ROS增強(qiáng)iPSC促進(jìn)皮膚創(chuàng)傷愈合的作用

陸　鵬，李　寧，康雪玲，全　晶，陳思鋒(復(fù)旦大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)與病理生理學(xué)系，上海200433)

·干細(xì)胞·

ROS增強(qiáng)iPSC促進(jìn)皮膚創(chuàng)傷愈合的作用

陸鵬，李寧，康雪玲，全晶，陳思鋒△
(復(fù)旦大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)與病理生理學(xué)系，上海200433)

本研究動(dòng)態(tài)比較誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞(iPSC)靜脈移植和局部滴注方式對(duì)皮膚全層創(chuàng)傷愈合的影響及活性氧(ROS)的作用。用H2O2或N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)預(yù)處理調(diào)節(jié)iPSC內(nèi)ROS含量。連續(xù)12 d拍照測(cè)量創(chuàng)口面積并計(jì)算創(chuàng)口愈合百分率。于術(shù)后第3、5、12天分批處死動(dòng)物并取材，應(yīng)用Masson三色染色檢測(cè)創(chuàng)口組織內(nèi)的膠原蛋白相對(duì)含量以及上皮厚度，免疫組化檢測(cè)肉芽組織內(nèi)的新生血管數(shù)，實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Western blot技術(shù)檢測(cè)創(chuàng)傷組織內(nèi)細(xì)胞因子和HO-1含量，用熒光共定位的方法探討iPSC分化為血管內(nèi)皮細(xì)胞的能力。發(fā)現(xiàn)局部滴注iPSC促進(jìn)皮膚創(chuàng)傷愈合的療效明顯優(yōu)于靜脈移植。iPSC促進(jìn)創(chuàng)口愈合，顯著提高創(chuàng)緣上皮厚度、皮膚創(chuàng)傷組織的膠原蛋白、TGF-β、IL-1β、MCP-1、HO-1和VEGF水平以及創(chuàng)口肉芽組織內(nèi)新生血管數(shù)，適度H2O2的預(yù)處理增強(qiáng)iPSC的上述作用，NAC的預(yù)處理阻斷iPSC的作用。H2O2的預(yù)處理促進(jìn)iPSC在創(chuàng)傷組織中著床并分化為血管內(nèi)皮細(xì)胞。本研究表明iPSC可促進(jìn)皮膚傷口愈合，iPSC的正常功能需要適度ROS代謝。

△E-mail: chen1216@fudan.edu.cn