赤母婦炎寧膠囊治療慢性盆腔炎的實(shí)驗(yàn)研究

呂曉君 何開(kāi)勇 潘望平 王平慧

湖北省食品藥品監(jiān)督檢驗(yàn)研究院生物安全檢測(cè)中心，湖北武漢430064

赤母婦炎寧膠囊治療慢性盆腔炎的實(shí)驗(yàn)研究

呂曉君 何開(kāi)勇 潘望平 王平慧

湖北省食品藥品監(jiān)督檢驗(yàn)研究院生物安全檢測(cè)中心，湖北武漢430064

目的探討赤母婦炎寧膠囊治療大鼠慢性盆腔炎的效果及其抑菌、抗感染、鎮(zhèn)痛作用。方法采用大鼠慢性盆腔炎模型（化學(xué)性燒傷及細(xì)菌性感染兩種模型）觀察赤母婦炎寧膠囊治療慢性盆腔炎的作用；采用金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、白假絲酵母菌和乙型溶血性鏈球菌進(jìn)行體外抑菌試驗(yàn)，觀察赤母婦炎寧膠囊的體外抑菌作用；采用巴豆油誘導(dǎo)小鼠耳腫脹模型，觀察赤母婦炎寧膠囊的抗感染作用；采用小鼠冰醋酸扭體反應(yīng)，觀察赤母婦炎寧膠囊的鎮(zhèn)痛作用。結(jié)果赤母婦炎寧膠囊對(duì)大鼠化學(xué)性燒傷及細(xì)菌性感染兩種慢性盆腔炎模型大鼠的病癥有明顯改善作用，與苯酚模型對(duì)照組比較，赤母婦炎寧膠囊能明顯減輕造模后大鼠子宮腫脹度，改善病理組織學(xué)變化，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01）；對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸埃希桿菌、銅綠假單胞菌、白假絲酵母菌和乙型溶血性鏈球菌均有明顯的抑制作用；可顯著抑制巴豆油誘導(dǎo)的小鼠耳腫脹，與陰性對(duì)照組比較，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；可延長(zhǎng)冰醋酸致小鼠疼痛反應(yīng)潛伏期，減少疼痛扭體次數(shù)，與陰性對(duì)照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01）。結(jié)論赤母婦炎寧膠囊對(duì)大鼠慢性盆腔炎具有治療作用及抑菌、抗感染、鎮(zhèn)痛作用。

赤母婦炎寧膠囊；慢性盆腔炎；抑菌；抗感染；鎮(zhèn)痛

慢性盆腔炎（chronic pelvic inflammatory disease，CPID）是指女性?xún)?nèi)生殖器官及其周?chē)Y(jié)締組織、盆腔腹膜發(fā)生的慢性炎癥性疾病，多為急性盆腔炎治療不徹底或患者體質(zhì)較差使病程遷延所致［1-2］。目前西醫(yī)治療包括使用抗感染藥物、盆腔給藥灌注治療、物理療法及手術(shù)治療等，但對(duì)于CPID的治療效果均不理想。中醫(yī)認(rèn)為CPID屬下腹痛、帶下、月經(jīng)不調(diào)等范疇，是由于下焦?jié)駸狃龇e或創(chuàng)傷瘀滯、脈絡(luò)受阻、氣血不暢而形成，治療上應(yīng)以清熱解毒、活血化瘀為本。赤母婦炎寧膠囊根據(jù)臨床應(yīng)用多年的經(jīng)驗(yàn)方制備而成，由赤芍、杏香兔耳風(fēng)、土茯苓、苦參、延胡索、莪術(shù)、益母草組成，用于治療CPID屬濕熱瘀阻癥。根據(jù)功能主治和處方組成，本實(shí)驗(yàn)對(duì)赤母婦炎寧膠囊治療CPID及其抑菌、抗感染、鎮(zhèn)痛作用進(jìn)行了研究，為其臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物

SPF級(jí)Wistar雌性大鼠88只，體重（200±20）g，生產(chǎn)許可證：SCXK（鄂）2008-0005，購(gòu)自湖北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心；昆明種小鼠120只，雌雄各半，體重（20±2）g，生產(chǎn)許可證：SCXK（鄂）2008-0003，由武漢生物制品研究所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

1.2 藥物和試劑

赤母婦炎寧膠囊，由武漢藥谷科技開(kāi)發(fā)有限公司提供，批號(hào)：20100401，規(guī)格0.4 g/粒，每1克膠囊內(nèi)容物相當(dāng)于生藥8.1 g，人體推薦日用量0.648 g生藥/kg。陽(yáng)性對(duì)照藥：金剛藤糖漿（150 mL/瓶，湖北福人藥業(yè)有限公司，批號(hào)：20100912）、布洛芬緩釋片（0.3 g/片，惠州大亞制藥股份有限公司，批號(hào)：101202056）、苯酚（廣東汕頭市西隴化工廠，批號(hào)：20050812，臨用前用1%羧甲基纖維素鈉配制成25%苯酚膠漿）、巴豆油（臨用前配制成2%溶液，巴豆油∶乙醇∶乙醚=0.2 mL∶2 mL∶7.8 mL）、冰醋酸（天津百世化工有限公司，批號(hào)：200802026）、戊巴比妥鈉（中國(guó)醫(yī)藥上?；瘜W(xué)試劑公司，批號(hào)：F2002091），此外，血液增菌培養(yǎng)基、瓊脂粉、沙保羅氏瓊脂、SS瓊脂購(gòu)自杭州天和微生物試劑有限公司，配制后高壓蒸汽滅菌。

1.3 菌種

用于CPID模型制備的菌種為臨床分離大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌和溶血性鏈球菌，由湖北省婦幼保健院檢驗(yàn)科提供，湖北省食品藥品監(jiān)督檢驗(yàn)研究院微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)傳代并計(jì)數(shù)，臨用前按大腸埃希菌∶金黃色葡萄球菌∶溶血性鏈球菌=2∶1∶1比例，用無(wú)菌生理鹽水配制成總菌含量為1×107/mL的混合菌液備用。

用于體外抑菌試驗(yàn)的菌種為5個(gè)菌種，標(biāo)準(zhǔn)菌株購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所，野生菌株由武漢市同濟(jì)醫(yī)院分離培養(yǎng)和鑒定獲得，分別為金黃色葡萄球菌（標(biāo)準(zhǔn)株ATCC25923、野生株10株），大腸埃希菌（標(biāo)準(zhǔn)株ATCC25922和ATCC35218、野生株10株），銅綠假單胞菌（標(biāo)準(zhǔn)株ATCC27853、野生株10株），白假絲酵母菌（標(biāo)準(zhǔn)株ATCC90028、野生株10株），乙型溶血性鏈球菌（野生株10株）。

1.4 儀器

ML303型電子分析天平，上海梅特勒-托利多儀器有限公司；DS-671電子秤，上海寺岡電子有限公司；JM5102電子秤，余姚市紀(jì)銘稱(chēng)重校驗(yàn)設(shè)備有限公司；ESCO生物安全柜，新加坡藝思商科技有限公司；DNP-9162電熱恒溫培養(yǎng)箱，上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司；立式壓力蒸汽滅菌器YSQ-LS-5031，上海博迅實(shí)業(yè)有限公司；DME型顯微鏡，德國(guó)徠卡公司。

1.5 化學(xué)性燒傷致慢性盆腔炎大鼠模型的建立

取上述大鼠48只，隨機(jī)分為6組，每組8只，苯酚造模。設(shè)假手術(shù)組、模型對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組、赤母婦炎寧膠囊高、中、低劑量組（1.6、0.8、0.4 g/kg，相當(dāng)于生藥12.96、6.48、3.24 g/kg，人擬臨床用量的20、10、5倍）。造模方法［3］：戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉（40 mg/kg），腹部75%噴霧消毒，大鼠趾骨聯(lián)合上方1.0 cm處腹正中縱向切開(kāi)2 cm小口，暴露子宮，針頭在右側(cè)子宮分叉處朝卵巢方向小心進(jìn)針2 cm，緩慢注射苯酚膠漿0.1 mL，注畢，分層縫合，消毒手術(shù)區(qū)，左側(cè)子宮不作處理作自身對(duì)照。假手術(shù)組僅進(jìn)行開(kāi)腹和關(guān)腹手術(shù)，未注射苯酚膠漿造模。造模后第7天開(kāi)始灌胃給藥，每日1次，連續(xù)14 d。假手術(shù)組、模型對(duì)照組給予蒸餾水（10 mL/kg）；陽(yáng)性對(duì)照組給予金剛藤糖漿（10 mL/kg，相當(dāng)于人用量的10倍）；赤母婦炎寧膠囊高、中、低劑量組分別給予相應(yīng)濃度藥物（10 mL/kg，臨用前用蒸餾水配制成0.16、0.08、0.04 g/mL）。末次給藥24 h后，動(dòng)物麻醉處死，摘取雙側(cè)子宮及卵巢，分別稱(chēng)取兩側(cè)子宮（連帶相應(yīng)的卵巢）的重量，計(jì)算腫脹度，以腫脹度作為炎癥的指標(biāo)。腫脹度=（右側(cè)子宮及卵巢重量-左側(cè)子宮及卵巢重量）/左側(cè)子宮及卵巢重量×100%。右側(cè)子宮福爾馬林固定，常規(guī)切片，HE染色，光鏡下對(duì)子宮進(jìn)行病理組織學(xué)檢查，設(shè)5個(gè)觀察指標(biāo)［4］，并按病變表現(xiàn)的嚴(yán)重程度分為正常、輕度、中度及重度四級(jí)，采用-、+、++、+++表示，評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)及計(jì)分見(jiàn)表1。

1.6 細(xì)菌性感染致慢性盆腔炎大鼠模型的建立

另取大鼠40只，隨機(jī)分為5組，每組8只，混合菌液造模。分組（其中假手術(shù)組8只與化學(xué)性燒傷CPID模型大鼠共用）、給藥方法、觀察指標(biāo)同1.5。造模方法：暴露子宮后，用針頭在右側(cè)子宮內(nèi)膜不同方向劃4條損傷線造成子宮內(nèi)膜損傷，然后在右側(cè)子宮緩慢注射混合菌液0.1 mL，其他步驟同1.5。

1.7 體外抑菌試驗(yàn)

采用肉湯二倍稀釋法［5］，測(cè)定最低抑菌濃度（MIC）。赤母婦炎寧膠囊配制成750 mg生藥/mL的混懸液，以無(wú)菌肉湯進(jìn)行倍比稀釋?zhuān)? mL藥物混懸液+1 mL無(wú)菌肉湯），共10個(gè)濃度：375.00、187.50、93.75、46.88、23.44、11.72、5.86、2.93、1.46、0.73 mg/mL。將稀釋好的藥液和菌液于試管中混勻后于35～37℃孵育培養(yǎng)18～24 h，觀察試管內(nèi)細(xì)菌的生長(zhǎng)情況，根據(jù)美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)（NCCLS）的判斷標(biāo)準(zhǔn)，進(jìn)行結(jié)果判定：①據(jù)液體培養(yǎng)基顏色變化，渾濁度，沉淀等判定；②與陽(yáng)性、陰性對(duì)照對(duì)比判定結(jié)果。藥物陰性對(duì)照：皆為全陰性；液體培養(yǎng)基陰性對(duì)照：皆為全陰性；菌液陽(yáng)性對(duì)照：皆為全陽(yáng)性。以能抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的藥物最高稀釋度為其MIC。

表1 大鼠子宮內(nèi)膜病變程度的觀察指標(biāo)及標(biāo)準(zhǔn)

1.8 抗感染試驗(yàn)

小鼠耳廓腫脹法［6］：取上述小鼠60只，隨機(jī)分為5組，每組12只。設(shè)陰性對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組、赤母婦炎寧膠囊高、中、低劑量組（1.6、0.8、0.4 g/kg，相當(dāng)于生藥12.96、6.48、3.24 g/kg，人擬臨床用量的20、10、5倍）。陰性對(duì)照組給予蒸餾水（10 mL/kg）；陽(yáng)性對(duì)照組給予布洛芬混懸液（10 mL/kg、100 mg/kg）；赤母婦炎寧膠囊高、中、低劑量組分別給予相應(yīng)濃度藥物（10 mL/kg，臨用前用蒸餾水配制成0.16、0.08、0.04 g/mL）。每日灌胃1次，連續(xù)14 d。末次給藥1.5 h后，用2%巴豆油0.1 mL/只涂抹于小鼠右耳致炎，4 h后脫頸椎處死小鼠，齊根剪下兩耳，用9 mm孔徑打孔器分別打下左右耳片，電子天平稱(chēng)重，并計(jì)算腫脹率。腫脹率（%） =［（右耳重量-左耳重量）/左耳重量］×100%。

1.9 鎮(zhèn)痛試驗(yàn)

小鼠醋酸扭體法［7］：另取小鼠60只，分組及給藥方法同1.8。末次給藥1.5 h后，腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2 mL/只。觀察并記錄每只小鼠致痛潛伏期以及致痛后15 min內(nèi)的扭體次數(shù)。

1.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 15.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，大鼠子宮（卵巢）腫脹度、小鼠耳廓腫脹度、致痛潛伏期及扭體次數(shù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)；多組間比較采用單因素方差分析；大鼠子宮病理組織學(xué)病變?cè)u(píng)分結(jié)果為等級(jí)計(jì)數(shù)資料，采用秩和檢驗(yàn)；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 赤母婦炎寧膠囊對(duì)大鼠化學(xué)性燒傷致慢性盆腔炎的作用

2.1.1 對(duì)大鼠化學(xué)性燒傷致CPID造模后子宮和卵巢腫脹度的影響苯酚造模后，模型對(duì)照組大鼠子宮和卵巢腫脹度與假手術(shù)組比較差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），表明造模成功。與模型對(duì)照組比較，赤母婦炎寧膠囊高、中、低劑量和陽(yáng)性對(duì)照組均能明顯減輕苯酚造模后大鼠子宮和卵巢腫脹度，差異均有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），說(shuō)明赤母婦炎寧膠囊對(duì)大鼠化學(xué)性燒傷致CPID造模后子宮（卵巢）腫脹有抑制作用，對(duì)子宮炎癥有抑制作用。見(jiàn)表2。

表2 赤母婦炎寧膠囊對(duì)苯酚造模后大鼠子宮和卵巢腫脹度的影響

表2 赤母婦炎寧膠囊對(duì)苯酚造模后大鼠子宮和卵巢腫脹度的影響

注：與假手術(shù)組比較，△△P＜0.01；與模型對(duì)照組比較，**P＜0.01

組別只數(shù)劑量腫脹度（%）假手術(shù)組模型對(duì)照組陽(yáng)性對(duì)照組赤母婦炎寧膠囊高劑量組赤母婦炎寧膠囊中劑量組赤母婦炎寧膠囊低劑量組888888 0.00 0.00 10.00 mL/kg 12.96 g/kg 6.48 g/kg 3.24 g/kg -0.57±2.15**70.62±26.60△△14.13±8.47**9.05±4.31**6.71±3.78**8.33±3.66**

2.1.2 赤母婦炎寧膠囊對(duì)大鼠化學(xué)性燒傷致慢性盆腔炎子宮病理組織學(xué)的影響子宮病理組織學(xué)檢查中腔壁結(jié)構(gòu)改變、上皮細(xì)胞增生、上皮細(xì)胞變性壞死、慢性炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、內(nèi)膜充血水腫5項(xiàng)指標(biāo)假手術(shù)組與模型對(duì)照組比較，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），表明造模成功。與模型對(duì)照組比較，赤母婦炎寧膠囊高、中、低劑量組和（陽(yáng)性對(duì)照組）大鼠子宮病理組織學(xué)各項(xiàng)指標(biāo)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01），說(shuō)明赤母婦炎寧膠囊對(duì)大鼠化學(xué)性燒傷致CPID造模后子宮和卵巢炎癥有治療作用。見(jiàn)表3。

表3 赤母婦炎寧膠囊對(duì)大鼠化學(xué)性燒傷致慢性盆腔炎的病理組織學(xué)影響（n=8，只）

2.2 赤母婦炎寧膠囊對(duì)大鼠細(xì)菌性感染致慢性盆腔炎的作用

2.2.1 赤母婦炎寧膠囊對(duì)大鼠細(xì)菌性感染致CPID造模后子宮和卵巢腫脹度的影響大鼠細(xì)菌感染造模后，模型對(duì)照組大鼠子宮和卵巢腫脹度與假手術(shù)組比較，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），表明造模成功。與模型對(duì)照組比較，赤母婦炎寧膠囊高、中、低劑量和陽(yáng)性對(duì)照組均能明顯減輕細(xì)菌感染造模后大鼠子宮和卵巢腫脹度，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01），說(shuō)明赤母婦炎寧膠囊對(duì)大鼠細(xì)菌性感染致CPID造模后子宮和卵巢腫脹有抑制作用，對(duì)子宮炎癥有抑制作用。見(jiàn)表4。

表4 赤母婦炎寧膠囊對(duì)細(xì)菌感染造模后大鼠子宮和卵巢腫脹度的影響（x±s）

2.2.2 赤母婦炎寧膠囊對(duì)大鼠細(xì)菌性感染致慢性盆腔炎子宮病理組織學(xué)的影響子宮病理組織學(xué)檢查中腔壁結(jié)構(gòu)改變、上皮細(xì)胞增生、上皮細(xì)胞變性壞死、慢性炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、內(nèi)膜充血水腫5項(xiàng)指標(biāo)假手術(shù)組與模型對(duì)照組比較，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），表明造模成功。與模型對(duì)照組比較，赤母婦炎寧膠囊高、中、低劑量組和陽(yáng)性對(duì)照組大鼠子宮病理組織學(xué)各項(xiàng)指標(biāo)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01），說(shuō)明赤母婦炎寧膠囊對(duì)大鼠細(xì)菌性感染致CPID造模后子宮和卵巢炎癥有治療作用。見(jiàn)表5。

表5 赤母婦炎寧膠囊對(duì)大鼠細(xì)菌性感染致慢性盆腔炎子宮病理組織學(xué)的影響（n=8）

2.3 體外抑菌試驗(yàn)結(jié)果

經(jīng)體外抑菌試驗(yàn)，赤母婦炎寧膠囊對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、白假絲酵母菌和乙型溶血性鏈球菌均有明顯的抑制作用。金黃色葡萄球菌MIC為23.44～46.88 mg/mL，MIC50為23.44 mg/mL；大腸埃希菌MIC為11.72～46.88 mg/mL，MIC50為23.44 mg/mL；銅綠假單胞菌MIC為23.44～93.75 mg/mL，MIC50為46.88 mg/mL；白假絲酵母菌MIC為5.86～23.44 mg/mL，MIC50為11.72 mg/mL；乙型鏈球菌MIC為11.72～23.44 mg/mL，MIC50為23.44 mg/mL。見(jiàn)表6。

2.4 赤母婦炎寧膠囊對(duì)巴豆油致小鼠耳廓腫脹的影響

與陰性對(duì)照組比較，赤母婦炎寧膠囊高、中、低劑量組和布洛芬緩釋片組（陽(yáng)性對(duì)照組）小鼠耳廓腫脹率降低，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。說(shuō)明赤母婦炎寧膠囊可抑制巴豆油致小鼠耳廓腫脹，具有抗感染作用。見(jiàn)表7。

2.5 赤母婦炎寧膠囊對(duì)醋酸致小鼠疼痛的影響

小鼠醋酸扭體試驗(yàn)中，赤母婦炎寧膠囊高、低劑量組小鼠醋酸致痛潛伏期延長(zhǎng)，高、中、低劑量組小鼠扭體次數(shù)減少，陽(yáng)性對(duì)照組可延長(zhǎng)小鼠醋酸致痛潛伏期、減少扭體次數(shù)，與陰性對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01）。說(shuō)明赤母婦炎寧膠囊對(duì)醋酸致小鼠疼痛有抑制作用，具有鎮(zhèn)痛作用。見(jiàn)表8。

表6 赤母婦炎寧膠囊體外抑菌試驗(yàn)結(jié)果

表7 赤母婦炎寧膠囊對(duì)巴豆油致小鼠耳廓腫脹的影響

表7 赤母婦炎寧膠囊對(duì)巴豆油致小鼠耳廓腫脹的影響

與陰性對(duì)照組比較，**P＜0.01

組別只數(shù)劑量（g/kg）腫脹率（%）陰性對(duì)照組陽(yáng)性對(duì)照組赤母婦炎寧膠囊高劑量組赤母婦炎寧膠囊中劑量組赤母婦炎寧膠囊低劑量組12 12 12 12 12 0.00 0.10 12.96 6.48 3.24 22.77±6.06 7.09±3.02**10.54±7.43**12.77±6.29**11.33±7.07**

表8 赤母婦炎寧膠囊對(duì)醋酸致小鼠疼痛的影響

表8 赤母婦炎寧膠囊對(duì)醋酸致小鼠疼痛的影響

注：與陰性對(duì)照組比較，*P＜0.05、**P＜0.01

組別只數(shù)劑量（g/kg）致痛潛伏期（s）扭體次數(shù)（次）陰性對(duì)照組陽(yáng)性對(duì)照組（布洛芬）赤母婦炎寧膠囊高劑量組赤母婦炎寧膠囊中劑量組赤母婦炎寧膠囊低劑量組12 12 12 12 12 0.00 0.10 12.96 6.48 3.24 166.00±46.37 296.21±91.93**225.77±56.39*168.62±50.21 216.86±54.34*23.38±8.36 6.14±3.53**13.92±6.89**17.31±6.61*13.79±7.80**

3 討論

CPID屬于臨床常見(jiàn)病、多發(fā)病，病情較頑固，易反復(fù)發(fā)作，是一種較難治愈的疑難雜癥，嚴(yán)重影響婦女身心健康，給患者造成較大痛苦。長(zhǎng)期以來(lái)，對(duì)于CPID的治療，西醫(yī)藥物主要是根據(jù)藥敏試驗(yàn)選用抗生素為主，對(duì)病原體的殺滅療效確切，但對(duì)細(xì)菌和病原體所導(dǎo)致的一系列病理?yè)p害的改善作用不明顯［8］。目前CPID的造模方法主要有化學(xué)性燒傷［9-10］、異物刺激［11-12］、細(xì)菌感染［13］、機(jī)械損傷加細(xì)菌感染［14-15］四種?；瘜W(xué)性燒傷：苯酚膠漿作為黏堵劑，可造成輸卵管化學(xué)性燒傷，導(dǎo)致輸卵堵塞從而引起盆腔炎；異物刺激：將一小塑料管放置在動(dòng)物子宮內(nèi)，縫合子宮，造成輸卵管堵塞，制作CPID模型；細(xì)菌感染：用單一菌液或者混合菌（多為需氧菌，如金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌和鏈球菌）注入動(dòng)物子宮或輸卵管，從而造成CPID；機(jī)械損傷加細(xì)菌感染：用注射器針頭（磨去針尖）在子宮分叉處朝卵巢方向進(jìn)針并于宮腔內(nèi)來(lái)回抽拉2次（機(jī)械損傷子宮內(nèi)膜組織）后，注入單一或混合細(xì)菌懸液，制作CPID模型。本實(shí)驗(yàn)采用苯酚化學(xué)性燒傷、混合菌加機(jī)械損傷兩種造模方法，造成大鼠CPID的病理變化模型。結(jié)果表明，造模子宮有明顯的炎性腫脹病變，與周?chē)鞴儆袕V泛粘連，子宮腔壁結(jié)構(gòu)破壞，內(nèi)膜充血水腫，上皮細(xì)胞增生、變性壞死并伴有慢性炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)等典型的病理改變。赤母婦炎寧膠囊對(duì)上述病理變化均有較好的改善作用，可減輕子宮和卵巢腫脹度，對(duì)化學(xué)性燒傷及細(xì)菌性感染致大鼠CPID均有較好的治療效果。

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為，CPID主要誘發(fā)感染的因素是病原微生物上行感染，引起盆腔臟器組織的炎癥［16-18］?；颊咄橛邢赂箟嬅洝⒀静克嵬椿騽×业南赂固弁吹劝Y狀，疼痛的解除或改善對(duì)增強(qiáng)治療效果、提高患者的生活質(zhì)量有重要意義。巴豆油作為誘導(dǎo)常見(jiàn)的神經(jīng)源性腫脹炎癥模型，可用來(lái)評(píng)價(jià)其嚴(yán)重程度［19］。小鼠扭體法是通過(guò)化學(xué)物質(zhì)刺激腹腔所致一種非選擇性的外周疼痛模型［20］，類(lèi)似于臨床表現(xiàn)炎性疼痛癥狀，且疼痛部位在下腹，與盆腔炎的疼痛部位相同［21］。本實(shí)驗(yàn)選用了多種常見(jiàn)的盆腔炎致病菌進(jìn)行體外抑菌試驗(yàn)，結(jié)果表明，赤母婦炎寧膠囊對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、白假絲酵母菌和乙型溶血性鏈球菌均有不同程度的抑制效果，有明顯的抑菌作用；小鼠耳廓腫脹試驗(yàn)結(jié)果表明，赤母婦炎寧膠囊能抑制巴豆油致小鼠耳廓腫脹的炎性反應(yīng)，腫脹率明顯降低，有較強(qiáng)的抗感染作用；小鼠醋酸扭體法試驗(yàn)結(jié)果顯示，赤母婦炎寧膠囊可延長(zhǎng)醋酸致痛潛伏期，減少扭體次數(shù)，有很好的鎮(zhèn)痛作用。因此，赤母婦炎寧膠囊治療CPID可能與其抑菌、抗感染、鎮(zhèn)痛作用有關(guān)。

綜上所述，赤母婦炎寧膠囊對(duì)大鼠CPID具有治療作用及較好的抑菌、抗感染、鎮(zhèn)痛作用，本實(shí)驗(yàn)為臨床治療用藥和進(jìn)一步研究提供了依據(jù)。

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Experimental study on the therapeutical effect of Chimufuyanning Capsules on chronic pelvic inflammation in rats

LU XiaojunHE KaiyongPAN WangpingWANG Pinghui
Testing Center for Biosafety,Hubei Food and Drug Administration,Hubei Province,Wuhan430064,China

ObjectiveTo observe the therapeutical effect of Chimufuyanning Capsules on chronic pelvic inflammatory disease rats and its bacteriostasis,anti-inflammation,analgesic action.MethodsThe rat models of chronic pelvic inflammation,including chemical adustum model and bacterial infection model,were replicated to observe the therapeutic effect of Chimufuyanning Capsules.The bacteriostatic action of Chimufuyanning capsule was determined by bacteria suppression experimentin vitrowith staphylococcus aureus,escherichiacoli,pseudomonas aeruginosa,beta-hemolytic streptococci and monilia albicans.The anti-inflammatory effect of Chimufuyanning Capsules was tested in mice with croton oil-induced ear edema.The analgesic effect of Chimufuyanning Capsules was studied with pain model of mice induced by acetic acid.ResultsChimufuyanning Capsules could ameliorate obviously the symptoms of chronic pelvic inflammatory disease both in the chemical adustum model and bacterial infection model rats.Compared with the phenol model control group,Chimufuyanning Capsules reduced uterus swelling,and improved pathologic changes of uterus, the differences were statistically significant(P＜0.05 orP＜0.01).And the growth of staphylococcus aureus,escherichiacoli,pseudomonas aeruginosa,beta-hemolytic streptococci and monilia albicans were significantly inhibited. Chimufuyanning Capsules also had anti-inflammatory activity against croton oil-induced mouse ear swelling compared with negative control group,the difference was statistically significant(P＜0.01).Moreover,the pain reaction latency of mice was increased and the number of stretching induced by acetic acid was reduced compared with negative control group,the differences were statistically significant(P＜0.05 orP＜0.01).ConclusionChimufuyanning Capsules has therapeutical effect on pelvic inflammatory disease in rats and has bacteriostasi,anti-inflammation,analgesic actions.

Chimufuyanning Capsules;Chronic pelvic inflammation;Bacteriostasi;Anti-inflammation;Analgesia

R711.33

A

1673-7210（2015）02（a）-0023-07

2014-07-12本文編輯：任念）

呂曉君（1983-），女，湖北鐘祥人，碩士；研究方向：藥理毒理。