兒童急性白血病與TORCH和EB病毒感染

林 濤，陳煥輝，陳 翊，劉曉敏，鄺間玲，連廣琬,朱 冰

(廣州市婦女兒童醫(yī)療中心中心實(shí)驗(yàn)室，廣東 廣州 510120)

兒童急性白血病與TORCH和EB病毒感染

林 濤，陳煥輝，陳 翊，劉曉敏，鄺間玲，連廣琬,朱 冰

(廣州市婦女兒童醫(yī)療中心中心實(shí)驗(yàn)室，廣東 廣州 510120)

目的 了解兒童急性白血病(AL)患兒TORCH感染和EB病毒感染狀況。方法 選取經(jīng)骨髓細(xì)胞形態(tài)檢測(cè)確診的120例新發(fā)急性淋巴細(xì)胞性白血病(ALL)和50例急性髓細(xì)胞白血病(AML)患兒為研究對(duì)象，收集患兒血清TORCH、EB病毒免疫球蛋白M(IgM)抗體檢測(cè)結(jié)果，和患兒外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果，分白血病類型及年齡組與正常對(duì)照組進(jìn)行分析。結(jié)果 ALL患兒120例(70.59%)，AML患兒50例(29.41%)；AL患兒各年齡組患病比例：0～4歲組57.65%、5～9歲組30.00%、10～15歲組12.35%；ALL患兒巨細(xì)胞病毒(CMV)、風(fēng)疹病毒(RV)、弓形蟲(TOX)、單純皰疹病毒(HSV)、EB病毒的感染率分別為：2.50%、3.33%、1.67%、18.33%、6.67%；ALL患兒CMV、RV、TOX、HSV的感染率分別為：12.00%、8.00%、10.00%、32.00%、4.00%；AL患兒TORCH和EB病毒感染率均高于正常兒童對(duì)照組(χ2值分別為4.111、42.69、7.202、20.884、1.035，均P<0.05)?；純和瑫r(shí)存在一種或以上病原體感染、白血病患兒是否感染病原體與外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)高低無差異(均P>0.05)。結(jié)論 兒童白血病的預(yù)防要從母體懷孕前做起。

兒童；急性白血病；TORCH；EB病毒；感染

白血病是兒童最常見的惡性腫瘤之一，也是兒童期主要死亡原因[1-2]。其致病因素及發(fā)病機(jī)制至今尚未完全清楚。病毒感染與人類腫瘤有密切的關(guān)系，但對(duì)于病毒感染可導(dǎo)致兒童白血病存在爭(zhēng)議[3]。TORCH是一組可引起孕婦宮內(nèi)感染的微生物的總稱，包括巨細(xì)胞病毒(cytomegalo virus，CMV)、單純皰疹病毒(herpes simplex virus，HSV)、風(fēng)疹病毒(rebulla virus，RV)、弓形蟲(toxoplasma，TOX)。EB病毒(Epstein-Barr virus，EBV)系皰疹病毒科嗜淋巴病毒屬，EBV具有感染人和某些靈長(zhǎng)類動(dòng)物B細(xì)胞的專一性，并能使受感染細(xì)胞轉(zhuǎn)化，無限傳代到“永生”。為了了解病原體感染與兒童白血病的關(guān)系，本研究收集了170例新發(fā)確診兒童急性白血病(acute leukemia，AL)病例的病原體感染結(jié)果進(jìn)行分析，結(jié)果報(bào)告如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

選取2011年至2013年期間在廣州市婦女兒童醫(yī)療中心經(jīng)骨髓細(xì)胞形態(tài)檢測(cè)診斷，符合張之南血液病診治標(biāo)準(zhǔn)確診的AL病例。共選取120例新發(fā)急性淋巴細(xì)胞性白血病(acute lymphocytic leukemia，ALL)和50例急性髓細(xì)胞白血病(acute myeloid leukemia，AML)病例，患兒年齡最小10個(gè)月，最大15周歲。平均年齡4.91±2.98歲。將AL病例分為3個(gè)年齡組，分別是0～4歲組、5～9歲組和10～15歲組。正常兒童對(duì)照組在體檢兒童和擇期外科手術(shù)患兒中選取，年齡分布與病例組一致。其中TORCH正常兒童對(duì)照組857例，平均年齡4.09±4.09歲；EB病毒正常兒童對(duì)照組461例，平均年齡4.54±3.43歲。收集白血病患兒TORCH和EB病毒五類病原體血清IgM抗體數(shù)據(jù)和外周血常規(guī)白細(xì)胞計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)。

1.2 病原體抗體檢測(cè)方法

病原體抗體采用間接酶聯(lián)免疫吸附法，TORCH特異性抗體IgM使用美國(guó)TRINTI的檢測(cè)試劑盒，EB病毒抗體IgM使用德國(guó)歐盟的檢測(cè)試劑盒，實(shí)驗(yàn)過程嚴(yán)格按說明書操作，使用試劑盒配套質(zhì)控品。結(jié)果按樣品的吸光度值與標(biāo)準(zhǔn)品吸光度值的比值判斷，比值<0.91為陰性，比值>1.1為可陽(yáng)性。

1.3 外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)

采用SE2100血細(xì)胞分析儀檢測(cè)外周血白細(xì)胞(WBC)計(jì)數(shù)，WBC計(jì)數(shù)判斷標(biāo)準(zhǔn)為：白細(xì)胞減少(WBC<5×109/L) ；白細(xì)胞增高(WBC≥12×109/L)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。比率比較采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兒童急性白血病的臨床分型及兩類白血病性別與年齡的分布

170例中，ALL120例(70.59%)，AML50例(29.41%)。發(fā)病率比較，男性高于女性，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.781，P>0.05)，見表1?；疾”壤S年齡增長(zhǎng)有下降，0～4歲組兒童患病比例最高，各年齡組患病比率無差異(χ2=5.844，P>0.05)，見表2。

2.2 兒童急性白血病病原體感染情況

兩類AL患兒有不同比例的病原體感染，見表3；檢出有一種病原體感染者37例(21.76%)，其中CMV 2例，HSV 24例，RV 4例，TOXO 1例，EB病毒6例。兩種或以上病原體混合感染者16例(9.41%)，混合感染組合有：CMV+HSV 3例，CMV+RV 1例，CMV+EB病毒1例，HSV+TOX 5例，HSV+RV 2例，HSV+EB病毒2例，CMV+HSV+EB病毒1例，CMV+TOX+RV+HSV 1例。白血病組與正常對(duì)照組5類病原體感染率比較有差異(P<0.05)，見表4。

表1 不同性別ALL和AML發(fā)病率比較

Table 1 Comparison of morbidity of ALL and AML between different genders

表2 年齡與AL的發(fā)病分布

Table 2 Occurrence of AL among children in different age groups

注：*指TOUCH組857例；EB病毒組461例。

2.3 各年齡組病毒感染情況

CMV和EB病毒感染主要在0～4歲組；HSV感染主要在9歲以下各年齡；RV感染率在5～9歲組高于低年齡組；TOX在各年齡組均有感染，感染率與年齡成正比，見表5。

2.4 兩類白血病病例外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果

新發(fā)白血病患兒外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)大部分異常，兩類AL外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)以升高為主。其中ALL患兒外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)增高61例(51.1%)，其中感染病原體16例(26.2%)，平均白細(xì)胞97.85×109/L；白細(xì)胞計(jì)數(shù)降低31例(25.8%)，其中感染病原體12例(38.7%)，平均白細(xì)胞3.33×109/L；白細(xì)胞計(jì)數(shù)正常28例(23.3%)，其中感染病原體4例(14.3%)，平均白細(xì)胞7.68×109/L。AML患兒外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)增高30例(60.0%)，其中感染病原體12例(40.0%)，平均白細(xì)胞37.18×109/L；白細(xì)胞計(jì)數(shù)降低12例(24.0%)，其中感染病原體7例(53.8%)，平均白細(xì)胞2.70×109/L； 白細(xì)胞計(jì)數(shù)正常8例(16.0%)，其中感染病原體2例(25.0%)，平均白細(xì)胞9.04×109/L。兩類白血病患兒白細(xì)胞數(shù)量高低與患兒是否感染5類病原體比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)，見表6。

表6 兩組患兒白細(xì)胞情況比較

Table 6 Comparison of WBC between two groups

3 討論

3.1 170例新發(fā)白血病病例病原體感染現(xiàn)狀

本研究收集了170例確診新發(fā)AL患兒，其中ALL(120例，70.59%)高于兒童AML(50例，29.41%)；男性兒童患病比例高于女性兒童，性別比為2.4:1；高發(fā)年齡段在0～4歲(57.65%)，隨年齡的增長(zhǎng)，AL患兒發(fā)病比例下降，結(jié)果顯示與國(guó)內(nèi)外報(bào)道一致[4-5]，兩類AL患兒在各年齡組的發(fā)病比例無顯著性差異。

各類病原體感染特異性IgM抗體在疾病發(fā)作初期即升高，1～4周內(nèi)達(dá)到最高峰，由于IgM抗體早出現(xiàn)和相對(duì)較短的半衰期，因此可允許在急性感染期采用單個(gè)血清標(biāo)本作為診斷。本研究所顯示170例AL患兒五類病原體感染率均高于正常兒童對(duì)照組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。170例新發(fā)AL患兒均在確診發(fā)病期同時(shí)檢測(cè)五類病原體特異性IgM抗體和外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)，病原體IgM抗體作為相應(yīng)的病原體感染指標(biāo)。兩類AL均存在不同比例的病原體感染，HSV在兩類AL患兒中的陽(yáng)性率最高(22.35%)，共有38例感染，其他病原體的陽(yáng)性檢測(cè)率依次是：EB5.88%、CMV5.29%、RV4.71%、TOX4.12%；單獨(dú)感染HSV有24例，EB病毒6例，RV4例，CMV2例，TOX1例；并存在同時(shí)兩類以上病原體混合感染；CMV和TOX兩種病原體陽(yáng)性率在兩類AL患兒中比較有差異。各年齡組病原體感染除TOX外，主要發(fā)生在9歲以下各年齡。AL發(fā)病期，外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)以異常為主，主要是白細(xì)胞計(jì)數(shù)升高。

3.2 病原體感染與白血病的發(fā)生

感染一直被懷疑和癌癥密切相關(guān)，反復(fù)發(fā)生的炎癥作用和慢性感染會(huì)大大提高癌癥的發(fā)病率。人類T淋巴細(xì)胞白血病病毒I型(HTLV-1)與成人白血病發(fā)病的關(guān)系已得到證實(shí)[6]，由此亦引起學(xué)者們對(duì)病毒感染在兒童急性淋巴細(xì)胞白血病發(fā)病過程中作用的關(guān)注。Greaves(1988年)和Smith等(1997年)研究提出部分AL的發(fā)生起源于子宮內(nèi)感染，尤其是急性淋巴細(xì)胞白血病，由此可發(fā)現(xiàn)母親孕期的感染與其子女發(fā)生白血病有關(guān)，同時(shí)推測(cè)出生后的感染對(duì)白血病的發(fā)病是必需的條件。

TORCH相關(guān)病原體感染可使孕婦癥狀輕微或無明顯癥狀，卻可使胎兒受到不同程度的損害，導(dǎo)致出生后明顯或隱形的缺陷。HSV有1型和2型，l型多見于原發(fā)感染，主要引起頭面部皮膚、黏膜感染，2型多見于繼發(fā)性感染，主要感染生殖器和腰以下皮膚，以性接觸為主要傳播途徑，HSV主要經(jīng)產(chǎn)道上行感染胎兒。CMV是皰疹病毒科中基因組最大的一種，在全世界不同種族人群尤其在亞洲和非洲人群中血清抗體陽(yáng)性率可達(dá)90%～100%，CMV在人群中普遍易感，一般在童年獲得，免疫力正常者多為隱性感染，可終身攜帶病毒，感染無癥狀，孕期感染可導(dǎo)致新生兒明顯或遲發(fā)性的先天性不正常。TOX是一種雙孢子球蟲寄生蟲，人可從多種途徑感染，TOX感染可致的人畜共患的寄生蟲病，呈世界性分布。RV系披膜病毒科RV屬的惟一成員，其長(zhǎng)期存在于感染細(xì)胞內(nèi)，是造成先天性RV感染嚴(yán)重后果的重要原因，通常引起兒童或青少年不明顯或緩和的癥狀。EB病毒屬于皰疹病毒科γ 亞科，在人群中廣泛傳播，90%以上的成人血清EBV抗體陽(yáng)性[7]。6歲以下兒童原發(fā)性EB感染大多表現(xiàn)為無癥狀感染或僅表現(xiàn)為上呼吸道癥狀等非特異性表現(xiàn)。Lehtinen等(2003年)報(bào)道對(duì)芬蘭和冰島兩國(guó)550 000位母親進(jìn)行病例對(duì)照巢式隊(duì)列研究，檢測(cè)其巨細(xì)胞病毒、EB病毒、人類皰疹病毒6的抗體以及EB病毒的DNA，并對(duì)其后代追蹤15年，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，EBV IgG和IgM同時(shí)陽(yáng)性的母親，是ALL的危險(xiǎn)因素(OR=2.9，95%CI：1.5～5.8)，表明母親EBV感染與兒童白血病有關(guān)。另有文獻(xiàn)報(bào)道EBV病毒感染與單體染色體7相關(guān)，并致急性白血病預(yù)后較差[8]。盧愿等[9]研究所得結(jié)論ALL患兒EB病毒感染率高于正常對(duì)照組，與本研究結(jié)論相同。

3.3 建議

白血病發(fā)病前的臨床癥狀大部分是感染或貧血，且在診斷前幾周才出現(xiàn)臨床癥狀，本研究收集的病例是排除了因AL治療期間患兒免疫系統(tǒng)損傷，導(dǎo)致的繼發(fā)性病毒感染，但不排除發(fā)病前相關(guān)病原體的重復(fù)感染。本研究顯示AL患兒五類病原體感染除弓形蟲外均以低年齡組感染為主，患兒存在不同比例的TORCH相關(guān)病原體和EB病毒的單獨(dú)或混合感染，TORCH感染在急性髓系細(xì)胞白血病比率高于ALL，EB病毒感染率則相反。AL患兒是否感染五類病原體與白血病發(fā)病期的外周血白細(xì)胞數(shù)量并無相關(guān)。

白血病的發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜，本研究所做分析得出的結(jié)論在白血病患兒感染TORCH和EB病毒均高于對(duì)照組兒童，幼兒更易受病原體感染。從病毒感染方面預(yù)防白血病的發(fā)生除提高兒童抵抗外界病原體感染外，還要從母親懷孕前期就要關(guān)注。

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[專業(yè)責(zé)任編輯：潘凱麗]

Research on infection of TORCH and EBV in children with acute leukemia

LIN Tao, CHEN Huan-hui, CHEN Yi, LIU Xiao-min, KUANG Jian-ling, LIAN Guang-wan，ZHU Bing

(GuangzhouWomenandChildren’sMedicalCenter,GuangdongGuangzhou510120,China)

Objective To understand the infection with TORCH and EB virus in children with acute leukemia (AL). Methods Totally 120 newly-onset cases diagnosed with acute lymphocytic leukemia (ALL) confirmed by bone marrow cell morphology test were selected, and 50 cases of acute myeloid leukemia (AML) were recruited in the study. Serum specific immunoglobulin M (IgM) antibody was detected with ELISA for EB virus and TORCH (cytomegalo virus (CMV), herpes simplex virus (HSV), rubella virus (RV) and toxoplasma (TOXO)), and WBC of peripheral blood was tested for analysis in terms of AL type and age with normal control groups. Results There were 120 cases of ALL (70.59%) and 50 cases of AML (29.41%). Among cases of AL, 57.65% were children aged 0-4 years, 30.00% were children aged 5-9 years and 12.35% were children aged 10-15 years. The infection rate of CMV, RV, TOXO, HSV and EBV among ALL cases was 2.50%, 3.33%, 1.67%, 18.33% and 6.67%, respectively, while it was 12.00%, 8.00%, 10.00%, 32.00% and 4.00% among AML cases, respectively. Children were infected with one or more virus. Whether children with AL was infected was not correlated with peripheral WBC (bothP>0.05). The infection rates of TORCH and EB among AL cases were higher than those among normal controls (χ2value was 4.111, 42.69, 7.202, 20.884 and 1.035, respectively, allP<0.05), and the proportion of cases infected with TORCH and EB was different. Conclusion The preventive measures for AL should be taken before pregnancy.

children; acute leukemia (AL); TORCH; Epstein-Barr virus (EBV); infection

2014-11-13

林 濤(1974-)，女，主管技師，主要從事病毒學(xué)研究。

朱 冰，主任醫(yī)師。

10.3969/j.issn.1673-5293.2015.06.031

R725

A

1673-5293(2015)06-1207-04