)目之一。尿液中紅細(xì)胞的準(zhǔn)確檢測(cè),是診斷消化系統(tǒng)疾病、泌尿生殖系統(tǒng)疾病及腎臟疾病的主要方法,也是臨床鑒別診斷的重要依據(jù)。目前臨床上對(duì)尿液常規(guī)分析主要采取流式細(xì)胞分析術(shù)、尿沉渣顯微鏡檢查及干化學(xué)分析法。由于每種檢測(cè)方法不同的檢驗(yàn)原理,檢驗(yàn)結(jié)果存在一定的差異。本研究對(duì)5 000份尿液標(biāo)本進(jìn)行尿液干化學(xué)、流式細(xì)胞術(shù)及顯微鏡聯(lián)合檢測(cè),并對(duì)其檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析比較,評(píng)價(jià)各種方法的優(yōu)劣。
1.1一般資料
收集本院2015年1~3月住院及門(mén)診5 000例患者的晨尿中段標(biāo)本,接收標(biāo)本時(shí)嚴(yán)格核對(duì)患者姓名、年齡、性別、檢驗(yàn)單與標(biāo)本容器標(biāo)號(hào)是否一致,防止人為差錯(cuò)。5 000例患者中男2 970例,女2 030例;年齡10~81歲。所有標(biāo)本均要求在2 h內(nèi)完成3種檢測(cè)方法,避免時(shí)間過(guò)長(zhǎng)引起細(xì)菌繁殖、細(xì)胞溶解等因素對(duì)檢測(cè)結(jié)果造成影響 。
1.2儀器與試劑
干化學(xué)分析使用山西亞森FA-100及其配套試紙條;尿液流式細(xì)胞分析儀為日本Sysme的UF-1000i,試劑為配套試劑;顯微鏡使用日本奧林巴斯雙目顯微鏡。
1.3方法
1.3.1檢測(cè)方法 (1)尿干化學(xué)分析儀。每天開(kāi)機(jī)后先進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控,合格后取試紙條浸入盛有患者尿液標(biāo)本的一次性尿管中數(shù)秒,取出放置于儀器試紙槽,然后按儀器操作步驟進(jìn)行檢測(cè),并記錄檢測(cè)結(jié)果。(2) UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析儀每天開(kāi)機(jī)質(zhì)控后,按照儀器操作步驟,開(kāi)始對(duì)尿液標(biāo)本上機(jī)檢測(cè),保存數(shù)據(jù)。(3) 尿沉渣顯微鏡檢查。取尿液標(biāo)本10 ml于刻度離心管中以1 500 r/min離心 6 min,抽出上清液,留取沉淀物0.2 ml鏡檢,先以低倍鏡(100×)觀察,再以高倍鏡(400×)觀察,分別以10個(gè)高倍視野下的紅細(xì)胞取平均值,并記錄數(shù)據(jù)。
1.3.2判定標(biāo)準(zhǔn)以沉渣鏡檢結(jié)果為尿液中紅細(xì)胞數(shù)量的“金標(biāo)準(zhǔn)”:以每個(gè)高倍鏡下紅細(xì)胞超過(guò)3個(gè)為陽(yáng)性,對(duì)UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析儀和干化學(xué)分析法的檢測(cè)結(jié)果作評(píng)價(jià)。UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析儀的紅細(xì)胞正常參考范圍為0~25個(gè)/μl,干化學(xué)分析法以試紙條出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)為陽(yáng)性結(jié)果。
1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
應(yīng)用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計(jì)數(shù)資料以率表示,采用χ2檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.13種方法檢測(cè)尿液標(biāo)本中紅細(xì)胞結(jié)果比較
尿干化學(xué)法假陽(yáng)性350例(7%),假陰性 150例(3%);UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析假陽(yáng)性20例(0.4%);假陰性200例(4%)。
2.2干化學(xué)分析法和UF-1000i檢測(cè)結(jié)果比較
干化學(xué)分析法結(jié)果顯示陽(yáng)性1 704例,陰性3 296例,UF-1000i檢測(cè)結(jié)果顯示陽(yáng)性1 324例,陰性3 676例,2種方法檢測(cè)尿液中紅細(xì)胞結(jié)果比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
本研究結(jié)果顯示。出現(xiàn)檢測(cè)情況1和7時(shí),干化學(xué)分析和UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析儀都為陰性結(jié)果3 126例,尿沉渣鏡檢也是陰性3 111例,3種方法檢查都為陰性的符合率為99.5%。故可以建議當(dāng)UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析儀和尿干化學(xué)分析儀聯(lián)合檢測(cè)尿液標(biāo)本中紅細(xì)胞都出現(xiàn)陰性結(jié)果時(shí),可不用沉渣鏡檢進(jìn)一步檢測(cè),可直接發(fā)出報(bào)告[1]。將2種方法聯(lián)合應(yīng)用,綜合分析可提高尿液中紅細(xì)胞檢測(cè)的準(zhǔn)確度,可適用于大批量的健康體檢標(biāo)本檢測(cè)。
本研究結(jié)果還顯示,出現(xiàn)檢測(cè)情況3時(shí),有350例尿液標(biāo)本的尿沉渣鏡檢和UF-1000i尿液流式細(xì)胞儀結(jié)果均為陰性,而尿液干化學(xué)分析法則為陽(yáng)性,出現(xiàn)假陽(yáng)性率為7%。干化學(xué)分析法檢測(cè)尿液標(biāo)本中紅細(xì)胞的原理是根據(jù)血紅蛋白的亞鐵血紅素具有過(guò)氧化物酶活性,可以催化分解過(guò)氧化物,使鄰聯(lián)甲苯胺氧化而呈顯色。其顏色深淺與血紅蛋白水平有關(guān)[2]。絕大多數(shù)可以反映尿液標(biāo)本中有無(wú)紅細(xì)胞,但不能直觀分析其細(xì)胞形態(tài)。本研究1結(jié)果還顯示,出現(xiàn)檢測(cè)情況5時(shí),有15例患者尿液標(biāo)本其干化學(xué)法與尿沉渣鏡檢均為陰性。而UF-1000i尿流式細(xì)胞分析儀顯示為陽(yáng)性。因?yàn)閁F-1000i尿液流式細(xì)胞分析儀應(yīng)用紅色半導(dǎo)體激光束照射經(jīng)過(guò)核酸熒光染色后的尿液標(biāo)本在鞘液分析池中形成鞘液樣本,轉(zhuǎn)換成的光電信號(hào)進(jìn)行分析和識(shí)別,并通過(guò)計(jì)算得到相應(yīng)細(xì)胞的大小、長(zhǎng)度、體積等,同時(shí)得到有形成分的直方圖和散點(diǎn)圖,而尿液中出現(xiàn)草酸鈣結(jié)晶、酵母菌時(shí),由于其大小和紅細(xì)胞接近,可以干擾紅細(xì)胞計(jì)數(shù),造成假陽(yáng)性結(jié)果[3]。
綜上所述,3種方法對(duì)尿中紅細(xì)胞的檢測(cè)結(jié)果存在差異,干化學(xué)法和流式細(xì)胞分析法易出現(xiàn)假陰性和假陽(yáng)性,建議3種方法聯(lián)合應(yīng)用,以提高尿中紅細(xì)胞的陽(yáng)性檢出率。
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Analysis of the Results of Different Methods of Red Blood cells in Urine Specimens Comparative
ZHAO WenxiangLaboratory,Songyuan Central Hospital in Jilin,Songyuan 138001,China
【Abstract】
Objective To study the three kinds of commonly used urine tests to detect the role and value of red blood cells in urine specimens. Methods 5 000 cases were patients with microscopic examination, chemical analyzer, and UF-1000i urine flow cytometer. Results Test results of urine flow cytometry UF-1000i analyzer and chemical analyzer test results compared, the difference was significant (P < 0.05). Conclusion The three methods differ on the test results in red blood cells in urine, dry chemical and flow cytometry prone to false negatives and false positives, it recommends three methods in combination, to enhance red blood cells urine positive rate.
【Key words】RBC,Microscopy,F(xiàn)low cytometry
doi:10.3969/j.issn.1674-9316.2015.23.116
【中圖分類(lèi)號(hào)】R446
【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B
【文章編號(hào)】1674-9316(2015)23-0158-02