淫羊藿苷在腫瘤細(xì)胞抑制方面的研究進(jìn)展

王 雨 李亦婕 王 越 劉 昕 李 萍*

（貴州省遵義市遵義醫(yī)學(xué)院附屬口腔醫(yī)院，貴州 遵義 563003）

淫羊藿苷在腫瘤細(xì)胞抑制方面的研究進(jìn)展

王 雨 李亦婕 王 越 劉 昕 李 萍*

（貴州省遵義市遵義醫(yī)學(xué)院附屬口腔醫(yī)院，貴州 遵義 563003）

中草藥相比較于化學(xué)療法治療腫瘤有著獨特的優(yōu)勢，它的不良反應(yīng)小，而且價格也比化療藥物便宜。淫羊藿苷是從淫羊藿屬植物莖葉中提取的總黃酮的有效成分，國內(nèi)外有關(guān)于它的抗瘤報告非常多，確實也發(fā)現(xiàn)其有抑制腫瘤細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡和分化的功效，但大多還停留在體外實驗階段。淫羊藿苷作為一種新型的抗瘤藥物具有廣遠(yuǎn)的應(yīng)用前景，所以還期待更多的體內(nèi)和臨床實驗的開展。

淫羊藿苷；腫瘤抑制；研究現(xiàn)狀

淫羊藿是由小檗科淫羊藿屬植物曬干的莖葉中提煉的一種中草藥，黃體酮是它其中主要的化學(xué)成分之一，而黃酮類的有效成分主要是淫羊藿苷（icariin，ICA），其一般呈淡黃色，以粉末的形式存在。有報道其對于壯陽補腎、改善心血管系統(tǒng)功能、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌、增強免疫、抗腫瘤等均有療效，其中對于抗腫瘤的作用受到國內(nèi)外眾多學(xué)者的重視，關(guān)于其抗腫瘤的藥理機(jī)制主要表現(xiàn)在抑制腫瘤細(xì)胞增殖、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化、抑制腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移、逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞免疫逃逸等方面?，F(xiàn)就國內(nèi)外有關(guān)其抗腫瘤機(jī)制的研究作一綜述。

1 對肺癌的作用

肺癌是發(fā)病率和病死率增長最快，對人群健康和生命威脅最大的惡性腫瘤之一。肺癌的發(fā)病機(jī)制至今仍不完全明確，因此，盡快弄清肺癌的發(fā)病機(jī)制并且研究出一種新藥去克服肺癌是我們所有醫(yī)學(xué)研究人員應(yīng)盡的職責(zé)。早在2004年我國的研究人員薛興奎等[1]就利用MTT法，采用同一濃度的ICA處理肺癌細(xì)胞，在不同的時間點檢測細(xì)胞的增殖抑制率，結(jié)果發(fā)現(xiàn)與對照組細(xì)胞相比較，ICA作用細(xì)胞24 h后細(xì)胞增殖抑制率隨著時間的延長而逐漸增強。流式檢測ICA用藥實驗組和對照組細(xì)胞表面Fas、FasL分子的表達(dá)情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)200 μg/mL ICA處理72 h后，PG細(xì)胞表面Fas抗原表達(dá)率較對照組明顯升高而Fasl降低。MTT法檢測ICA對CD3AK細(xì)胞殺傷PG細(xì)胞作用的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)ICA可以顯著提高CD3AK細(xì)胞對PG細(xì)胞的殺傷活性。流式細(xì)胞儀觀察細(xì)胞凋亡，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，PG細(xì)胞和JurkatT細(xì)胞共同培養(yǎng)時，ICA處理組的T細(xì)胞凋亡率較對照組有所降低。結(jié)合上述實驗數(shù)據(jù)，作者分析PG細(xì)胞表面FasL呈較高表達(dá)，F(xiàn)as表達(dá)較低，而Jurkat細(xì)胞高表達(dá)Fas，和活化后的T淋巴細(xì)胞相似，而且它的FasL呈低表達(dá)，在采用PG細(xì)胞與Jurkat T細(xì)胞共培養(yǎng)中發(fā)現(xiàn)PG細(xì)胞能夠誘導(dǎo)Jurkat T細(xì)凋亡。所以作者推測PG細(xì)胞表面的FasL可能與JurkatT細(xì)胞表面的Fas結(jié)合，通過Fas/FasL途徑誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞凋亡來逃避免疫系統(tǒng)的攻擊。ICA可有效上調(diào)PG細(xì)胞Fas的表達(dá)，下調(diào)FasL的表達(dá)。在PG細(xì)胞與Jurkat T細(xì)胞的共培養(yǎng)中發(fā)現(xiàn)，ICA處理的T淋巴細(xì)胞凋亡率有下降，表明ICA在一定程度上阻斷了PG細(xì)胞對T淋巴細(xì)胞通過Fas/FasL途徑的攻擊，其機(jī)制與上調(diào)Fas、下調(diào)FasL表達(dá)有關(guān)。另外作者用流式細(xì)胞儀檢測了用IL-2和CD3單抗誘導(dǎo)培養(yǎng)第5天的CD3AK細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)CD3AK細(xì)胞既表達(dá)Fas，也表達(dá)FasL，又因為ICA有下調(diào)PG細(xì)胞FasL表達(dá)、上調(diào)Fas表達(dá)的功能，所以作者認(rèn)為對Fas/FasL途徑的調(diào)節(jié)也可能是ICA提高PG細(xì)胞對CD3AK細(xì)胞的殺傷敏感性的機(jī)制之一。但腫瘤免疫逃逸的機(jī)制較多而且又復(fù)雜，腫瘤細(xì)胞是怎樣表達(dá)無功能的Fasl，得以逃避活化T淋巴細(xì)胞的攻擊，在體內(nèi)腫瘤細(xì)胞和免疫細(xì)胞是如何相互作用的，還需要進(jìn)一步研究。

2 對胃癌的作用

胃癌是常見的消化道惡性腫瘤，具有起病隱匿、發(fā)展迅速、病死率高的特點，往往經(jīng)發(fā)現(xiàn)已經(jīng)處于中晚期，失去了手術(shù)根治的機(jī)會，只能依靠術(shù)前的放化療來縮小病灶，爭取手術(shù)機(jī)會[2]。因此早日弄清胃癌發(fā)病和侵襲轉(zhuǎn)移的內(nèi)在機(jī)制并且對此研究出相應(yīng)的藥物迫在眉睫。因為癌細(xì)胞不同于正常的細(xì)胞，它的生長分裂不受相關(guān)生長因子的調(diào)控，而是呈現(xiàn)無限制的增殖，因此抑制胃癌細(xì)胞的無限增殖對于治療胃癌具有重要的意義。我國的相關(guān)人員段文飛等[3]利用MTT和流式（PI法）測得實驗組與對照組比較，低、中、高濃度組均對SGC-7901細(xì)胞有抑制作用，且呈一定的量效、時效關(guān)系。ICA使胃癌細(xì)胞G0/G1期的比例明顯升高，G2/M期細(xì)胞比例減少，由此使得處于分裂期的細(xì)胞進(jìn)入靜止期，也許ICA就是通過改變癌細(xì)胞的分裂周期來抑制癌細(xì)胞的增殖，但這僅僅是從細(xì)胞水平分析的，但I(xiàn)CA在分子和基因水平是怎樣改變癌細(xì)胞的分裂周期和抑制癌細(xì)胞的增殖還需要進(jìn)一步的研究。

3 對肝癌的作用

肝癌在我國乃至全世界都是比較常見的惡性腫瘤之一，而且因為其具有傳染性，肝病患者常常被社會孤立和歧視，所以研究出一種專門針對肝癌并且能治愈肝癌的新藥尤為重要，2012年我國的相關(guān)研究人員朱燕輝等[4]用不同濃度的淫羊藿苷處理SMMC-7721細(xì)胞株后，在不同時間點檢測各組細(xì)胞的增殖抑制率，與對照組細(xì)胞相比較，各濃度的淫羊藿苷均能明顯抑制SMMC-7721細(xì)胞的增殖，并呈明顯的時間與濃度依賴性。既然ICA能夠抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，但它又是怎么抑制腫瘤的增殖以及其中的內(nèi)在機(jī)制是什么呢？所以作者又用不同濃度淫羊藿苷作用SMMC-7721細(xì)胞48 h后，再用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期及凋亡情況，結(jié)果顯示淫羊藿苷能夠呈濃度依賴性的使得SMMC-7721細(xì)胞S期和G2/M減少，G0/G1增多，從而促進(jìn)凋亡。所以作者認(rèn)為ICA能夠阻滯腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞周期的進(jìn)展，從而促進(jìn)細(xì)胞的凋亡可能是其抑制腫瘤細(xì)胞增殖的一個重要原因。但I(xiàn)CA在分子和基因水平是怎樣改變腫瘤細(xì)胞周期和促進(jìn)它的凋亡呢？PCNA是伴隨細(xì)胞增殖而表達(dá)的一種核內(nèi)蛋白，所以測定該因子在肝癌細(xì)胞中的表達(dá)情況就可以初步推測ICA阻滯腫瘤細(xì)胞周期進(jìn)展的內(nèi)在機(jī)制。細(xì)胞凋亡是一種由基因控制的細(xì)胞自主性死亡方式[5]，上述實驗證實ICA能夠有效促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡，可能有些凋亡相關(guān)因子的參與，Bax是Bcl-2家族中研究最廣泛的促凋亡蛋白[6]，所以該作者又進(jìn)行了Western blot實驗發(fā)現(xiàn)不同濃度的ICA作用肝癌細(xì)胞48 h后，SMMC-7721細(xì)胞PCNA的蛋白表達(dá)水平隨著ICA濃度的增加而逐漸下降，同時隨著ICA濃度的增高，Bcl-2的表達(dá)逐漸降低，而Bax表達(dá)逐漸增高，呈顯著的濃度依賴性。結(jié)合以上所述，所以作者認(rèn)為ICA可能是通過下調(diào)PCNA蛋白的表達(dá)使S期細(xì)胞減少，G0/G1細(xì)胞增加，而且Bcl-2蛋白表達(dá)下調(diào)，Bax蛋白表達(dá)上調(diào)，增大Bax/Bcl-2的比值，可能共同參與了凋亡途徑，促使SMMC-7721凋亡。

4 對其他腫瘤的抑制作用。

4.1 對宮頸癌的作用。宮頸癌是最常見的婦科惡性腫瘤，近年來其發(fā)病有年輕化的趨勢，因此弄清宮頸癌的發(fā)病機(jī)制和研究出一種科學(xué)的針對宮頸癌的新藥是廣大醫(yī)藥工作者的責(zé)任。2011年我國的相關(guān)領(lǐng)域的研究人員杜道兵等[7]體外實驗利用MTT法檢測淫羊藿苷對宮頸癌TC-1細(xì)胞的增殖抑制作用，結(jié)果顯示ICA對TC-1具有明顯的增殖抑制，而且呈現(xiàn)劑量、時間依賴性。同時該作者還進(jìn)行了Dapi核染色和PI流式檢測，結(jié)果顯示淫羊藿苷作用細(xì)胞后鏡下呈現(xiàn)明顯的細(xì)胞凋亡特征，所以作者認(rèn)為ICA具有抑制宮頸癌細(xì)胞增殖和促進(jìn)該癌細(xì)胞凋亡的作用。雖然本實驗僅僅只是從細(xì)胞水平分析ICA的抗腫瘤作用，但此實驗為進(jìn)一步實驗研究ICA在分子和基因水平的抑瘤機(jī)制墊定了一定的基礎(chǔ)。

4.2 對前列腺癌的作用。植物雌激素具有治療前列腺癌的療效[8]，淫羊藿苷具有雌二醇相似的結(jié)構(gòu)，具有植物雌激素樣作用，對前列腺癌細(xì)胞也表現(xiàn)出增殖抑制的作用。HUANG等比較了ICA和ICT對前列腺癌細(xì)胞的作用，結(jié)果顯示ICA對前列腺癌細(xì)胞的抑制作用強于ICT[9]。

5 結(jié) 語

淫羊藿苷是一種具有很大應(yīng)用前景的抗癌藥物，因為其本身是植物提取物，屬于中草藥類，相比較西藥的抗癌作用，它的不良反應(yīng)非常小，但目前關(guān)于其抑瘤作用的研究還停留在體外研究和很少的動物體內(nèi)研究，雖然取得了一些很好的結(jié)果，也摸索出了其中的一些機(jī)制和相關(guān)的作用因子，但最終能否應(yīng)用于人體且產(chǎn)生抑瘤作用，才是鑒證藥物價值的最終標(biāo)準(zhǔn)，所以希望今后會有更多的更深入的實驗和體內(nèi)研究的開展，最終研究出一種針對癌癥且能治愈癌癥的新藥。

[1]薛興奎,張玲,王蕓.ICA、PJA逆轉(zhuǎn)人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞Fas/FasL途徑免疫逃逸機(jī)制的研究[J].中國免疫學(xué)雜志,2004,20(2):102-105.

[2]Ajani JA,Mansfied PE,Janjan N,et al.Mulleins titutional trial of preoperative chemoradiotherapy in patients with potentially respectable gastric carcinoma[J].J Clin Oncol,2004,22(14):2774-2780.

[3]段文飛,蘇繼榮,付小梅.淫羊藿苷對胃癌細(xì)胞株SGC-7901增殖的影響[J].中國醫(yī)藥指南,2009,7(24):17-19.

[4]朱燕輝,黃麗霞.淫羊藿苷對肝癌細(xì)胞株SMMC-7721增殖與凋亡的影響[J].中國普通外科雜志,2012,21(8):968-972.

[5]Karam JA,Lotan Y,Karakiewicz PI,et al.Use of combinedapoptosis biomarkers for prediction of bladder cancer recurrenceand mortality after radical cystectomy[J].Lancet Oncol,2007,8(2):128-136.

[6]Oltvai ZN,Milliman CL,Korsmeyer SJ.Bcl-2 heterodimerizes invivo with a conserved homolog,Bax,that accelerates programmedcell death [J].Cell,1993,74(4):609-619.

[7]杜道兵,盧萬根,曹叢仁.淫羊藿苷促進(jìn)宮頸癌TC-1細(xì)胞凋亡作用的研究[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2011,11(4):646-649.

[8]劉海平,左文述,李會慶.植物雌激素與前列腺癌[J].腫瘤防治雜志,2003,10(3):325-328.

[9]Huang X,Zhu DY,Lou YJ.A novel anticancer agent,icaritin,induced cellgrowth inhibition,g1 arrest and mitochondrial transmembrane potential drop in huaman prostate carcinoma PC-3 cells[J].Eur J Pharmacol,2007,564(1):26-36.

R730.5

A

1671-8194（2015）04-0050-02

遵研創(chuàng)合字（編號：cx201313）

*通訊作者：E-mail： 391613734@qq.com