NAC通過調(diào)控胞漿抗氧化蛋白的氧化還原狀態(tài)減輕心肌細胞氧化應(yīng)激損傷

劉協(xié)紅，蔡姣迪，肖獻忠，張華莉(中南大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)系，湖南長沙410083)

NAC通過調(diào)控胞漿抗氧化蛋白的氧化還原狀態(tài)減輕心肌細胞氧化應(yīng)激損傷

劉協(xié)紅，蔡姣迪，肖獻忠，張華莉
(中南大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)系，湖南長沙410083)

目的:探討N-乙酰半胱氨酸(NAC)是否通過影響心肌細胞內(nèi)抗氧化通路蛋白的氧化還原狀態(tài)從而在心肌細胞氧化應(yīng)激中發(fā)揮保護作用。方法:用H2O2刺激H9c2心肌細胞導(dǎo)致氧化應(yīng)激損傷。采用CM-H2DCFDA熒光染料檢測細胞內(nèi)ROS變化情況;谷胱甘肽試劑盒檢測細胞內(nèi)GSH和GSSG的水平;非還原Western blot技術(shù)檢測Trx1、GR、Prx1和PTEN的氧化還原狀態(tài);還原Western blot檢測ASK1和AKT的磷酸化。結(jié)果: NAC預(yù)處理組明顯增加心肌細胞氧化應(yīng)激時的細胞活力和GSH/ GSSG比值，并且降低細胞內(nèi)ROS水平。非還原Western blot顯示H2O2刺激使還原型Trx1明顯減少，氧化型GR、Prx1和PTEN顯著增多，NAC預(yù)處理可以增加還原型Trx1，減少氧化型GR、Prx1和PTEN。還原Western blot發(fā)現(xiàn)，NAC預(yù)處理之后，H2O2誘導(dǎo)的ASK1磷酸化明顯減少，而H2O2誘導(dǎo)的AKT磷酸化明顯增加。結(jié)論: NAC通過減少胞漿內(nèi)抗氧化蛋白的氧化從而保護心肌細胞氧化應(yīng)激損傷。

E-mail: zhanghuali@csu.edu.cn