豬圓環(huán)病毒病的危害及其防控

徐逸飛，劉 櫻，邱春霞，覃娟娟，張洋瑞，付洪波，吳成龍，陳 榮，吳開(kāi)波

（1.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物生物技術(shù)中心；四川 雅安 625014；

2.武漢科前動(dòng)物生物制品有限責(zé)任公司西南區(qū)團(tuán)隊(duì)，湖北 武漢 430070）

豬圓環(huán)病毒病的危害及其防控

徐逸飛1，劉 櫻1，邱春霞1，覃娟娟1，張洋瑞1，付洪波2，吳成龍2，陳 榮2，吳開(kāi)波2

（1.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物生物技術(shù)中心；四川 雅安 625014；

2.武漢科前動(dòng)物生物制品有限責(zé)任公司西南區(qū)團(tuán)隊(duì)，湖北 武漢 430070）

豬圓環(huán)病毒病是豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)引起豬的一系列疾病的總稱。豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)主要通過(guò)感染豬的淋巴細(xì)胞導(dǎo)致嚴(yán)重的免疫抑制，從而易繼發(fā)或并發(fā)其他傳染病。PCV2是危害養(yǎng)豬業(yè)的重要病原，受到國(guó)內(nèi)外學(xué)者的高度重視。通過(guò)對(duì)目前豬圓環(huán)病毒病對(duì)臨床生產(chǎn)的危害進(jìn)行綜述，并提出一些防控措施。

豬圓環(huán)病毒病；危害；防控

豬圓環(huán)病毒病主要包括斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征(PMWS)、豬皮炎腎炎綜合征(PDNS)、仔豬先天性震顫(CT)、增生性壞死性肺炎(PNP)、豬呼吸道疾病綜合征（PRDC）、生殖系統(tǒng)紊亂、腸炎等多種疾病。其臨床特征多種多樣，主要表現(xiàn)為體質(zhì)下降、進(jìn)行性消瘦、生長(zhǎng)發(fā)育不良、呼吸困難、貧血、黃疸、腹瀉、母豬繁殖障礙、內(nèi)臟器官及皮膚的廣泛病理變化，特別是腎、脾臟及全身淋巴結(jié)的高度腫大、出血和壞死。該病毒還可和其他病毒協(xié)同感染，大大增加了動(dòng)物的發(fā)病率及死亡率，給全世界生豬生產(chǎn)大國(guó)造成嚴(yán)重的危害，成為阻礙當(dāng)今養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展的重要病原之一。

1??圓環(huán)病毒簡(jiǎn)介

豬圓環(huán)病毒(PCV)于1974年首次由德國(guó)學(xué)者TischerI等從多株連續(xù)傳代的豬腎細(xì)胞系(PK-15)中分離得到，并在1982年獲得命名。豬圓環(huán)病毒屬于圓環(huán)病毒科圓環(huán)病毒屬，病毒粒子無(wú)囊膜，核酸為單鏈、負(fù)股環(huán)狀DNA，大小約1.76 kb，是迄今發(fā)現(xiàn)的最小的動(dòng)物病毒。根據(jù)PCV致病性、抗原性及核苷酸序列的差異，分為無(wú)致病性的1型(PCV1)和有致病性的2型(PCV2)。最新的研究結(jié)果把PCV2分為PCV2a、PCV2b、PCV2c、PCV2d和 PCV2e等5種基因型亞群，其中PCV2a和 PCV2b是主要類型，PCV2c僅在丹麥發(fā)現(xiàn)。PCV2b在當(dāng)前自然感染中流行，被認(rèn)為具有較強(qiáng)的致病性。研究發(fā)現(xiàn)，PCV1和PCV2均含有11個(gè)開(kāi)放閱讀框(open read frames，ORFs)，有兩個(gè)主要的即ORF1和ORF2。ORF1編碼復(fù)制酶相關(guān)的rep蛋白及其剪切產(chǎn)物rep’蛋白，該蛋白氨基酸序列相當(dāng)保守，是PCV1與PCV2產(chǎn)生抗原交叉性的主要部位；ORF2編碼233或234個(gè)病毒的核衣殼蛋白氨基酸(Cap)，可在病毒復(fù)制過(guò)程中參與轉(zhuǎn)位到細(xì)胞核中的病毒基因組，構(gòu)成病毒核衣殼，是病毒主要結(jié)構(gòu)蛋白和免疫保護(hù)性蛋白，具有良好的免疫原性，能夠刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性的免疫保護(hù)抗體反應(yīng)。

2??圓環(huán)病毒病的危害及臨床癥狀

2．1 免疫抑制

圓環(huán)病毒病是一種常見(jiàn)的免疫抑制性疾病。豬群感染PCV2后，侵害機(jī)體的免疫器官，誘發(fā)細(xì)胞凋亡，尤其淋巴系統(tǒng)受到的損傷最大，因而使免疫系統(tǒng)功能低下或喪失，導(dǎo)致豬體免疫力低下，同時(shí)影響疫苗的免疫保護(hù)效果。當(dāng)前圓環(huán)病毒感染引起的免疫抑制是豬場(chǎng)控制疾病最棘手的問(wèn)題之一。

2．2 PCV2亞臨床感染

PCV2能夠使感染豬免疫功能受到損害，導(dǎo)致機(jī)體免疫抑制的病毒經(jīng)常以亞臨床感染的形式出現(xiàn)，常易被忽視。在血清學(xué)研究的基礎(chǔ)上，PCV2感染在世界各地是無(wú)處不在的，然而臨床疾病的患病率要低得多。PCV2感染的一個(gè)更微妙的表現(xiàn)是生長(zhǎng)緩慢，主要表現(xiàn)在看起來(lái)健康的豬群。

2．3 斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征

PMWS可見(jiàn)于5～16周齡的豬，最常見(jiàn)于6～8周齡的斷奶豬群。主要表現(xiàn)為消瘦、呼吸困難、淋巴結(jié)腫大、腹瀉、皮毛蒼白、黃疽，還兼有咳嗽、發(fā)熱、生長(zhǎng)遲緩等癥狀。PMWS主要的剖檢病變是全身淋巴結(jié)腫大，特別是腹股溝淋巴結(jié)、腸系膜淋巴結(jié)、氣管支氣管淋巴結(jié)、下頜淋巴結(jié)及髂下淋巴結(jié)腫大，且硬度增大，均勻的蒼白色，同時(shí)兼有水腫。另有不同程度的肌肉萎縮。肺腫脹、堅(jiān)硬或似橡皮，某些病例肺表面有灰褐色斑塊，嚴(yán)重時(shí)表現(xiàn)為肺泡出血，顏色變深，間葉和心葉萎縮或?qū)嵶?。脾臟腫大，肝臟顏色變暗，肝小葉間結(jié)締組織增生。腎臟水腫，蒼白，被膜下有白色點(diǎn)狀或塊狀壞死。心包膜內(nèi)有大量炎性滲出物，心臟冠狀溝常見(jiàn)膠凍樣物質(zhì)，心肌衰竭。以上病變通常難在同1頭感染豬身上全部見(jiàn)到，感染豬可能在某一個(gè)器官系統(tǒng)出現(xiàn)病變，而在其他器官不出現(xiàn)病變。

2．4 豬皮炎腎病綜合征

PDNS是一種以系統(tǒng)性血管炎為特征的主要侵害機(jī)體皮膚和腎臟的一種傳染病。PDNS主要發(fā)生在保育豬及育肥豬，通常發(fā)生于8～18周齡的豬。在世界各地都有關(guān)于該病的報(bào)道。受PDNS影響的豬主要臨床癥狀是厭食癥和抑郁，很少或根本沒(méi)有發(fā)熱。他們可能是匍匐在地，不愿移動(dòng)，和/或顯示僵硬步態(tài)。該病最主要的特征是在患豬皮膚表面出現(xiàn)圓形或不規(guī)則的紅色或紫色斑點(diǎn)，主要存在于后肢和會(huì)陰區(qū)，有時(shí)甚至全身性分布，隨著時(shí)間的推移，隨后體重增加，病變成暗結(jié)殼覆蓋，皮損逐漸褪色，有時(shí)會(huì)留下疤痕。剖檢可見(jiàn)腎臟腫大、蒼白，被膜下有白色壞死斑。該癥狀源于皮膚發(fā)生系統(tǒng)性的壞死性血管炎及腎臟出現(xiàn)纖維蛋白壞死性腎小球性腎炎。 綜合征的患病率通常是在1%以下，死亡率卻達(dá)到100% ，嚴(yán)重受影響的豬發(fā)病后在幾天內(nèi)死亡。幸存的豬往往綜合征開(kāi)始后7～10 d恢復(fù)。

2．5 種豬繁殖障礙

PCV2相關(guān)性繁殖障礙(PCV2-RD)主要表現(xiàn)為感染母豬發(fā)生流產(chǎn)、死胎、木乃伊胎增加、新生仔豬死亡及斷奶后仔豬死亡率增加，與感染豬細(xì)小病毒的癥狀類似。PCV2相關(guān)性繁殖障礙主要發(fā)生在母豬，PCV2可通過(guò)母體垂直傳播給仔豬，也可經(jīng)公豬精液傳播。

2．6 育肥豬的豬呼吸道綜合征

豬呼吸道綜合征(PRDC)發(fā)生于16～22周齡的生長(zhǎng)育肥豬，其臨床癥狀主要表現(xiàn)為生長(zhǎng)緩慢、嗜睡、厭食、發(fā)熱、咳嗽以及呼吸困難等。PRDC是通常是由PCV2、PRRSV、SIV、豬肺炎支原體及多殺性巴氏桿菌等多種呼吸道病原混合感染引起的。PCV2參與導(dǎo)致的PRDC非常頑固，用藥無(wú)效，嚴(yán)重影響飼料利用率，在規(guī)?；i場(chǎng)中普遍存在。

2．7 仔豬先天性震顫

CT俗稱“仔豬抖抖病”，是指剛出生仔豬由于脊髓水平以上的中樞神經(jīng)系統(tǒng)髓鞘形成阻滯，出現(xiàn)的局部或全身肌肉陣發(fā)性攣縮的一種疾病。該病無(wú)有效的治療措施，大部分發(fā)病仔豬以死亡轉(zhuǎn)歸或淘汰處理，給養(yǎng)豬生產(chǎn)造成較大的經(jīng)濟(jì)損失。仔豬先天性震顫一年四季均可發(fā)病，表現(xiàn)為階段性和零星發(fā)生，發(fā)病率為1.4%～35.0%。經(jīng)產(chǎn)母豬和初產(chǎn)母豬所生的仔豬均可發(fā)病，經(jīng)產(chǎn)母豬的仔豬比較常見(jiàn)。發(fā)病仔豬的病理變化以淋巴結(jié)呈暗褐色、周邊出血及腎皮質(zhì)出血為主要特征。

2．8 新型綜合征

最近，一種新型綜合征已被描述，被稱為急性肺水腫(APE)，它出現(xiàn)在接種疫苗的豬群中。與先前描述的綜合征相比，表現(xiàn)得更緩慢和漸進(jìn)。主要受影響的是仔豬和育肥豬，死亡率接近20%，在一些受影響的群體，臨床癥狀是急性呼吸窘迫，然后幾乎立即死亡，事實(shí)上，經(jīng)常發(fā)現(xiàn)豬死之前沒(méi)有顯示疾病體征跡象。唯一一致的是在病死組織中檢測(cè)出PCV2。該病毒不僅造成仔豬的生長(zhǎng)緩慢，同時(shí)還侵害豬的免疫系統(tǒng)。導(dǎo)致豬的免疫機(jī)能下降，引起機(jī)體的免疫抑制，給世界養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。推測(cè)這種情況的一個(gè)可能的發(fā)病機(jī)制。大量病毒在幼豬單核細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞中復(fù)制，這可能是肺部血管內(nèi)壁更容易受到感染的原因，可以支持更高級(jí)別的復(fù)制。感染可能發(fā)生在幼豬接種之前，此段時(shí)間沒(méi)有達(dá)到母源抗體水平。

3??圓環(huán)病毒病的病理變化

組織學(xué)特征：感染豬出現(xiàn)亞急性或慢性肺炎病變，表現(xiàn)為肺部廣泛性的肉芽腫、多核巨細(xì)胞的形成及在炎性細(xì)胞和巨噬細(xì)胞中出現(xiàn)大量的嗜堿性胞漿內(nèi)包涵體。淋巴結(jié)和肺臟是PCV2的主要靶器官。主要表現(xiàn)為淋巴細(xì)胞減少，單核吞噬細(xì)胞浸潤(rùn)，最為顯著的特征是形成合胞體性多核巨細(xì)胞及細(xì)胞質(zhì)內(nèi)包涵體。肝臟常見(jiàn)門(mén)脈周?chē)馨图?xì)胞、組織細(xì)胞浸潤(rùn)，具有以竇狀隙內(nèi)單核炎性細(xì)胞集聚和肝細(xì)胞脫落為特征的肝炎病變。腎臟有不同程度的多灶性間質(zhì)性腎炎，主要在皮質(zhì)部發(fā)生淋巴細(xì)胞、組織細(xì)胞浸潤(rùn)。

4??PCV2的混合感染

單獨(dú)感染PCV2并不會(huì)引起嚴(yán)重的臨床癥狀。只有同豬繁殖與呼吸系統(tǒng)綜合征病毒(PRRSV)、偽狂犬(PRV)、豬瘟(CSFV)、豬細(xì)小病毒(PPV)等其中的一個(gè)或多個(gè)混合感染才能誘導(dǎo)產(chǎn)生典型的臨床癥狀。這些病原與PCV2混合感染會(huì)明顯促進(jìn)PCV2病毒的復(fù)制，從而增強(qiáng)PCV2的致病作用。多重感染已經(jīng)在規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)中普遍存在，由于多種病原的混合感染，嚴(yán)重加大對(duì)發(fā)病豬群的診斷和防控的難度，豬群死亡率升高。

5??圓環(huán)病毒病的診斷

由于混合感染非常嚴(yán)重，豬群發(fā)病后的臨床癥狀、病理變化日趨呈現(xiàn)復(fù)雜化，單憑現(xiàn)場(chǎng)的了解情況、觀察癥狀、剖檢病豬是很難作出確切診斷的，必須依據(jù)疫病流行的特點(diǎn)、癥狀觀察、病理檢驗(yàn)和實(shí)驗(yàn)室診斷的結(jié)果綜合判定。當(dāng)前要特別強(qiáng)調(diào)實(shí)驗(yàn)室病原的分離、鑒定、檢測(cè)、監(jiān)測(cè)，才能做出最后確診，這樣才能提出有針對(duì)性的防控措施。血清抗體檢查是生前診斷的一種手段，如用PCV2感染細(xì)胞為抗原進(jìn)行的間接熒光抗體法、免疫過(guò)氧化物酶單層培養(yǎng)法或ELISA法。

6??圓環(huán)病毒病的防控

圓環(huán)病毒病作為一種重大病毒性傳染病，沒(méi)有特效治療藥物，必須通過(guò)加強(qiáng)生物安全管理、飼養(yǎng)環(huán)境控制、增強(qiáng)豬群整體健康水平、疫苗免疫等措施進(jìn)行綜合防控。其中疫苗免疫是最關(guān)鍵的防控措施。

圓環(huán)病毒滅活疫苗和亞單位疫苗已在全世界廣泛應(yīng)用，病毒活載體疫苗和DNA疫苗也成為疫苗研究的熱點(diǎn)。PCV2滅活疫苗以其安全、穩(wěn)定、高效成為養(yǎng)豬生產(chǎn)中的常用疫苗。我國(guó)近年來(lái)圓環(huán)病毒滅活疫苗的研制方面取得了可喜的成績(jī)，陸續(xù)出現(xiàn)了一些高端高效產(chǎn)品。2012年之前，我國(guó)圓環(huán)病毒滅活疫苗的研制方面還存在技術(shù)難關(guān)，特別是病毒培養(yǎng)技術(shù)沒(méi)有得到突破，滅活前每毫升抗原含量最多只能達(dá)到106.0TCID50。當(dāng)時(shí)大量的臨床應(yīng)用實(shí)踐證明，在感染壓力大的豬場(chǎng)，仔豬需要免疫2次才能達(dá)到很好的免疫保護(hù)效果，免疫一次的豬場(chǎng)，疫苗產(chǎn)生的血清抗體水平有限，維持的時(shí)間較為短暫，達(dá)不到有效降低圓環(huán)病毒造成風(fēng)險(xiǎn)的目的。華中農(nóng)業(yè)大學(xué)何啟蓋教授從新加坡國(guó)立大學(xué)深造回國(guó)之后，一直專注于豬圓環(huán)病毒病的研究和疫苗抗原含量的技術(shù)攻關(guān)，并于2011年在國(guó)內(nèi)首個(gè)掌握了圓環(huán)病毒高密度培養(yǎng)技術(shù)，將圓環(huán)病毒疫苗滅活前抗原含量提高到107.0TCID50/mL以上，在業(yè)內(nèi)第一個(gè)推出了每毫升至少107.0TCID50的疫苗。該技術(shù)的突破是我國(guó)圓環(huán)病毒滅活疫苗研發(fā)史上的里程碑，為我國(guó)有效防控豬圓環(huán)病毒病奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。在此基礎(chǔ)上，經(jīng)過(guò)不斷地技術(shù)創(chuàng)新，成功探索出利用桿狀病毒表達(dá)圓環(huán)病毒免疫原性蛋白（ORF2蛋白）的方法，并將濃縮后的ORF2蛋白純化，加入到107.0TCID50/mL全病毒培養(yǎng)液中進(jìn)行滅活，制備成具有雙重成分的圓環(huán)病毒滅活疫苗（同時(shí)含有全病毒和ORF2蛋白），并授權(quán)武漢科前動(dòng)物生物制品有限責(zé)任公司利用該技術(shù)進(jìn)行疫苗生產(chǎn)。該疫苗推廣上市以來(lái)，在我國(guó)規(guī)?；i場(chǎng)中的應(yīng)用效果非常理想，該疫苗的影響力在業(yè)內(nèi)日漸強(qiáng)大。

（致謝：本論文受到四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院徐志文教授指導(dǎo)。）參考文獻(xiàn)略。

2014-10-12）

“四川省科技支撐計(jì)劃”（2014NZ0043）；

徐逸飛（1993-），男（漢），四川成都人，本科在讀，從事動(dòng)物醫(yī)學(xué)研究。