去離子水稀釋法與高速離心法減少血脂對生化檢測結(jié)果干擾的效果比較

楊文龍 山西煤炭中心醫(yī)院檢驗科，山西省太原市 030006

去離子水稀釋法與高速離心法減少血脂對生化檢測結(jié)果干擾的效果比較

楊文龍 山西煤炭中心醫(yī)院檢驗科，山西省太原市 030006

目的：比較分析去離子水稀釋法和高速離心法減少血脂對生化檢測結(jié)果干擾的效果。方法：進行三酰甘油即TAG干擾試驗選用相應(yīng)的去離子稀釋倍數(shù)，然后再用去離子水稀釋法、高速離心法來處理血清，用t檢驗上述兩種方法消除血脂干擾的效果。結(jié)果：去離子水稀釋法與高速離心法處理后P與Ca結(jié)果之間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），但是比較其他各項指標(biāo)，差異不明顯，沒有統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論：采用去離子水稀釋法能夠有效消除血脂對于生化檢驗結(jié)果的影響，可為臨床提供精確度更高的生化檢驗結(jié)果。

去離子水稀釋法 高速離心法 血脂 生化檢測 效果

臨床注射脂肪乳患者、急診患者的血清標(biāo)本，常常會出現(xiàn)不同程度的渾濁，且渾濁血清中乳糜微粒的核心成分TG，能夠?qū)θ肷涔猱a(chǎn)生散射，對生化檢驗結(jié)果產(chǎn)生一定的干擾，故臨床檢驗一般需要采取相關(guān)措施降低標(biāo)本中TG濃度，進一步提高檢測結(jié)果的精確性[1]。本文主要分析去離子水稀釋法和高速離心法減少血脂對生化檢測結(jié)果干擾的效果，報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 （1）標(biāo)本。選取我院急診及住院患者當(dāng)作標(biāo)本甲、標(biāo)本乙、標(biāo)本丙，其中標(biāo)本甲：42份新鮮乳糜血標(biāo)本；標(biāo)本乙：42份外觀澄清的新鮮血清；標(biāo)本丙：250份乳糜血及血渾的新鮮血液標(biāo)本。（2）儀器與試劑。用日立型號為7600的全自動生化分析儀，德國Eppendorf公司生產(chǎn)的5430臺式高速冷凍離心機。從日本株式會社日立高新技術(shù)公司購買肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶MB（CK－MB）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、葡萄糖（GLU）與鈣（Ca），從北京利德曼生化技術(shù)有限公司購買淀粉酶（AMY）、尿素氮（UREA）、肌酐（CREA），檢測用到的去離子水主要從雙峰創(chuàng)優(yōu)純水設(shè)備制造廠生產(chǎn)出來的凈水處理設(shè)備（型號：GNRO－200）中制取。

1.2 方法

1.2.1 制備血脂濃縮液。把標(biāo)本甲按照4 000rmin的速度實施常規(guī)離心獲取血清，然后根據(jù)13 000rmin的速度高速離心吸取渾濁的脂血血清，吸去下層部分，然后向余下的脂層中加入大量生理鹽水，大約是其10倍的體積，均勻混合后靜置5～10min。然后再重復(fù)上述離心稀釋過程，兌入500μl的生理鹽水留作備用。

1.2.2 三酰甘油的干擾實驗。把標(biāo)本乙混合均勻后，用混合血清當(dāng)作空白管標(biāo)本，在高速冷凍離心機上連續(xù)數(shù)次檢測實驗指標(biāo)，將余下的20ml混合血清分成10份，加入不同劑量的血脂濃縮液，然后制作出有TG濃度梯度的干擾物樣本，需要在生化分析儀器上重復(fù)性檢測上述各項指標(biāo)3次。計算出空白管的平均數(shù)值與標(biāo)準(zhǔn)差，當(dāng)超過空白管濃度（±1.97s）時定義為干擾。

1.2.3 去離子水稀釋法。依照干擾實驗所得結(jié)果，選用多數(shù)檢測項目無明顯干擾的最大三酰甘油濃度當(dāng)作稀釋目標(biāo)濃度，稀釋不一樣水平的標(biāo)本直至達到目標(biāo)濃度再實施生化檢測。把標(biāo)本丙置于生化分析儀器上面，檢測出三酰甘油濃度實施去離子水稀釋，并將稀釋后的標(biāo)本置于機器上連續(xù)檢測2次，選取平均數(shù)值再和稀釋倍數(shù)相乘得到檢測結(jié)果。

1.2.4 高速離心法。把標(biāo)本丙按照13 000rmin的速度高速離心10min左右，取出下層清亮的血清生化檢測2次，選取平均數(shù)值。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析 用SPSS14.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析本次檢測所得的所有數(shù)據(jù)，用t檢驗兩組數(shù)據(jù)匹配情況，然后進行線性回歸分析，若P＜0.05，則結(jié)果有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三酰甘油干擾實驗結(jié)果 分析整個實驗過程可知：若TG在7.8mmolL之上對于P值檢測會產(chǎn)生干擾，若TG在14.4mmolL之上對于P值與ALT檢測均會產(chǎn)生一定程度的干擾，若TG數(shù)值為25.8mmolL時對于P值、ALT檢測、AST檢測均會產(chǎn)生干擾。故應(yīng)將標(biāo)本中TG濃度維持在10.9～12.6mmolL才能確保檢測結(jié)果的精準(zhǔn)性。

2.2 去離子水稀釋法與高速離心法檢測結(jié)果比較 從表1可知：去離子水稀釋法與高速離心法處理后P與Ca結(jié)果之間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），但是比較其他各項指標(biāo)，差異不明顯，沒有統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），表明去離子水稀釋法與高速離心法處理結(jié)果存在較高的一致性。

表1 兩種方法減少血脂對生化檢測結(jié)果干擾的效果比較

3 討論

如果TG的濃度太高可能對生化檢測的結(jié)果產(chǎn)生一定影響，但是急診患者一般不能確保其在就診前禁食8～12h，故其血液標(biāo)本中的TG含量明顯比空腹水平高。為了降低標(biāo)本中TG濃度，從而減少對生化檢測造成的影響，現(xiàn)階段常用方法主要有乙醚處理法、磷鎢酸－鎂－PEG法與高速離心法[2]。其中高速離心法對于血脂正?；蛘咧卸妊惓?biāo)本的生化檢測結(jié)果不會產(chǎn)生太大影響，其檢測結(jié)果在高速離心前、后大體一致，針對高度血脂異常的血清用這種方法能夠有效消除血脂干擾。然而高速離心機價格昂貴，且其在檢驗科無其他特殊作用，所以通常情況下檢驗科不會配備高速離心機[3]。其余兩種檢測方法因為在試劑中添加了其他附加成分，檢測的反應(yīng)系統(tǒng)已經(jīng)發(fā)生改變，操作步驟繁瑣，不能精確地檢測出相關(guān)生化指標(biāo)。

本文結(jié)果表明：去離子水稀釋法與高速離心法處理后P與Ca結(jié)果之間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），但是比較其他各項指標(biāo)，差異不明顯，沒有統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。這與研究結(jié)果[4]相吻合。說明了各項檢測指標(biāo)基本上可以反映出患者肝腎功能情況，可以用來初步診斷急性胰腺炎與急性心肌梗死，其大體滿足急診生化檢驗需求。同時研究結(jié)果中P與Ca的檢測結(jié)果存在明顯差異，其中P檢測結(jié)果差異大可能受到TG干擾程度大。去離子水稀釋后標(biāo)本TG平均數(shù)值8.0mmolL＞TG對P干擾數(shù)值7.8mmolL，說明稀釋倍數(shù)欠佳，需要深入稀釋才可以得到更加精確結(jié)果。針對存在腎功能障礙可疑性高磷血癥患者而言，可以由TG結(jié)果決定稀釋倍數(shù)，以便于得到精確結(jié)果。Ca2＋檢測所得結(jié)果差異大可能是因為稀釋以后標(biāo)本中的Ca2＋含量比試劑盒的檢測下限低，一般而言Ca2＋試劑線性在1.3～3.8mmolL范圍內(nèi)，采用去離子水稀釋以后標(biāo)本中的Ca2＋濃度約為0.83mmolL，而標(biāo)準(zhǔn)差是0.17mmolL，故去離子水稀釋法不適合用在消除血脂對Ca2＋影響方面[5]。值得注意的一點是在采用去離子水稀釋方法消除TG干擾的情況下，須選用合適的稀釋倍數(shù)，確定TG濃度對于各項檢驗指標(biāo)的干擾程度。

總之，采用去離子水稀釋法能夠有效消除血脂對于生化檢驗結(jié)果的影響，為臨床提供精確度更高的生化檢驗結(jié)果。

[1] 張?zhí)N秀.稀釋法消除血脂對生化檢測結(jié)果干擾的效果評價〔J〕.武警醫(yī)學(xué)，2012，6（4）：136－138.

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[4] 韓曉娜.高血脂癥對生化檢驗項目的干擾及消除〔J〕.大家健康：學(xué)術(shù)版，2014，2（1）：35－37.

[5] 朱東.臨床上血液標(biāo)本的采集送檢對生化檢測結(jié)果的干擾與分析〔J〕.中國社區(qū)醫(yī)師：醫(yī)學(xué)專業(yè)，2011，7（19）：238－241.

（編輯落落）

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1001－7585（2015）12－1649－02

2014－10－14