■李許明 張蕉南 胡 兵
(福建天馬科技集團股份有限公司,福建福清 350308)
中華鱉(Pelodiscus sinensis),又名甲魚、團魚、水魚,是我國重要的淡水水產(chǎn)養(yǎng)殖品種之一,2012年我國中華鱉養(yǎng)殖總產(chǎn)量達33.14萬噸[1]。中華鱉屬于肉食性水產(chǎn)動物,對動物蛋白質(zhì)的要求較高,對植物蛋白質(zhì)的利用性較差[2],攝取高蛋白飼料后,代謝負擔(dān)增加,氨氮廢物排泄增多[3]。
酶制劑是一種或多種可以分解飼料營養(yǎng)分子鏈的生物活性物質(zhì)組成的微量添加劑[4]。目前,酶制劑在畜禽配合飼料中使用較為普遍,然而由于水產(chǎn)飼料加工的特殊性以及水產(chǎn)動物作為變溫動物的特性,導(dǎo)致酶制劑在水產(chǎn)飼料中的應(yīng)用尚不廣泛。研究表明,中性蛋白酶能夠補充水產(chǎn)動物內(nèi)源性中性蛋白酶的不足,提高蛋白質(zhì)的利用率[5-6]。此外,飼料中含有植物性原料存在抗營養(yǎng)因子、氨基酸平衡性比魚粉差、纖維素含量高等缺陷通常會影響魚類對植物蛋白的利用,表現(xiàn)為消化率下降和生長受阻,酶制劑能夠通過去除飼料中抗營養(yǎng)因子、促進魚類內(nèi)源消化酶分泌和直接補充消化道營養(yǎng)水解所需的酶等3個途徑提高魚類對飼料營養(yǎng)的消化利用率[7-9]。
本試驗以2007年通過了全國水產(chǎn)原種和良種審定委員會的審定,并經(jīng)農(nóng)業(yè)部公告的具有自主知識產(chǎn)權(quán)的國家級水產(chǎn)新品種——日本品系中華鱉(Pelodiscus sinensis)為試驗對象,探討3種酶制劑對其生長性能的影響,以期為酶制劑在中華鱉配合飼料中的應(yīng)用提供參考。
1.1.1 試驗動物
選取2012年10月中下旬孵化出的規(guī)格整齊,附肢完整,健康,平均體重為(223.75±22)g日本品系中華鱉作為試驗動物。
1.1.2 酶制劑
三種酶制劑分別為中性蛋白酶制劑、非淀粉多糖酶制劑、包衣復(fù)合酶制劑(包含木聚糖酶、β-葡聚糖酶、甘露聚糖酶、纖維素酶、淀粉酶和中性蛋白酶),來源均為飼料級市售商品酶。
1.2.1 試驗設(shè)計
在同一溫室大棚內(nèi)選擇水質(zhì)穩(wěn)定、規(guī)格為36 m2(6 m×6 m)的水泥池進行為期28 d的飼養(yǎng)試驗。試驗分為3個試驗組和1個對照組,每組設(shè)置2個重復(fù),每個水泥池中華鱉放養(yǎng)750只。各處理組分別投喂基礎(chǔ)中華鱉飼料+0.02%中性蛋白酶(中性蛋白酶飼料組)、基礎(chǔ)中華鱉飼料+0.1%非淀粉多糖酶(非淀粉多糖酶飼料組)、基礎(chǔ)中華鱉飼料+0.03%包衣復(fù)合酶(包衣復(fù)合酶飼料組)及未添加酶制劑的基礎(chǔ)中華鱉飼料(對照組)。試驗期間,各處理組飼料分別與水按1∶0.4~0.45混合均勻后使用制粒機制成軟顆粒飼料進行投喂。基礎(chǔ)飼料組成及營養(yǎng)水平見表1。
表1 基礎(chǔ)飼料組成及營養(yǎng)水平(%)
1.2.2 試驗環(huán)境與管理
試驗時大棚中水泥池室內(nèi)水溫控制在(30±1)℃,加溫方式采用水空調(diào)循環(huán)加熱。每天投喂餌料 3 次,投喂時間分別為上午 6:00、中午 1:30、晚上6:30,每次的投餌量為日投餌量的1/3,具體投餌量則根據(jù)池內(nèi)日本品系中華鱉攝食情況、生理狀態(tài)、水質(zhì)狀況(如溶解氧、氨氮、硝酸鹽、亞硝酸鹽)、溫度等因素作適當調(diào)整;室內(nèi)除投喂時開燈外,其他時間均處于黑暗,池內(nèi)保持24 h增氧。
試驗開始前和結(jié)束時對各試驗組進行隨機抽樣稱重,以此計算增重率和飼料系數(shù)等。
總增重(kg)=試驗結(jié)束時總重-試驗開始時總重;
增重率(%)=總增重/試驗開始時總重×100;
飼料系數(shù)=總投餌量/總增重。
試驗數(shù)據(jù)用“平均數(shù)±標準差”表示,統(tǒng)計分析所用軟件為Excel 2003、SPSS 18。各處理的數(shù)據(jù)采用單因素方差分析(one-way ANOVA),Duncan's檢驗法進行多重比較,檢驗處理間的差異顯著性(P<0.05)。
經(jīng)過28 d的飼養(yǎng)試驗,各組中華鱉的生長結(jié)果見表2。從表2中可以看出,不同酶制劑對溫室養(yǎng)殖日本品系中華鱉生長的影響各異,中華鱉增重率表現(xiàn)為中性蛋白酶飼料組>非淀粉多糖酶飼料組>對照組>包衣復(fù)合酶飼料組,分別是24.43%、20.00%、19.09%、17.35%,其中中性蛋白酶飼料組和非淀粉多糖酶飼料組高于對照組,包衣復(fù)合酶飼料組卻低于對照組。通過多重比較分析發(fā)現(xiàn),增重率只有中性蛋白酶飼料組與對照組之間呈顯著相關(guān)(P<0.05)。從平均每只中華鱉增重來看,添加了酶制劑的試驗組均高于對照組,其中中性蛋白酶飼料組增重最多,其次是非淀粉多糖酶飼料組,而各組之間無顯著性相關(guān)(P>0.05)。
表2 3種酶制劑對溫室日本品系中華鱉生長的影響
經(jīng)過28 d的飼養(yǎng)試驗,各組的飼料系數(shù)見表2。從表2可知,飼料系數(shù)表現(xiàn)為中性蛋白酶飼料組<非淀粉多糖酶飼料組<包衣復(fù)合酶飼料組<對照組,分別為1.28、1.32、1.40、1.42;三種酶制劑組的飼料系數(shù)均比對照組低,而通過多重比較分析,只有中性蛋白酶飼料組與對照組之間呈顯著性關(guān)系(P<0.05),非淀粉多糖酶飼料組、包衣復(fù)合酶飼料組與對照組之間差異不顯著(P>0.05)。由此來看,添加酶制劑在一定程度上能提高飼料的利用率,降低飼料系數(shù),且中性蛋白酶效果較好。
28 d的飼養(yǎng)試驗期間,各組的日本品系中華鱉攝食量存在差異(見表3、表4)。從表3中得知,平均每只中華鱉日攝食量差異不顯著(P>0.05),但添加酶制劑組的平均每只中華鱉攝食量均大于對照組,表現(xiàn)為中性蛋白酶飼料組>非淀粉多糖酶飼料組>包衣復(fù)合酶飼料組>對照組。從常規(guī)投喂到飽食投喂情況下,各處理的攝食情況如表4。從結(jié)果來看,各組的攝食量都有一定增加,但隨后出現(xiàn)減少,而中性蛋白酶飼料組的攝食量相對穩(wěn)定。當投餌量定為1.1 kg時,投喂40 min后觀察發(fā)現(xiàn),中性蛋白酶飼料組和包衣復(fù)合酶飼料組的飼料已被中華鱉全部攝食完,非淀粉多糖酶飼料組約有10%的飼料剩余,對照組約有20%的剩余;當投餌量定為1.2 kg時,投喂40 min后觀察發(fā)現(xiàn),中性蛋白酶飼料組和包衣復(fù)合酶飼料組的飼料已被中華鱉全部攝食完,非淀粉多糖酶飼料組剩余約10%,對照組剩余約20%,中性蛋白酶飼料組和非淀粉多糖酶飼料組的養(yǎng)殖水質(zhì)穩(wěn)定,包衣復(fù)合酶飼料組和對照組的養(yǎng)殖池內(nèi)水質(zhì)開始有些發(fā)白;當投餌量定為1.3 kg時,投喂40 min后觀察發(fā)現(xiàn),中性蛋白酶飼料組、非淀粉多糖酶飼料組和包衣復(fù)合酶飼料組均有飼料剩余,其中,中性蛋白酶飼料組剩余約10%,非淀粉多糖酶飼料組剩余20%、包衣復(fù)合酶飼料組剩余約20%,且包衣復(fù)合酶飼料組池中水質(zhì)發(fā)白嚴重,中性蛋白酶飼料組、非淀粉多糖酶飼料組養(yǎng)殖池中的水質(zhì)也有些發(fā)白跡象。
表3 3種酶制劑對溫室日本品系中華鱉日攝食量的影響(g/只)
表4 飽食條件下3種酶制劑對溫室日本品系中華鱉攝食量的影響(kg)
隨著水產(chǎn)飼料業(yè)的發(fā)展,飼用酶制劑在解決飼料資源短缺、提高飼料利用率、減少環(huán)境污染和提高經(jīng)濟效益上已得到了飼料和養(yǎng)殖業(yè)的普遍重視和廣泛應(yīng)用。酶制劑作為無藥物殘留、無毒副作用且不污染環(huán)境的環(huán)保型綠色飼料添加劑,已越來越受到人們的重視[10-11],飼料酶在水產(chǎn)飼料中的應(yīng)用效果也得到了越來越多的認可。酶制劑具有自身獨特的氣味,對于特定的養(yǎng)殖動物而言,誘食性刺激會表現(xiàn)不同的反應(yīng),有的添加到餌料中會出現(xiàn)拒食的現(xiàn)象[12]。在試驗過程中,基礎(chǔ)飼料中添加不同酶制劑投喂溫室養(yǎng)殖的日本品系中華鱉時,各組均能正常攝食,沒有出現(xiàn)厭食的現(xiàn)象,說明3種酶制劑可以在中華鱉配合飼料中適量添加。
在飼料中添加分解抗營養(yǎng)因子的酶類和幫助消化碳水化合物酶類,可以提高魚類對植物蛋白的利用能力[13-14]。主要是因為添加的酶制劑能破壞豆粕、淀粉等植物性飼料的細胞壁,充分釋放存在于細胞內(nèi)的大分子營養(yǎng)源,降解纖維素,降低飼料中的抗營養(yǎng)因子[5,15]。研究表明,草魚幼魚飼料中添加液體非淀粉多糖復(fù)合酶A 0.1、0.2 ml/kg和酶B 0.2 ml/kg均能顯著提高草魚的相對增重率、特定生長率和飼料轉(zhuǎn)化效率(P<0.05)[16]。這是因為植物原料中含有一定量的木聚糖和纖維素等非淀粉多糖,而草魚消化道內(nèi)不能分泌這些酶類,外源酶制劑的加入能分解植物原料中的非淀粉多糖,從而提高飼料的營養(yǎng)價值,改善草魚對基礎(chǔ)飼料中養(yǎng)分的消化吸收率,從而提高飼料養(yǎng)分在魚體內(nèi)的沉積。飼料中添加復(fù)合酶制劑(主要包含淀粉酶、纖維素分解酶和蛋白酶)后,提高了尼羅羅非魚對飼料中干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)的表觀消化率[17]。幼鱉飼料中分別添加0.1%、0.2%、0.3%的國產(chǎn)復(fù)合酶制劑對其生長性能有影響:添加量為0.2%組的養(yǎng)殖效果最好,增重率比對照組提高75%,餌料系數(shù)降低14.5%;其次為添加量為0.1%,增重率比對照組提高20%,餌料系數(shù)降低5.9%;添加量為0.3%的一組,其養(yǎng)殖效果還不如對照組[18]。本試驗結(jié)果也表明,飼料中添加了酶制劑后中華鱉的攝食速度加快,攝食量增加,鱉生長率提高,飼料系數(shù)降低,可能是因外源酶的添加促進了鱉體本身內(nèi)源酶的分泌,與外源酶協(xié)同作用,從而加強對飼料營養(yǎng)成分的消化與吸收,提高鱉對營養(yǎng)物質(zhì)的轉(zhuǎn)化率。
三種酶制劑能在一定程度上影響溫室養(yǎng)殖的日本品系中華鱉的生長性能。在飼料系數(shù)、中華鱉增重率等方面的表現(xiàn)最好的酶制劑是中性蛋白酶,其次是非淀粉多糖酶;在增加中華鱉攝食量方面,中性蛋白酶和包衣復(fù)合酶表現(xiàn)較好,但包衣復(fù)合酶飼料組池內(nèi)水質(zhì)發(fā)白嚴重,不穩(wěn)定,中性蛋白酶飼料組和非淀粉多糖酶飼料組養(yǎng)殖池內(nèi)的水質(zhì)較包衣復(fù)合酶飼料組的穩(wěn)定。