心臟干細(xì)胞可通過旁分泌exosome保護(hù)心肌細(xì)胞發(fā)生凋亡

肖　靜，潘　宇，李曉紅，吳岳恒，姜　霖，楊翔宇，余細(xì)勇，△(廣東省人民醫(yī)院，廣東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)研究中心，廣東廣州50080;南方醫(yī)科大學(xué)，廣東廣州5055;廣州醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，廣東廣州546)

心臟干細(xì)胞可通過旁分泌exosome保護(hù)心肌細(xì)胞發(fā)生凋亡

肖靜1，2，潘宇1，李曉紅1，吳岳恒1，姜霖1，2，楊翔宇1，2，余細(xì)勇1，3△
(1廣東省人民醫(yī)院，廣東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)研究中心，廣東廣州510080;2南方醫(yī)科大學(xué)，廣東廣州510515;3廣州醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，廣東廣州511436)

心臟干細(xì)胞移植在心肌梗死治療中具有廣泛應(yīng)用，外泌體(exosome)被認(rèn)為是細(xì)胞旁分泌的重要介質(zhì)。本研究擬建立心臟固有干細(xì)胞(CPCs)的成熟分離方法，并初步探索CPCs分泌的exosome在體外保護(hù)氧化應(yīng)激狀態(tài)下心肌細(xì)胞的凋亡。原代分離培養(yǎng)鑒定Sca-1 + CPCs，離心加試劑盒分離出CPCs分泌的exosome，并進(jìn)行表型鑒定和粒徑分析;將心肌細(xì)胞分成對(duì)照組與CPC-exo預(yù)處理組，用H2O2處理心肌細(xì)胞誘導(dǎo)其凋亡，Western blot (WB)檢測cleaved caspase-3蛋白水平。結(jié)果顯示:磁珠分選出的細(xì)胞用免疫熒光檢測發(fā)現(xiàn)Sca-1呈現(xiàn)陽性表達(dá)，流式細(xì)胞術(shù)提示分選前和分選后Sca-1陽性細(xì)胞的比例差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(n =3，P＜0. 01) ; CPCs來源的exosome，WB結(jié)果提示其CD63表達(dá)陽性;體外凋亡保護(hù)的WB結(jié)果顯示，加了CPC-exo的細(xì)胞凋亡狀態(tài)明顯改善，且相關(guān)蛋白表達(dá)顯著降低(P＜0. 05)。因此，心臟干細(xì)胞可以分泌出攜帶有重要信息物質(zhì)的exosome，能在體外保護(hù)心肌細(xì)胞，避免其發(fā)生凋亡，為臨床心梗等疾病提供全新的治療策略。

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