臂尾輪蟲的營養(yǎng)強化研究進展

鄧 平， 艾桃山， 喻運珍， 張生元

（武漢市水產(chǎn)科學(xué)研究所，湖北武漢 430207）

臂尾輪蟲是海水魚類育苗的活餌料，在水產(chǎn)養(yǎng)殖中廣泛應(yīng)用。已有研究中用于魚、蝦、蟹等水產(chǎn)幼苗開口餌料的臂尾輪蟲有：褶皺臂尾輪蟲（Brachionus plicatilis）、壺狀臂尾輪蟲（B.urceus）、圓形臂尾輪蟲 （B.rofundiformis）、萼花臂尾輪蟲（B.calysiflorus）、角突臂尾輪蟲（B.angularis）、紅臂尾輪蟲（B.rubens）及方形臂尾輪蟲（B.quodridentatus）等（Ogata 等，2011；陳舒泛，2001）。輪蟲的批量生產(chǎn)中多采用單胞藻或酵母作為餌料（Zhou等，2009；王鴻鴿等，2009）。單胞藻因營養(yǎng)豐富，是輪蟲批量培養(yǎng)的首選餌料，但培養(yǎng)需要耗費大量的人力和物力，在一定程度上限制了輪蟲的大規(guī)模培養(yǎng)。生產(chǎn)上用酵母培養(yǎng)的輪蟲在數(shù)量上能滿足大規(guī)模育苗生產(chǎn)的需要，但許多研究發(fā)現(xiàn)用酵母培育的輪蟲存在營養(yǎng)缺陷，作為魚蝦幼體的餌料效果很差。因此，在保證餌料供應(yīng)的情況下攝入的餌料能否滿足仔魚的營養(yǎng)需求愈發(fā)顯得重要。輪蟲的營養(yǎng)強化就是利用輪蟲作為活載體，經(jīng)一定時間的強化處理將幼苗所需的脂類、蛋白質(zhì)、維生素、微量元素等營養(yǎng)物質(zhì)傳遞給幼苗，為水產(chǎn)養(yǎng)殖提供更優(yōu)質(zhì)的生物餌料。近年來有關(guān)輪蟲的營養(yǎng)強化方式和強化時間的研究備受關(guān)注。

1 營養(yǎng)強化的類型

1.1 脂類 脂類強化主要集中在提高輪蟲體內(nèi)的高度不飽和脂肪酸（HUFA）含量（尤其是EPA和DHA），以富含脂肪酸的單胞藻和乳化油強化為主。

1.1.1 單胞藻 海水單胞藻中n-3系列不飽和脂肪酸（特別是EPA和DHA）含量豐富的藻類有三角褐指藻、小新月菱形藻、球等邊金藻、小球藻、擬微球藻等。李磊等（2012）研究發(fā)現(xiàn)，利用球等鞭金藻和小球藻混合餌料強化后的輪蟲三種必需脂肪酸（EPA、DHA和ARA）含量較高，達到干重的1.05%，而且DHA/EPA和EPA/ARA的比值分別為0.7∶1和5.4∶1，比較適合作海洋動物幼體的開口餌料。吳學(xué)軍等（2009）報道經(jīng)海水小球藻、直鏈藻、亞心扁藻、三角褐脂藻、角毛藻及海水蒜頭藻強化的酵母輪蟲中，海水蒜頭藻與直鏈藻強化的褶皺臂尾輪蟲EPA/DHA含量最高。趙明日等（2002）用富含EPA、DHA的海水小球藻、球等邊金藻、扁藻等對褶皺臂尾輪蟲進行強化，研究發(fā)現(xiàn)輪蟲的脂肪酸組成和含量與所用餌料密切相關(guān)，尤其是EPA及DHA等多不飽和脂肪酸主要取決于這些脂肪酸在微藻中的含量。Kobayashi等（2008）報道在連續(xù)培養(yǎng)輪蟲時，采用微擬球藻→微擬球藻＋小球藻→小球藻的步驟投喂輪蟲能調(diào)控褶皺臂尾輪蟲體內(nèi)的n-6/n-3脂肪酸的比例。杜濤等（2010）研究發(fā)現(xiàn)，以小球藻粉和螺旋藻粉強化的輪蟲投喂尖吻鱸、卵形鯧鰹、美國紅魚仔魚，成活率明顯高于酵母輪蟲投喂的仔魚。Matsunari等（2012）報道，富含EPA的微擬球藻強化的輪蟲能提高高體鰤仔魚的生長率和存活率，富含DHA的海水小球藻強化的輪蟲能提高高體鰤仔魚的游泳能力。

淡水單胞藻中小球藻、斜生柵藻、卵形隱藻、中型裸藻、魚腥藻等都含有豐富的不飽和脂肪酸。劉文娟（2009）報道淡水壺狀臂尾輪蟲的EPA在干重為 5∶1∶1 （魚腥藻∶衣藻∶聚球藻） 組的含量最高；DHA 的含量在 1∶1∶1 組中最高。 王金秋（1995）報道5種淡水藻類（蛋白核小球藻、斜生柵藻、小球衣藻、卵形隱藻及中型裸藻）投喂輪蟲，以蛋白核小球藻輪蟲和斜生柵藻輪蟲的脂肪酸營養(yǎng)價值最高和次高。

1.1.2 乳化油 乳化油 （傳統(tǒng)魚油或富含EPA/DHA的油脂）強化主要針對海水輪蟲。日本在20世紀70年代開發(fā)出富含n-3多不飽和脂肪酸（PUFA）的油脂酵母、乳化烏賊肝油等，用其培養(yǎng)的輪蟲投喂給苗種后，魚苗的存活率大大提高。我國輪蟲所用的主要為脂肪酸型、甲酯型、乙酯型、甘油酯型等類型的n-3HUFA強化餌料。Gapasin等（1998）向輪蟲培養(yǎng)液中直接添加富含必需脂肪酸的乳化油，以強化輪蟲為食的苗種。結(jié)果表明，魚苗具有較高的生長率、強的耐鹽力、低的死亡率與畸形率。王秋榮等（2009）報道用強化劑強化的輪蟲能明顯提高大黃魚仔魚的存活率。尹彥強等（2009）研究發(fā)現(xiàn)，與小新月菱形藻強化的輪蟲相比，0.35 g/L的精制魚油或0.25 g/L的混合魚油強化的輪蟲投喂銀鯧仔魚比較合適。

1.1.3 其他 用南極大磷蝦粉營養(yǎng)強化后的褶皺臂尾輪蟲EPA和DHA含量明顯升高（陸建學(xué)等，2012）。裂殖壺菌干粉強化輪蟲能顯著提高輪蟲體內(nèi)不飽和脂肪酸特別是DHA的含量 （宋曉金，2008）。

1.2 蛋白質(zhì) 蛋白質(zhì)和游離氨基酸含量是評價生物餌料營養(yǎng)價值的另一個重要指標。劉文娟（2009）研究發(fā)現(xiàn)，投喂的混合餌料中，魚腥藻的比例越大，輪蟲體內(nèi)蛋白含量越高，當(dāng)投喂的魚腥藻∶衣藻∶聚球藻比例為 5∶1∶1時， 輪蟲體內(nèi)粗蛋白質(zhì)含量最高，達65.38%。該組輪蟲體內(nèi)的天冬氨酸、谷氨酸、精氨酸含量分別為6.21%、4.11%、3.21%。王金秋（1995）報道蛋白核小球藻、斜生柵藻和酵母投喂的輪蟲蛋白質(zhì)含量較高。Srivastava等（2006）以酵母、魚油和藻類不同比例搭配組成的餌料投喂褶皺臂尾輪蟲，輪蟲體內(nèi)的蛋白質(zhì)干重差異顯著，可溶性蛋白占粗蛋白質(zhì)的比例也明顯不同。

1.3 維生素 維生素對仔魚的代謝調(diào)控具有重要意義，如缺乏維生素B12時常造成食欲不振、生長緩慢和貧血等癥狀；缺少維生素E時，魚苗存活率降低（Hamre 等，2010）。楊家新（1997）報道添加維生素B12和維生素E后，萼花臂尾輪蟲種群密度、混交雌體百分率和卵雌比的變化隨維生素濃度的增加而不同。王金秋（1995）觀察了32°C時面包酵母中加入維生素C培養(yǎng)萼花臂尾輪蟲的效果，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，維生素C的添加量在0.1 mg/mL時，對輪蟲的種群增長有明顯促進作用。有研究表明，用添加維生素B12的淡水濃縮小球藻替代海水小球藻作為褶皺臂尾輪蟲的餌料，取得了與海水小球藻相似的培養(yǎng)效果 （Hirayama等，1989）。Negm等（2013）報道以維生素A強化的輪蟲作為六帶牙鯻幼魚的餌料，能明顯降低幼魚脊柱的畸形率。朱國霞等（2013）在大菱鲆育苗中發(fā)現(xiàn)，維生素C強化的輪蟲投喂苗種后，可以顯著降低仔稚魚的白化率。

1.4 微量元素 海水育苗中橈足類品質(zhì)優(yōu)于輪蟲，研究發(fā)現(xiàn)橈足類體內(nèi)一些必需微量元素（Mn高于輪蟲2倍、Cu高于輪蟲3倍、Zn高于輪蟲5倍、Se高于輪蟲33倍、I高于輪蟲10倍）遠高于輪蟲（Hamre 等，2008a）。 Hamre 等（2008b）報道 I和Se強化的褶皺臂尾輪蟲提高了大西洋鱈魚仔魚的存活率。Matsumoto等（2009）的研究表明輪蟲不能直接吸收培養(yǎng)液中的Zn，必須先在小球藻培養(yǎng)液中加入Zn，以富集Zn的微藻投喂褶皺臂尾輪蟲，輪蟲體內(nèi)的Zn濃度最高能達585 μg/g（干重）。Penglase等（2011）報道用富Se的酵母投喂輪蟲，輪蟲體內(nèi)Se濃度最高能達138 mg/kg（干重）。 Nordgreen 等（2013）報道加入 Se、Zn、Cu 和Mn促進了褶皺臂尾輪蟲種群的增長，但I對輪蟲種群的增長沒有明顯效果。周竹君等（2000）報道最適合褶皺臂尾輪蟲增殖所需的Zn和Co濃度分別為0.4 mg/L和4 mg/L。

2 營養(yǎng)強化時間

輪蟲的營養(yǎng)強化還與強化時間的長短密切相關(guān)，可分為短期強化和批量培養(yǎng)。

目前的研究主要集中在輪蟲不飽和脂肪酸強化時間的選擇。鄭智鴛等（1996）研究發(fā)現(xiàn)經(jīng)小球藻強化培養(yǎng)超過6 h的酵母輪蟲，可以達到全部由小球藻培養(yǎng)的輪蟲效果。周光正等（1996）以毛鱗魚油等強化培養(yǎng)輪蟲時發(fā)現(xiàn)，投喂不同餌料24 h后，輪蟲總脂含量幾乎維持在同一水平。趙明日等（2002）的試驗結(jié)果顯示：用微藻強化輪蟲，12 h后輪蟲體內(nèi)的n-3PUFA含量可達餌料含量的75%，強化24 h含量超過80% ，強化7 d的輪蟲可達到90%以上。宋曉金 （2008）研究發(fā)現(xiàn)以50mg/L的裂殖壺菌強化輪蟲12 h，能顯著提高輪蟲體內(nèi)DHA的含量。呂延紅（2009）報道經(jīng)微綠球藻強化，輪蟲體內(nèi)n-3 HUFA含量遞增，強化18 h的輪蟲n-3 HUFA含量最高，24 h輪蟲n-3 HUFA含量下降；營養(yǎng)強化劑強化24 h輪蟲的n-3 HUFA含量最高；組合餌料（藻粉、蝦片）強化36 h輪蟲的n-3 HUFA最高。吳學(xué)軍（2009）研究發(fā)現(xiàn)經(jīng)海水蒜頭藻與直鏈藻強化72 h的輪蟲體內(nèi)EPA/DHA含量最高，飼喂強化72 h輪蟲的蚤狀幼體的成活率和變態(tài)時間優(yōu)于其他時間處理組。陳立僑等（2000）認為乳化油強化開始后12 h內(nèi)，輪蟲體內(nèi)n-3 PUFA含量增加速率最快，之后隨時間的延長，輪蟲體內(nèi)n-3 PUFA含量增長速率呈下降趨勢，當(dāng)強化時間超過24 h后，輪蟲體內(nèi)n-3 PUFA含量基本維持在一定的水平上。

關(guān)于其他營養(yǎng)物質(zhì)的營養(yǎng)強化時間研究較少。Nordgreen等（2013）研究發(fā)現(xiàn)在短期強化（3 h）或批量培養(yǎng)（6 d）中，微量元素的加入對褶皺臂尾輪蟲種群增長都有明顯的促進作用。

3 小結(jié)與展望

隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，對輪蟲品質(zhì)和質(zhì)量的要求不斷提高。目前關(guān)于輪蟲營養(yǎng)強化的研究已進行了大量的工作，但仍然存在一些亟待解決的問題：（1）應(yīng)用單胞藻對輪蟲進行營養(yǎng)強化已有較多報道，但目前的工作多限于對單一藻類效果的研究，對混合藻類的研究較少。挑選脂類、蛋白質(zhì)等含量較高的微藻，并將不同的微藻以適宜的餌料密度合理搭配用于強化輪蟲具有較大的意義。（2）現(xiàn)有的營養(yǎng)強化以輪蟲不飽和脂肪酸方面的研究為主，但蛋白質(zhì)、維生素、微量元素等對仔魚的存活和生長也有非常重要的作用，因此應(yīng)根據(jù)不同仔魚的營養(yǎng)需求，從蛋白質(zhì)、維生素及微量元素方面對輪蟲的營養(yǎng)強化做進一步的研究。（3）對輪蟲進行營養(yǎng)強化時，最佳處理時間研究結(jié)果不盡相同。應(yīng)在實際應(yīng)用中根據(jù)強化餌料的不同調(diào)整強化時間，以期達到最佳的強化效果。（4）淡水輪蟲營養(yǎng)強化研究的滯后與淡水仔稚魚對脂類、蛋白質(zhì)、維生素和微量元素等方面營養(yǎng)需求的研究較少密切相關(guān)。應(yīng)加強淡水仔稚魚營養(yǎng)需求方面的研究。根據(jù)不同仔魚的營養(yǎng)需求，通過對不同強化方式培育的輪蟲進行成分測定，得出不同餌料對輪蟲營養(yǎng)強化的效果，選擇出輪蟲的最適強化餌料。

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