長鏈非編碼RNA調(diào)控細(xì)胞凋亡及自噬的研究進(jìn)展

*［基金項目］國家自然科學(xué)基金青年基金資助項目(No．31300950);教育部博士點博士學(xué)科點專項科研基金聯(lián)合資助課題新教師類(No．20124433120011)

△通訊作者Tel: 020-61648465; E-mail: lanblue@ fimmu．com

Research progress of long non-coding RNA in regulating cell apoptosis and autophagy

XU Jing 1，XU Qiu-lin 2，GUO Xiao-hua 1

(

1

Department of Pathophysiology，Southern Medical University，Guangzhou 510515，China;

2

Department of ICU，General Hospital of Guangzhou Military Command，Guangzhou 510010，China．E-mail: lanblue@fimmu．com)

［ABSTRACT］　Long non-coding RNAs(lncRNAs)are a group of RNAs longer than 200 bp without protein-coding capacity and play an important role in epigenetics，transcription regulation and post-transcription regulation．Recently，studies have shown that dysregulation of lncRNAs caused cell cycle disorders，and abnormal activities of cell apoptosis and autophagy，contributing to a variety of diseases．Therefore，the role of lncRNAs in regulating cell death is expected to lead to the discovery of potential novel diagnostic markers and therapeutic targets．

［KEY WORDS］Long non-coding RNA; Apoptosis; Autophagy; Neoplasms

［文獻(xiàn)標(biāo)志碼］　A

doi: 10．3969/j．issn．1000-4718．2015．08．032

［收稿日期］2015-03-03　?。坌藁厝掌冢?015-05-05

［文章編號］1000-4718(2015)08-1525-06

細(xì)胞死亡根據(jù)其表觀形態(tài)學(xué)特征分為:凋亡、自噬、壞死等，隨著研究的進(jìn)展，逐步發(fā)現(xiàn)了其它多種死亡類型。細(xì)胞死亡是胚胎發(fā)育、組織穩(wěn)態(tài)和免疫調(diào)節(jié)的基礎(chǔ)。機體通過多種不同的細(xì)胞死亡方式維持各種組織、器官的正常運行以及機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)態(tài)。細(xì)胞死亡機制的失調(diào)可引起腫瘤等多種疾病。近年來研究顯示，長鏈非編碼RNA(long non-coding RNA，lncRNA)在細(xì)胞中表達(dá)水平上的差異與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān) ［1］，揭示了其在細(xì)胞生長周期中增殖、分化、死亡多個進(jìn)程中的重要調(diào)控作用，為人類疾病的診斷及治療提供了新的靶點。而目前細(xì)胞壞死的機制尚不十分明確，lncRNA調(diào)控壞死進(jìn)程的研究未見相關(guān)報道，本文就近年來報道的lncRNA在調(diào)控細(xì)胞凋亡及自噬中的作用及其與多種疾病的發(fā)生發(fā)展的關(guān)系作一綜述。

1長鏈非編碼RNA的基本特點及作用

非編碼RNA(non-coding RNA，ncRNA)為缺乏蛋白質(zhì)編碼潛能的RNA分子的統(tǒng)稱，ncRNA根據(jù)長度可分為2類:小非編碼RNA(＜200 nt)和長鏈非編碼RNA(＞200 nt)，近年來，小非編碼RNA包括微小RNA(microRNA，miRNA)和小干擾RNA(small interfering RNA，siRNA)在對癌癥的調(diào)控作用研究中取得重大進(jìn)展。長鏈非編碼RNA是一種缺乏編碼蛋白能力的內(nèi)源性RNA分子，由RNA聚合酶Ⅱ轉(zhuǎn)錄并經(jīng)可變剪接生成，缺乏有效長度開放閱讀框架(＜100氨基酸) ［2］。與其它非編碼RNA相比，lncRNA具有類型多、作用模式多和數(shù)量多等特點，越來越多的研究顯示lncRNA在人類疾病中發(fā)揮重要的生物學(xué)作用，引起人們的重視。

lncRNA可分為正義lncRNA(sense lncRNA)、反義lncRNA(antisense lncRNA)、雙向lncRNA(bidirectional lncRNA)、基因內(nèi)lncRNA(intronic lncRNA)及基因間lncRNA(intergenic lncRNA)5種類型。正因為其類型、數(shù)量上的豐富，造就了它對基因表達(dá)調(diào)控模式的多種多樣。通常來說，lncRNA主要從表觀遺傳學(xué)、轉(zhuǎn)錄調(diào)控及轉(zhuǎn)錄后調(diào)控3個水平實現(xiàn)對基因表達(dá)的調(diào)控 ［3］，與靶基因組成復(fù)雜的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，共同調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、分化與死亡，廣泛參與機體眾多生理及病理過程，與臨床上許多腫瘤及非腫瘤疾病密切相關(guān)。

2長鏈非編碼RNA與凋亡性細(xì)胞死亡

細(xì)胞凋亡，又稱程序性細(xì)胞死亡(programmed cell death，PCD)，指細(xì)胞在一定的生理或病理條件下由基因控制的自主而有序的生理性死亡。細(xì)胞凋亡涉及一系列基因轉(zhuǎn)錄及蛋白表達(dá)異常，如Caspase家族蛋白、Bcl-2家族蛋白和p53蛋白等。導(dǎo)致凋亡的機制至今尚未完全清楚，但凋亡機制的破壞會導(dǎo)致細(xì)胞生長周期的停滯或紊亂，進(jìn)而導(dǎo)致許多疾病如腫瘤的發(fā)生。越來越多的研究發(fā)現(xiàn)，部分lncRNA能夠通過調(diào)控細(xì)胞凋亡進(jìn)程，影響細(xì)胞的增殖分化從而導(dǎo)致疾病，下面將對近年來研究較為深入的幾種lncRNA逐一介紹。

2．1轉(zhuǎn)移相關(guān)肺腺癌轉(zhuǎn)錄本1轉(zhuǎn)移相關(guān)肺腺癌轉(zhuǎn)錄本1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1，MALAT1)又稱為核富集豐富轉(zhuǎn)錄本2(nuclear-enriched abundant transcript 2，NEAT2)，是一種在多種哺乳動物中呈高豐度表達(dá)并且在進(jìn)化中高度保守的核內(nèi)lncRNA ［4］。MALAT1是目前研究得較多、范圍較廣的長鏈非編碼RNA，其基因位于11q13.1，最初是在早期非小細(xì)胞肺癌組織中被發(fā)現(xiàn)旳，現(xiàn)研究己發(fā)現(xiàn)lncRNA MALAT1在胰腺癌、前列腺癌、乳腺癌、膽囊癌、肝癌及結(jié)腸癌等腫瘤中的表達(dá)均上調(diào) ［5］。

MALAT1通過參與細(xì)胞內(nèi)多條與凋亡相關(guān)的信號通路來抑制細(xì)胞凋亡，進(jìn)而加速腫瘤細(xì)胞的激活、增殖。已有多數(shù)研究表明，膀胱癌組織中MALAT1表達(dá)水平明顯高于周圍正常組織 ［6-7］，Han等 ［6］在沉默尿路上皮癌T24和5737細(xì)胞中MALAT1基因后，通過流式細(xì)胞技術(shù)以及酶聯(lián)免疫吸附測定均發(fā)現(xiàn)細(xì)胞發(fā)生凋亡。Guo等 ［8］研究發(fā)現(xiàn)，抑制人子宮頸鱗癌細(xì)胞CaSki中MALAT1表達(dá)后，細(xì)胞凋亡標(biāo)志物caspase-3和caspase-8的基因表達(dá)明顯上調(diào)，抗凋亡基因bcl-2和bcl-xL表達(dá)下調(diào)，可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的bax基因表達(dá)顯著上調(diào)，證實MALAT1基因的下調(diào)促進(jìn)了細(xì)胞凋亡。Hu等 ［9］通過對食管鱗狀細(xì)胞癌研究后也指出，敲除食管鱗癌細(xì)胞中MALAT1會抑制細(xì)胞的增殖、遷移，使細(xì)胞周期發(fā)生G 2/M期阻滯，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。另外，MALAT1的表達(dá)和ATM-CHK2通路的磷酸化作用呈負(fù)相關(guān)，下調(diào)MALAT1表達(dá)會激活A(yù)TM-CHK2通路，引起細(xì)胞生長周期阻滯。

2．2細(xì)胞周期素依賴性激酶抑制因子4b(INK4b)位點的反義非編碼RNA INK4b位點的反義非編碼RNA(antisense non-coding RNA in the INK4 locus，ANRIL)首次在患有家族遺傳性黑色素瘤合并神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤患者的遺傳分析中被發(fā)現(xiàn)，此類人群大量缺失INK4b-ARF-INK4a基因簇 ［10］，該基因定位于9q21染色體上。以往研究已證實，ANRIL可以通過與多梳抑制復(fù)合物2(polycomb repressive complex-2，PRC-2)結(jié)合并激活2種細(xì)胞周期素依賴性激酶抑制劑(p15 INK4b和p16 INK4a)，導(dǎo)致這些影響細(xì)胞周期中關(guān)鍵生化反應(yīng)(凋亡、干細(xì)胞自我修復(fù)及復(fù)制性衰老)的調(diào)節(jié)因子發(fā)生基因沉默，抑制細(xì)胞凋亡，促進(jìn)腫瘤發(fā)生 ［11］。Zhang等 ［12］的研究指出，lncRNA和miRNA在胃癌細(xì)胞中存在密切聯(lián)系，ANRIL可以在轉(zhuǎn)錄水平下調(diào)細(xì)胞中miR99a和miR449a的表達(dá)，進(jìn)而激活mTOR和CDK6/E2F1信號通路，參與細(xì)胞生長周期的調(diào)控。

Nie等 ［13］對非小細(xì)胞肺癌的體內(nèi)及體外研究發(fā)現(xiàn)，干擾ANRIL的表達(dá)，會導(dǎo)致SPC-A1和PC9細(xì)胞發(fā)生G 1/G 0期生長停滯和G 2/S期生長減緩。同時證明，在NSCLC PC9細(xì)胞中，ANRIL通過與PRC2結(jié)合抑制KLF2和p21的轉(zhuǎn)錄從而影響細(xì)胞增殖及凋亡，并且KLF2的失活進(jìn)一步導(dǎo)致p21表達(dá)的下調(diào)。而Krüppel樣轉(zhuǎn)錄因子(Krüppel-like factors，KLF)是一類具有Cys2/His2鋅指結(jié)構(gòu)的轉(zhuǎn)錄因子，在抑制腫瘤細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)移以及誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡中均發(fā)揮重要作用 ［14］。

2．3前列腺癌基因表達(dá)標(biāo)志物1前列腺癌基因表達(dá)標(biāo)志物1(prostate cancer gene expression marker 1，PCGEM1)定位于染色體2q32上，具有顯著的前列腺組織特異性和雄性激素依賴性。PCGEM1在前列腺癌組織中表達(dá)顯著增高，作為潛在的前列腺癌標(biāo)志物，調(diào)控著前列腺癌的發(fā)展進(jìn)程。Fu等 ［15］研究證明，PCGEM1的過表達(dá)能夠抑制化療藥物阿奇霉素或多柔比星所誘導(dǎo)的雄激素依賴性細(xì)胞如LNCaP細(xì)胞中p53和p21 Waf1/Cip1抑癌基因的表達(dá)，從而抑制腫瘤細(xì)胞的凋亡，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖，主要的機制為PCGEM1的過表達(dá)抑制細(xì)胞凋亡核心成員胱天蛋白酶7的合成，使DNA修復(fù)異常，從而中斷細(xì)胞凋亡。Ifere等 ［16］發(fā)現(xiàn)在膽固醇超負(fù)荷的雄激素非依賴性前列腺癌細(xì)胞如PC-3和DU145細(xì)胞中也存在PCGEM1的過度表達(dá)。進(jìn)行降膽固醇治療后，腫瘤細(xì)胞內(nèi)PCGEM1的表達(dá)顯著降低，腫瘤細(xì)胞凋亡率明顯升高，為高脂飲食易導(dǎo)致前列腺癌的發(fā)病提供了理論基礎(chǔ)。

He等 ［17］對LNCaP前列腺癌細(xì)胞的研究首次證實了PCGEM1和miR-145之間存在的相互調(diào)控作用，轉(zhuǎn)染siRNA下調(diào)PCGEM1表達(dá)后發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞生長受到抑制，增殖及侵襲能力均降低，細(xì)胞凋亡明顯增加，并且證實其作用是通過上調(diào)miR-145的表達(dá)引起的。體內(nèi)、體外研究結(jié)果表明，下調(diào)PCGEM1或者過表達(dá)miR-145均會抑制細(xì)胞周期進(jìn)程，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。

2．4同源異形盒基因轉(zhuǎn)錄本反義RNA同源異形盒基因(homeobox，HOX)轉(zhuǎn)錄本反義RNA(HOX transcript antisense RNA，HOTAIR)是在人成纖維細(xì)胞的HOX中首次發(fā)現(xiàn)并命名的，是首個被發(fā)現(xiàn)以反式轉(zhuǎn)錄調(diào)控基因表達(dá)的長鏈非編碼RNA，序列位于12號染色體HOX位點內(nèi)，由HOX C位點轉(zhuǎn)錄，可以驅(qū)使PRC2及其它核染色質(zhì)調(diào)控因子結(jié)合至HOX D位點及其它潛在基因位點 ［18］。

Gupta等 ［19］研究發(fā)現(xiàn)HOTAIR在乳腺癌組織中表達(dá)下調(diào)，并提出HOTAIR調(diào)控癌癥轉(zhuǎn)移的進(jìn)程，HOTAIR在全基因水平招募PRC2復(fù)合體至特異性靶基因，誘導(dǎo)H3-K27甲基化異常，導(dǎo)致腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因表達(dá)異常。Wu等 ［20］也報道，lncRNA HOTAIR的下調(diào)導(dǎo)致與細(xì)胞生長周期相關(guān)的抑制基因p53、p21和p16等表達(dá)上調(diào)，降低了HOTAIR在EZH2和H3K27me3基因位點招募和結(jié)合的能力。此外，細(xì)胞周期相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄活性是通過沉默HOTAIR和組蛋白H3-K27三甲基化來維持的。在Lee等 ［21］研究中發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)染si-HOTAIR后胃癌細(xì)胞株KATO III凋亡率明顯增加，誘導(dǎo)細(xì)胞生長周期發(fā)生G 0/G 1期停滯，進(jìn)一步凋亡分析顯示，敲除HOTAIR使具有DNA修復(fù)功能的聚腺苷酸二磷酸核糖多聚酶1［poly(ADP-ribose)polymerase-1，PARP-1］活性受到抑制，而激活細(xì)胞凋亡反應(yīng)中線粒體釋放的caspase-3和caspase-7活性，促進(jìn)細(xì)胞凋亡。

2．5長鏈基因間非編碼RNA p21長鏈基因間非編碼RNA p21(long intergenic noncoding RNA p21，lincRNA-p21)參與DNA損傷下抑癌基因p53誘導(dǎo)的凋亡反應(yīng)，p53信號通路是引起細(xì)胞周期阻滯和凋亡發(fā)生的重要通路。以往研究證實，lincRNA-p21是細(xì)胞DNA損傷情況下受p53直接轉(zhuǎn)錄調(diào)控的靶基因，并且通過與核不均一核糖核蛋白K(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K，hnRNP-K)相互作用反饋激活p53發(fā)揮相關(guān)功能 ［22］。Wu等 ［23］在最新研究中報道了lincRNA-p21與p53作用的新機制，揭示了lincRNA-p21在心血管疾病如動脈粥樣硬化中的作用。研究顯示lincRNA-p21可以在體內(nèi)體外抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)凋亡，并且lincRNA-p21可以直接與鼠雙微基因(mouse double minute 2，MDM2)結(jié)合，導(dǎo)致p53從p53-MDM2復(fù)合體中釋放并重新與乙酰轉(zhuǎn)移酶p300結(jié)合并乙?；せ頿53的轉(zhuǎn)錄活性，誘導(dǎo)凋亡反應(yīng) ［24］。

2．6生長阻滯特異轉(zhuǎn)錄本5生長阻滯特異轉(zhuǎn)錄本5(growth arrest-specific transcript 5，GAS5)是近年來新發(fā)現(xiàn)的與細(xì)胞增殖及凋亡調(diào)控相關(guān)的lncRNA，位于人類染色體1q25．1上，最初是因其在生長停滯的細(xì)胞中高表達(dá)被發(fā)現(xiàn)，以往研究已證實，lncRNA GAS5作為一種抑癌基因參與乳腺癌、胃癌、前列腺癌等多種腫瘤的進(jìn)程，下調(diào)表達(dá)可抑制雷帕霉素誘導(dǎo)的抗腫瘤特性，表明其發(fā)揮作用可能與mTOR信號通路的激活相關(guān) ［25］。GAS5還可以以“海綿”似的作用方式結(jié)合原來與啟動子結(jié)合的轉(zhuǎn)錄因子，干擾該轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控下游靶基因表達(dá)，進(jìn)而調(diào)節(jié)糖皮質(zhì)激素的應(yīng)答活性來影響細(xì)胞對凋亡的敏感性 ［26］。

Shi等 ［27］報道在非小細(xì)胞肺癌中，GAS5的過表達(dá)會顯著增加細(xì)胞凋亡，引發(fā)細(xì)胞周期停滯，進(jìn)一步體內(nèi)實驗發(fā)現(xiàn)，GAS5的異常表達(dá)導(dǎo)致p53的上調(diào)及E2F1的下調(diào)，E2F1被認(rèn)為是控制細(xì)胞增殖的重要轉(zhuǎn)錄因子，提示p53依賴性及p53非依賴性信號通路對GAS5的功能均有重要的調(diào)控作用。Sun等 ［28］還指出，與轉(zhuǎn)染空白載體的對照組相比較，轉(zhuǎn)染pcDNA3．1-GAS5的實驗組E2F1、cyclin D1與p21在蛋白水平出現(xiàn)表達(dá)異常，而mRNA表達(dá)無明顯改變，證實GAS5是在轉(zhuǎn)錄后水平通過調(diào)節(jié)E2F1、cyclin D1與p21的表達(dá)來發(fā)揮腫瘤抑制作用。另外，Zhang等 ［29］在研究中還首次提出了GAS5可通過抑制致癌基因miRNA-21的表達(dá)來發(fā)揮功。

3長鏈非編碼RNA與自噬性細(xì)胞死亡

細(xì)胞自噬是近年來研究發(fā)現(xiàn)的一種新的死亡方式，是細(xì)胞程序性死亡方式之一，作為一種溶酶體依賴的降解途徑，既廣泛存在于細(xì)胞正常的生理過程中，通過降解衰老、損傷細(xì)胞器、長半衰期蛋白維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)以及通過可吞噬細(xì)胞內(nèi)微生物病原體行使天然免疫功能，同時也參與了多種疾病的病理過程，自噬過度或自噬不足都可能導(dǎo)致疾病發(fā)生。目前有關(guān)lncRNA對自噬調(diào)控的研究并不多，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)的自噬相關(guān)的lncRNA數(shù)量也較少，調(diào)控機制并未十分明確。

3．1母系表達(dá)基因3　母系表達(dá)基因3(maternally expressed gene 3，MEG3)是人染色體14q32．3印記基因座DLK-MEG3上的一個印記基因，它轉(zhuǎn)錄后編碼一個lncRNA-MEG3。現(xiàn)已有研究報道，lncRNA-MEG3作為抑癌基因通過抑制自噬來調(diào)節(jié)膀胱癌的進(jìn)展，Ying等 ［30］發(fā)現(xiàn)，在MEG3表達(dá)下調(diào)的膀胱癌組織中，自噬標(biāo)志物L(fēng)C3-ⅡmRNA的表達(dá)水平明顯增加，并且MGE3的表達(dá)水平與LC3-ⅡmRNA表達(dá)水平呈顯著負(fù)相關(guān)。轉(zhuǎn)染MEG3-siRNA下調(diào)其表達(dá)后，細(xì)胞增殖增加，凋亡受到了抑制，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，抑制自噬可以抵消MEG3下調(diào)所致的細(xì)胞增殖。MEG3在膀胱癌中調(diào)控自噬的機制并未明確，但由于p53已被證實是MEG3調(diào)控的直接靶基因 ［31］，可以增加p53依賴的各種抑癌基因表達(dá)，因此推測MEG3可以通過p53通路來調(diào)控自噬發(fā)生。

3．2肝癌高表達(dá)轉(zhuǎn)錄本　肝癌高表達(dá)轉(zhuǎn)錄本(highly upregulated in liver cancer，HULC)是一種首次在肝癌組織中被發(fā)現(xiàn)高表達(dá)的lncRNA，基因定位于6p24．3。Zhao等 ［32］發(fā)現(xiàn)HULC在胃癌細(xì)胞株及胃癌組織中顯著過表達(dá)，過表達(dá)HULC會導(dǎo)致LC3-Ⅱ/ LC3-Ⅰ比值增大，即證實上調(diào)的HULC會激活SGC7901細(xì)胞的自噬。深入研究發(fā)現(xiàn)，自噬抑制劑LV-HULC或3-MA預(yù)處理細(xì)胞后，自噬受到抑制反而細(xì)胞凋亡增加，揭示HULC在自噬與凋亡中具有分子開關(guān)式的作用。

3．3長鏈非編碼RNA FLJ11812長鏈非編碼RNA FLJ11812是近年來公認(rèn)的一種促自噬因子，目前對其調(diào)控自噬機制的研究相對較成熟。哺乳動物雷帕霉素靶蛋白復(fù)合體1(mammalian target of rapamycin complex 1，mTORC1)是自噬的一個重要的調(diào)控分子，在Ge等 ［33］對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的研究中發(fā)現(xiàn)，藥物新型丁內(nèi)酯衍生物3-芐基-5-(2-硝基苯氧甲基)-γ-丁內(nèi)酯{ 3-benzyl-5-［(2-nitrophenoxy)methyl］-dihydrofuran-2(3H)-one，3BDO}是mTORC1的一種良好的激動劑，而lncRNA FLJ11812位于基因TGFB2的3’UTR區(qū)，是mTORC1的下游分子，3BDO激活mTORC1后上調(diào)FLJ11812結(jié)合蛋白細(xì)胞毒顆粒相關(guān)蛋白1(cytotoxic granule-associated RNA binding protein 1/ T-cell intracellular antigen-1，TIA1)的磷酸化水平，而TIA1在FLJ11812的加工形成中發(fā)揮重要作用。深入研究表明，F(xiàn)LJ11812可以競爭性地結(jié)合miR4459靶蛋白自噬相關(guān)蛋白13(autophagy-related 13，ATG13)，3BDO抑制FLJ11812的表達(dá)可以上調(diào)miR-4459使得ATG13表達(dá)受抑制，從而達(dá)到調(diào)控細(xì)胞自噬的作用 ［34］。

3．4磷酸酶及張力蛋白同源性假基因1磷酸酶及張力蛋白同源性假基因1(phosphatase and tensin homolog pseudogene 1，PTENP1)是一種假基因，以往研究證實它可以編碼PTENP1 RNA，與PTEN(phosphatase and tensin homolog)mRNA競爭性結(jié)合mi-RNAs，從而調(diào)控PTEN表達(dá)水平。Chen等 ［35］研究證實了lncRNA PTENP1在肝癌進(jìn)程中的分子調(diào)控機制，研究得出，PTENP1過表達(dá)會提高PTEN表達(dá)水平，阻斷致癌性PI3K/AKT信號通路作用從而解除其對自噬的抑制作用，降低腫瘤細(xì)胞的增殖及轉(zhuǎn)移能力，誘導(dǎo)自噬，促進(jìn)凋亡。他們還發(fā)現(xiàn)，miRNA-17 和miRNA-20a可以下調(diào)自噬反應(yīng)的核心基因ULK1、ATG7和p62的表達(dá)，這些基因在細(xì)胞自噬反應(yīng)的激活及完成中具有重要作用 ［36］，PTENP1與二者的拮抗作用使得它可以間接地通過下調(diào)miRNA-17及miRNA-20a的表達(dá)來誘導(dǎo)自噬。另外，該研究指出，PTENP1表達(dá)上調(diào)還可以通過抑制mTOR的磷酸化及自噬相關(guān)蛋白Bcl-2的表達(dá)，來誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞的自噬［37］。

3．5 BRAF激活的長鏈非編碼RNA Wang等 ［38］在對甲狀腺乳頭狀癌的研究中首次提出，BRAF激活的lncRNA(BRAF-activated lncRNA，BANCR)可以通過調(diào)控細(xì)胞自噬來控制細(xì)胞增殖。過表達(dá)BANCR可以使PTC IHH-4細(xì)胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值增加，敲除BANCR或使用自噬抑制劑3-MA均可抑制自噬反應(yīng)，但其機制仍尚未明確。致癌基因BRAF的高表達(dá)已被證實可以激活細(xì)胞自噬，故可以推測出BANCR在自噬調(diào)控中的重要作用。

4總結(jié)與展望

長鏈非編碼RNA是哺乳動物基因組中非常龐大的組成部分，在細(xì)胞中發(fā)揮著廣泛而關(guān)鍵的分子調(diào)控作用，lncRNA的特異性表達(dá)及調(diào)節(jié)異常與許多疾病尤其是惡性腫瘤密切相關(guān)，它在細(xì)胞增殖、分化及死亡調(diào)節(jié)中的重要作用也逐步被證實。細(xì)胞死亡是機體維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的重要方式，細(xì)胞死亡機制異常時，死亡相關(guān)基因表達(dá)異常，造成細(xì)胞信號通路的紊亂以及相關(guān)蛋白表達(dá)失調(diào)，細(xì)胞的增殖、分化等功能均會受到影響從而導(dǎo)致疾病。目前對于lncRNA參與影響細(xì)胞死亡作用的研究仍處于初始階段，越來越多的凋亡及自噬相關(guān)性lncRNA先后被發(fā)現(xiàn)，但多集中于其表達(dá)及功能方面的研究，因此，對lncRNA調(diào)控細(xì)胞死亡通路的特定分子機制的研究應(yīng)該成為當(dāng)前的研究重點。伴隨越來越多的疾病特異性lncRNA的發(fā)現(xiàn)及對疾病發(fā)生分子機制的深入研究，lncRNA對特定信號分子的靶向調(diào)控作用會給臨床疾病的診斷、治療及藥物的研究提供新的靶標(biāo)、新的方向。

［參　考　文　獻(xiàn)］

［1］周　軍，朱　靈，曹海軍，等．藥物性肝損傷與免疫性肝損傷肝組織中l(wèi)ncRNA表達(dá)譜的差異分析［J］．中國病理生理雜志，2015，31(2): 313-318．

［2］　Bu D，Yu K，Sun S，et al．NONCODE v3．0: integrative annotation of long noncoding RNAs［J］．Nucleic Acids Res，2012，40(Database issue): D210-D215．

［3］　Mercer TR，Dinger ME，Mattick JS．Long non-coding RNAs: insights into functions［J］．Nat Rev Genet，2009，10(3): 155-159．

［4］　Gutschner T，Hmmerle M，Diederichs S．MALAT1: a paradigm for long noncoding RNA function in cancer［J］．J Mol Med(Berl)，2013，91(7): 791-801．

［5］　Prensner JR，Chinnaiyan AM．The emergence of lncRNAs in cancer biology［J］．Cancer Discov，2011，1(5): 391-407．

［6］　Han Y，Liu Y，Nie L，et al．Inducing cell proliferation inhibition，apoptosis，and motility reduction by silencing long noncoding ribonucleic acid metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1 in urothelial carcinoma of the bladder［J］．Urology，2013，81(1): 209．e1-209．e7．

［7］Ying L，Chen Q，Wang Y，et al．Upregulated MALAT-1 contributes to bladder cancer cell migration by inducing epithelial-to-mesenchymal transition［J］．Mol Biosyst，2012，8(9): 2289-2294．

［8］　Guo F，Li Y，Liu Y，et al．Inhibition of metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1 in CaSki human cervical cancer cells suppresses cell proliferation and invasion［J］．Acta Biochim Biophys Sin(Shanghai)，2010，42(3): 224-229．

［9］　Hu L，Wu Y，Tan D，et al．Up-regulation of long noncoding RNA MALAT1 contributes to proliferation and metastasis in esophageal squamous cell carcinoma［J］．J Exp Clin Cancer Res，2015，34: 7．

［10］Pasmant E，Laurendeau I，Heron D，et al．Characterization of a germ-line deletion，including the entire INK4/ ARF locus，in a melanoma-neural system tumor family: identification of ANRIL，an antisense noncoding RNA whose expression coclusters with ARF［J］．Cancer Res，2007，67(8): 3963-3969．

［11］Kotake Y，Nakagawa T，Kitagawa K，et al．Long noncoding RNA ANRIL is required for the PRC2 recruitment to and silencing of p15 INK4Btumor suppressor gene［J］．Oncogene，2011，30(16): 1956-1962．

［12］Zhang EB，Kong R，Yin DD，et al．Long noncoding RNA ANRIL indicates a poor prognosis of gastric cancer and promotes tumor growth by epigenetically silencing of miR-99a/miR-449a［J］．Oncotarget，2014，5(8): 2276-2292．

［13］Nie FQ，Sun M，Yang JS，et al．Long noncoding RNA ANRIL promotes non-small cell lung cancer cell proliferation and inhibits apoptosis by silencing KLF2 and P21 expression［J］．Mol Cancer Ther，2015，14(1): 268-277．

［14］Shen P，Sun J，Xu G，et al．KLF9，a transcription factor induced in flutamide-caused cell apoptosis，inhibits AKT activation and suppresses tumor growth of prostate cancer cells［J］．Prostate，2014，74(9): 946-958．

［15］Fu X，Ravindranath L，Tran N，et al．Regulation of apoptosis by a prostate-specific and prostate cancer-associated noncoding gene，PCGEM1［J］．DNA Cell Biol，2006，25(3): 135-141．

［16］Ifere GO，Barr E，Equan A，et al．Differential effects of cholesterol and phytosterols on cell proliferation，apoptosis and expression of a prostate specific gene in prostate cancer cell lines［J］．Cancer Detect Prev，2009，32(4): 319-328．

［17］He JH，Zhang JZ，Han ZP，et al．Reciprocal regulation of PCGEM1 and miR-145 promote proliferation of LNCaP prostate cancer cells［J］．J Exp Clin Cancer Res，2014，33: 72．

［18］Rinn JL，Kertesz M，Wang JK，et al．Functional demarcation of active and silent chromatin domains in human HOX loci by noncoding RNAs［J］．Cell，2007，129(7): 1311-1323．

［19］Gupta RA，Shah N，Wang KC，et al．Long non-coding RNA HOTAIR reprograms chromatin state to promote cancer metastasis［J］．Nature，2010，464(7291): 1071-1076．

［20］Wu Y，Liu J，Zheng Y，et al．Suppressed expression of long non-coding RNA HOTAIR inhibits proliferation and tumourigenicity of renal carcinoma cells［J］．Tumour Biol，2014，35(12): 11887-11894．

［21］Lee NK，Lee JH，Park CH，et al．Long non-coding RNA HOTAIR promotes carcinogenesis and invasion of gastric adenocarcinoma［J］．Biochem Biophys Res Commun，2014，451(2): 171-178．

［22］Huarte M，Guttman M，F(xiàn)eldser D，et al．A large intergenic noncoding RNA induced by p53 mediates global gene repression in the p53 response［J］．Cell，2010，142(3): 409-419．

［23］Wu G，Cai J，Han Y，et al．LincRNA-p21 regulates neointima formation，vascular smooth muscle cell proliferation，apoptosis，and atherosclerosis by enhancing p53 activity［J］．Circulation，2014，130(17): 1452-1465．

［24］Sakaguchi K，Herrera JE，Saito S，et al．DNA damage activates p53 through a phosphorylation-acetylation cascade ［J］．Genes Dev，1998，12(18): 2831-2841．

［25］Mourtada-Maarabouni M，Hasan AM，F(xiàn)arzaneh F，et al．Inhibition of human T-cell proliferation by mammalian target of rapamycin(mTOR)antagonists requires noncoding RNA growth-arrest-specific transcript 5(GAS5)［J］．Mol Pharmacol，2010，78(1): 19-28．

［26］Kino T，Hurt DE，Ichijo T，et al．Noncoding RNA gas5 isa growth arrest- and starvation-associated repressor of the glucocorticoid receptor［J］．Sci Signal，2010，3(107): ra8．

［27］Shi X，Sun M，Liu H，et al．A critical role for the long non-coding RNA GAS5 in proliferation and apoptosis in non-small-cell lung cancer［J］．Mol Carcinog，2015，54(Suppl 1): E1-E12．

［28］Sun M，Jin FY，Xia R，et al．Decreased expression of long noncoding RNA GAS5 indicates a poor prognosis and promotes cell proliferation in gastric cancer［J］．BMC Cancer，2014，14: 319．

［29］Zhang Z，Zhu Z，Watabe K，et al．Negative regulation of lncRNA GAS5 by miR-21［J］．Cell Death Differ，2013，20(11): 1558-1568．

［30］Ying L，Huang Y，Chen H，et al．Downregulated MEG3 activates autophagy and increases cell proliferation in bladder cancer［J］．Mol Biosyst，2013，9(3): 407-411．

［31］Zhang X，Rice K，Wang Y，et al．Maternally expressed gene 3(MEG3)noncoding ribonucleic acid: isoform structure，expression，and functions［J］．Endocrinology，2010，151(3): 939-947．

［32］Zhao Y，Guo Q，Chen J，et al．Role of long non-coding RNA HULC in cell proliferation，apoptosis and tumor metastasis of gastric cancer: a clinical and in vitro investigation［J］．Oncol Rep，2014，31(1): 358-364．

［33］Ge D，Han L，Huang S，et al．Identification of a novel MTOR activator and discovery of a competing endogenous RNA regulating autophagy in vascular endothelial cells ［J］．Autophagy，2014，10(6): 957-971．

［34］Lu W，Han L，Su L，et al．A 3’UTR-associated RNA，F(xiàn)LJ11812 maintains stemness of human embryonic stem cells by targeting miR-4459［J］．Stem Cells Dev，2015，24(9): 1133-1140．

［35］Chen CL，Tseng YW，Wu JC，et al．Suppression of hepatocellular carcinoma by baculovirus-mediated expression of long non-coding RNA PTENP1 and microRNA regulation ［J］．Biomaterials，2015，44: 71-81．

［36］Fullgrabe J，Klionsky DJ，Joseph B．The return of the nucleus: transcriptional and epigenetic control of autophagy ［J］．Nat Rev Mol Cell Biol，2014，15(1): 65-74．

［37］Liu B，Wen X，Cheng Y．Survival or death: disequilibrating the oncogenic and tumor suppressive autophagy in cancer［J］．Cell Death Dis，2013，4: e892．

［38］Wang Y，Guo Q，Zhao Y，et al．BRAF-activated long non-coding RNA contributes to cell proliferation and activates autophagy in papillary thyroid carcinoma［J］．Oncol Lett，2014，8(5): 1947-1952．

(責(zé)任編輯:陳妙玲，羅　森)