G-四鏈體的形成與穩(wěn)定對(duì)miR-24表達(dá)的調(diào)控作用*

高　娟，戚艷超，徐　明(北京大學(xué)第三醫(yī)院心內(nèi)科，血管醫(yī)學(xué)研究所，北京100191)

G-四鏈體的形成與穩(wěn)定對(duì)miR-24表達(dá)的調(diào)控作用*

高娟，戚艷超，徐明△
(北京大學(xué)第三醫(yī)院心內(nèi)科，血管醫(yī)學(xué)研究所，北京100191)

目的:研究旨在探討G-四鏈體的形成與穩(wěn)定對(duì)miR-24表達(dá)調(diào)控作用，為非編碼RNA的調(diào)控提供新的思路。方法:圓二色光譜、分子核磁、硫酸二甲酯保護(hù)實(shí)驗(yàn)、電離電噴霧質(zhì)譜。野生型(G4)和富G序列突變型(NG4)的miR-24過表達(dá)腺病毒的構(gòu)建，人胚腎細(xì)胞系(HEK-293A)轉(zhuǎn)染，富G序列敲除SD大鼠的構(gòu)建，qRT-PCR等實(shí)驗(yàn)方法。結(jié)果:圓二色光譜證明miR-24-1上游能形成G-四鏈體并提示其具有平行鏈構(gòu)象特征;分子核磁、硫酸二甲酯保護(hù)實(shí)驗(yàn)等技術(shù)證實(shí)該G-四鏈體具有多層四分體平面結(jié)構(gòu)。病毒轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)表明，G-四鏈體在穩(wěn)定性配基的誘導(dǎo)與穩(wěn)定作用下能抑制miR-24成熟體的表達(dá)。該段富G序列敲除的SD大鼠，心臟組織的miR-24表達(dá)水平顯著高于野生型SD大鼠。結(jié)論: miR-24-1上游富G序列能夠形成平行鏈G-四鏈體結(jié)構(gòu)，該G-四鏈體結(jié)構(gòu)的形成與穩(wěn)定能夠抑制miR-24的表達(dá)水平。

國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.91339105) ;北京市自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.7142165) ;北京市科學(xué)技術(shù)委員會(huì)基金資助項(xiàng)目(No.Z141100000214006)

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