■羅 霄 方 俊 劉 剛Myrlene Carine B.Tossou李鐵軍鄧近平
(1.湖南農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院動物營養(yǎng)研究所,湖南長沙 410128;2.湖南農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院,湖南長沙 410128;3.中國科學院亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所,湖南長沙 410125)
1973年,WHO和國際營養(yǎng)組織確認硒為人和動物體內(nèi)必需的微量元素。硒的營養(yǎng)主要是通過蛋白質(zhì)(特別是酶蛋白)結(jié)合發(fā)揮抗氧化作用,所以硒與人類和動物生長、發(fā)育、疾病的發(fā)生和調(diào)控緊密相關(guān)[1]。由于斷奶仔豬的基礎日糧中含硒量很低,硒缺乏癥在斷奶仔豬生長發(fā)育中很常見,病豬多會出現(xiàn)白肌病、食欲不振、營養(yǎng)不良、生長緩慢等癥狀[2]。因此,在全國范圍內(nèi),向日糧中添加硒已經(jīng)是一種很普遍的為仔豬補硒的常規(guī)措施,目前國內(nèi)補硒主要靠無機化合物亞硒酸鈉等,但是仔豬對無機硒源的吸收率低、產(chǎn)生毒副作用大,添加無機硒源不僅不能達到補硒的理想效果,還會對仔豬產(chǎn)生潛在危害,而且污染環(huán)境,所以研究向斷奶仔豬日糧中添加酵母硒正成為熱門研究方向。已有研究表明,酵母硒比無機硒易吸收、安全、穩(wěn)定、污染少,并且具有多方面的保健功能,但對于酵母硒在斷奶仔豬日糧中的最佳添加量仍說法不一。本試驗研究添加不同劑量的酵母硒,分析他們對仔豬日增重、飼料利用率、抗氧化指標等方面的影響,最后確定出最佳添加量。
試驗前徹底清理欄舍,首先用2%NaOH溶液沖洗圈舍,然后用1∶300的殺菌靈稀釋液噴灑豬欄,開門窗通風,最后用福爾馬林和高錳酸鉀密封熏蒸消毒12 h,用藥濃度為每立方米空間用甲醛溶液28 ml、高錳酸鉀14 g、水14 ml,繼續(xù)通風凈化,放干凈余氣后,開始試驗。
從某豬場選取分娩日期相同、體質(zhì)健康、初生重相近的28 d杜洛克×長白×約克夏三元雜交斷奶仔豬192頭。挑選好的仔豬登記體重、耳標,隨機分成A、B、C、D四組,即:一個對照組、三個試驗組。A組作為對照組飼喂基礎日糧,B、C、D作為試驗組,在基礎日糧中添加酵母硒,添加量依次為0.15、0.30、0.60 mg/kg。
參照《中華人民共和國豬飼養(yǎng)標準》(2004),結(jié)合飼養(yǎng)仔豬實踐經(jīng)驗設計試驗日糧?;A日糧組成其營養(yǎng)水平見表1,試驗分組及酵母硒添加情況見表2。
在漏縫地板鐵籠內(nèi)飼養(yǎng)試驗仔豬,試驗前對豬舍進行徹底地清理、消毒、通風,對仔豬的免疫等其他管理照常規(guī)進行。試驗進行中,保證豬舍清潔、干燥、空氣新鮮,舍內(nèi)相對濕度為45%~55%之間,溫度在25℃左右。
試驗期28 d,仔豬斷奶前3 d用基礎日糧誘食,第4 d開始飼喂對應的試驗組日糧[3]。每日飼喂4次,飼喂時間為 8∶00、12∶00、16∶00 和 20∶00,自由采食和飲水。注意觀察仔豬健康狀況,出現(xiàn)重度腹瀉或其他疾病要及時治療。試驗期間,每天早晨空腹稱重一次,準確計量、記錄每日投料量、剩料量。試驗結(jié)束后次日早晨,每個試驗組隨機抽取5頭仔豬空腹抽取前腔靜脈血5 ml,收集全血(肝素抗凝),部分分離血清,于-20℃保存;取血結(jié)束后,每組隨機選1頭仔豬屠宰、采集肝臟、腎臟、肌肉樣品,在-20℃保存。
表1 試驗仔豬基礎日糧組成及營養(yǎng)水平(風干基礎)
表2 試驗分組及酵母硒添加量
1.5.1 生長性能指標測定
仔豬日采食量(g/d)=(投料量-剩料量)/試驗天數(shù);
日增重(g/d)=(末重-初重)/試驗天數(shù);
料肉比=日采食量/日增重;
總耗料量(g/頭)=全期平均日采食量×28。
每日記錄各種仔豬健康情況,記錄腹瀉與喘氣的仔豬頭數(shù)。
1.5.2 血清指標測定
測定仔豬血清中的免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgG)、補體3(C3)、補體4(C4),均采用棉衣透射比濁法,使用深圳市庫貝爾生物科技有限公司購買的自動生化分析儀iChem-340。
測定仔豬血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)3種酶的活性,使用長春光機醫(yī)療器械有限公司CA-2000全自動酶標儀。
測定仔豬血清中谷胱甘肽過氧化物酶(GPXPx)、超氧化物歧化酶(SOD)酶活及丙二醛(MAD)含量,使用酶標儀同上。
1.5.3 全血和組織含硒量測定
測定仔豬全血、肝臟、腎臟、肌肉中的含硒量,使用氫化物發(fā)生—原子熒光光譜法測定,購買北京晶品賽思科技有限公司的PF6系列多道全自動原子熒光光度計。
試驗數(shù)據(jù)用EXCEL2003初步整理,采用SPSS 16.0統(tǒng)計軟件進行單因素方差分析。
表3 日糧添加不同劑量的酵母硒對斷奶仔豬采食量的影響
從表3可以看出,從飼喂的第1周開始到第4周結(jié)束,添加不同劑量的酵母硒的各個試驗組仔豬平均日采食量均高于對照組。其中C組仔豬采食量為4組中平均日采食量最高,和對照組相比差異極顯著(P<0.01),B組與D組仔豬日采食量低于C組、高于對照組,與對照組相比差異顯著。
表4 日糧添加不同劑量的酵母硒對斷奶仔豬健康狀況的影響
從表4可以看出,不同的酵母硒添加量對仔豬腹瀉、喘氣有一定影響。對照組仔豬腹瀉頭數(shù)最多,C、D組仔豬腹瀉頭數(shù)數(shù)量相同,同為最少,B組仔豬腹瀉頭數(shù)高于C、D兩組,低于對照組;仔豬喘氣頭數(shù)對照組和B組數(shù)量最多,C組仔豬喘氣頭數(shù)最少,D組仔豬喘氣頭數(shù)低于對照組和B組,高于C組。
表5 日糧添加不同劑量的酵母硒對斷奶仔豬增重的影響
從表5可以看出,不同的酵母硒添加量對仔豬增重有一定影響。B、C、D三組仔豬的周平均日增重、全期平均日增重、總增重均高于對照組,1~4周均為C組仔豬個體增重最多,日增重C組最多,A、C兩組差異顯著,二者日增重大于對照組、小于C組,總增重C組最大。
從表6可以看出,不同的酵母硒添加量對仔豬日糧轉(zhuǎn)化率有一定影響。1~4周中B、C、D組仔豬料肉比均低于對照組A組,其中C組料肉比為最低。
表6 日糧添加不同劑量的酵母硒對斷奶仔豬料肉比的影響
表7 日糧添加不同劑量的酵母硒對斷奶仔豬免疫的影響(g/l)
從表7可以看出,不同的酵母硒添加量對仔豬免疫有一定影響。試驗結(jié)束后,B、C、D組仔豬IgG、IgA、IgM、C3、C4均高于對照組A組,其中C組始終為最高。其中C組與對照組仔豬相比,IgM、C3差異極顯著,IgG、IgA、C4差異顯著。
從表8可以看出,A、B兩組仔豬谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)的含量無顯著差異,所以0.15 mg/kg劑量的酵母硒日糧對谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)無影響。不同劑量的酵母硒日糧對谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)無顯著影響。C、D兩組的谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)高于A組,差異極顯著(P<0.01),C、D兩組間無顯著差異。C的堿性磷酸酶(ALP)高于A組,差異極顯著(P<0.01),D組高于A組,低于C組。
表8 日糧添加不同劑量的酵母硒對斷奶仔豬血清酶活的影響(U/l)
從表9可以看出,不同的酵母硒添加量對仔豬血清抗氧化指標有一定影響。在試驗的28 d結(jié)束后,B組、C組、D組仔豬的GPX-Px與對照組相比分別提高了12.06%、37.04%、29.91%,差異極顯著(P<0.01);B組、C組、D組仔豬的SOD與對照組相比分別提高了5.42%、22.88%、16.75%,差異極顯著(P<0.01);B組、C組、D組仔豬的MDA含量與對照組相比分別降低了8.66%、15.10%、24.06%,差異極顯著(P<0.01);B組、C組、D組仔豬的T-AOC與對照組相比分別提高了22.39%、55.06%、41.06%,差異顯著(P<0.05)。
表9 日糧添加不同劑量的酵母硒對斷奶仔豬血清抗氧化指標的影響
從表10可以看出,不同的酵母硒添加量對仔豬全血及組織中Se含量有一定影響,均高于對照組。在試驗的28 d結(jié)束后,B組、C組、D組仔豬全血中Se含量與對照組相比分別提高了61.54%、292.31%、376.92%;B組、C組、D組仔豬肝臟中Se含量與對照組相比分別提高了129.01%、209.84%、252.85%;B組、C組、D組仔豬腎臟中Se含量與對照組相比分別提高了45.95%、81.22%、88.66%;B組、C組、D組仔豬肌肉中Se含量與對照組相比分別提高了15.73%、204.49%、232.58%。
表10 日糧添加不同劑量的酵母硒對斷奶仔豬全血及組織中Se含量的影響(mg/kg)
在斷奶仔豬生長性能的研究上,曾有外國學者(Manhan等,1999)研究后表示,有機硒或無機硒對仔豬生長性能沒有顯著影響,其中包括硒源對仔豬增重、日糧轉(zhuǎn)化率都無顯著影響的結(jié)論[4]。也曾有國內(nèi)學者(張乙山等,2008)有過類似的研究結(jié)論,他們認為有機硒和無機硒對仔豬生長性能方面有一定影響,小劑量的硒源對仔豬生長性能影響不大,只有大劑量硒源可以大幅度提高日增重和日糧轉(zhuǎn)化率[5]。但是本試驗研究表明:日糧添加不同劑量的酵母硒對仔豬的采食量、日增重、料肉比及健康狀況有著不同程度的影響,具有促進作用,其中C組(0.30 mg/kg)與對照組相比,在仔豬生長性能上具有顯著差異,而且明顯優(yōu)于其他試驗組。這雖然與之前個別學者結(jié)論不同,但是國內(nèi)也有很多學者(王秀娜等,2010;陳桂英等,2008)得出與本試驗類似結(jié)論[2-6]。
在斷奶仔豬的抗氧化指標的研究上,本試驗研究結(jié)果表明:添加不同劑量的酵母硒日糧對仔豬的抗氧化指標有不同程度的影響,添加劑量為3%時,作用效果較為穩(wěn)定。