重慶市無(wú)償獻(xiàn)血者人細(xì)小病毒B19的感染狀況研究*

秦偉斐，廖紅梅，譚茜茜，田耘博，黃 霞，李亞斐△

(1.第三軍醫(yī)大學(xué)軍事預(yù)防醫(yī)學(xué)院軍隊(duì)流行病學(xué)教研室，重慶 400038；2.重慶市血液中心 400015)

論著·臨床研究

重慶市無(wú)償獻(xiàn)血者人細(xì)小病毒B19的感染狀況研究*

秦偉斐1，廖紅梅2，譚茜茜2，田耘博2，黃 霞2，李亞斐1△

(1.第三軍醫(yī)大學(xué)軍事預(yù)防醫(yī)學(xué)院軍隊(duì)流行病學(xué)教研室，重慶 400038；2.重慶市血液中心 400015)

目的 了解重慶市無(wú)償獻(xiàn)血者中人細(xì)小病毒B19感染狀況，評(píng)估B19病毒的流行病學(xué)情況，為本市乃至中國(guó)未來(lái)制訂實(shí)施更為科學(xué)合理的輸血安全策略提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。方法用ELISA對(duì)無(wú)償獻(xiàn)血者血液進(jìn)行B19 IgM和IgG抗體篩查。結(jié)果1 104份無(wú)償獻(xiàn)血者血液樣本中，B19 IgM和IgG陽(yáng)性率分別為5.07%和36.68%(P<0.05)。女性B19 IgM抗體陽(yáng)性率高于男性(P<0.05)，而在男性和女性中B19 IgG抗體陽(yáng)性率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。各年齡組中B19 IgM陽(yáng)性率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，B19 IgG陽(yáng)性率隨著年齡升高而升高(P<0.05)。不同血型人群比較、不同季節(jié)獻(xiàn)血者B19 IgM和IgG陽(yáng)性率比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、HIV陽(yáng)性樣本與陰性樣本中B19 IgM、B19 IgG陽(yáng)性率比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論重慶市獻(xiàn)血者中，仍有少部分人群感染B19病毒，在尚未開(kāi)展B19病毒篩查的情況下，存有輸血傳播該病毒的風(fēng)險(xiǎn)。

獻(xiàn)血者；細(xì)小病毒B19，人；抗體；流行病學(xué)

人細(xì)小病毒B19(human parvovirus B19，HPVB19或B19)是細(xì)小病毒屬中惟一與人類(lèi)疾病有密切關(guān)系并能使人致病的病毒[1]。1975年澳大利亞Cossart在乙型肝炎患者血清樣本中，在電子顯微鏡下觀察到B19病毒顆粒。1981年首次證實(shí)B19與人類(lèi)鐮狀細(xì)胞貧血患者發(fā)生再生障礙危象有關(guān)，人們逐漸認(rèn)識(shí)到B19病毒廣泛分布，可通過(guò)呼吸道分泌物(或黏液和飛沫)、輸注血液和血液制品傳播[2]，尤其對(duì)于長(zhǎng)期輸注血液及制品的患者存在潛在的危險(xiǎn)。B19病毒感染通常無(wú)癥狀表現(xiàn)，但有研究證實(shí)該病毒的感染與成人關(guān)節(jié)炎、幼兒傳染性紅斑、孕婦的胎兒水腫和宮內(nèi)死胎等疾病相關(guān)，尤其對(duì)于免疫缺陷的人群，可以造成B19病毒的持續(xù)性感染[3]。輸血也是B19病毒感染的主要傳播途徑。為了解重慶地區(qū)無(wú)償獻(xiàn)血人群中B19病毒感染及流行情況，作者用ELISA法對(duì)獻(xiàn)血者進(jìn)行B19 IgM和IgG抗體篩查，以期為今后輸血和血液制品篩查策略的制訂提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 抽取2012年10月至2013年9月重慶市無(wú)償獻(xiàn)血者血液樣本1 104份，每位獻(xiàn)血者留取無(wú)分離膠EDTA抗凝5 mL和有分離膠8 mL EDTA抗凝血各1管[無(wú)分離膠的用于乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、HIV檢測(cè)，有分離膠的用于B19檢測(cè)]，各樣品管的離心和保存均按相應(yīng)的檢測(cè)試劑說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行操作。本研究的無(wú)償獻(xiàn)血者的一般情況見(jiàn)表1。

表1 無(wú)償獻(xiàn)血者的一般情況

1.2 試劑與設(shè)備 主要試劑:HBsAg檢測(cè)(北京萬(wàn)泰、生物梅里埃)，抗-HCV檢測(cè)(上海科華、美國(guó)強(qiáng)生)，抗-HIV檢測(cè)(上?？迫A、生物梅里埃)。B19 IgG/IgM檢測(cè)采用德國(guó)維潤(rùn)賽潤(rùn)公司生產(chǎn)的賽潤(rùn)ELISA classic細(xì)小病毒B19 IgG/IgM抗體檢測(cè)試劑盒。細(xì)小病毒B19 IgM和IgG抗體試劑盒的批號(hào)分別為：SMG.CU/SEE.FX和SBD.DC/SDD.EY。主要檢測(cè)設(shè)備：RSP150型全自動(dòng)樣品處理儀(瑞士帝肯)，F(xiàn)AME24/20型全自動(dòng)酶聯(lián)免疫分析系統(tǒng)(瑞士哈米爾頓)，EXL808酶標(biāo)儀(美國(guó)BIO-TEK)和TBL4000離心機(jī)(湖南湘儀)。

1.3 結(jié)果判斷 所有檢測(cè)均按照試劑說(shuō)明書(shū)操作。本實(shí)驗(yàn)室將HBsAg、抗-HCV、抗-HIV檢測(cè)結(jié)果S/Co≥0.8即判為有反應(yīng)性，其中，1.0>S/Co≥0.8之間設(shè)置為灰區(qū)，雙試劑S/Co均≥0.8，直接判為陽(yáng)性，雙試劑S/Co均<0.8，直接判為陰性。B19 IgM抗體濃度：<13 U/mL為陰性、>17 U/mL為陽(yáng)性，13～17 U/mL為可疑，不記入陽(yáng)性。B19 IgG抗體濃度：<35 U/mL為陰性、>45 U/mL為陽(yáng)性，35～45 U/mL為可疑，不記入陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析處理，率的比較采用χ2檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 獻(xiàn)血者中B19 IgM和IgG陽(yáng)性率 1 140份無(wú)償獻(xiàn)血者血液樣本中，B19 IgM陽(yáng)性56份，陽(yáng)性率為5.07%；B19 IgG陽(yáng)性405份，陽(yáng)性率為36.68%；二者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。IgM、IgG雙陽(yáng)性21份(1.90%)，IgM、IgG雙陰性664份(60.14%)，見(jiàn)表2。

表2 無(wú)償獻(xiàn)血者中B19 IgM和IgG抗體檢測(cè)結(jié)果分布

2.2 獻(xiàn)血者中B19病毒檢測(cè)結(jié)果的人群特點(diǎn) 性別比較：在B19 IgM抗體中，女性IgM陽(yáng)性率為7.52%，男性陽(yáng)性率為3.46%，女性高于男性(χ2=9.045，P=0.003)。在B19 IgG抗體中，女性IgG陽(yáng)性率為39.64%，男性陽(yáng)性率為34.74%，女性與男性比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=2.732，P=0.098)。不同年齡段比較：不同年齡段B19 IgM陽(yáng)性率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.827，P=0.843)；B19 IgG陽(yáng)性檢各年齡組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=118.324，P=0.000)，陽(yáng)性率隨著年齡增長(zhǎng)而增加。不同文化程度人群比較：B19 IgM陽(yáng)性率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=2.731，P=0.435)；而B(niǎo)19 IgG陽(yáng)性率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=32.941，P<0.001)，隨著文化程度的降低，其感染率呈增長(zhǎng)趨勢(shì)。不同血型人群比較：B19 IgM陽(yáng)性率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.245，P=0.970)；B19 IgG陽(yáng)性率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.609，P=0.894)。見(jiàn)表3。

2.3 獻(xiàn)血者中B19病毒檢測(cè)結(jié)果的季節(jié)特點(diǎn) B19 IgM陽(yáng)性檢出主要分布于1月(7.41%)、4月(7.30%)、6月(6.98%)、8月(6.74%)、9月(9.33%)、11月(8.96%)、12月(6.67%)。B19 IgG各月均表現(xiàn)出較高的陽(yáng)性率，其中,8月最高(41.57%)，12月最低(25.33%)。按照3～5月為春季，6～8月為夏季，9～11月為秋季，12～2月為冬季進(jìn)行季節(jié)劃分，B19 IgM和B19 IgG季節(jié)性陽(yáng)性率比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)意義(P>0.05)。見(jiàn)圖1和表4。

2.4 獻(xiàn)血者樣本中B19 IgM、IgG分別與HBV、HCV、HIV共同感染情況 所有無(wú)償獻(xiàn)血者血液樣本均經(jīng)過(guò)HBsAg、抗-HCV、抗-HIV 兩種不同廠家的ELISA試劑檢測(cè)，分別與B19 IgM、IgG共感染陽(yáng)性樣本共352份，均為陰性的樣本752份。經(jīng)過(guò)B19 IgM和IgG檢測(cè)，與3項(xiàng)ELISA結(jié)果共感染的352份樣本中，B19 IgM陽(yáng)性14份(3.98%)，B19 IgG陽(yáng)性129份(36.65%)。其中，與B19 IgM共感率分別為HIV 5.26%、HBV 4.03%、HCV 2.63%，三者比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=1.047，P=0.623)。與B19 IgG共感率分別為HCV 43.86%、HBV 33.06%、HIV 33.33%，三者比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=3.779，P=0.151)。在3項(xiàng)ELISA結(jié)果均為陰性的752份樣本中，B19 IgM陽(yáng)性42份(5.59%)、B19 IgG陽(yáng)性276份(36.70%)；均陰性樣本與共感染陽(yáng)性樣本比較，B19 IgM陽(yáng)性率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=1.287，P=0.257)，B19 IgG陽(yáng)性率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.000，P=0.986)，見(jiàn)表5。

表3 獻(xiàn)血者中B19 IgM和IgG抗體陽(yáng)性率人群特點(diǎn)[n(%)]

圖1 B19 IgM與IgG陽(yáng)性率在各月份的分布情況

表4 不同季節(jié)中B19 IgM和IgG抗體陽(yáng)性率分布情況[n(%)]

表5 B19 IgM、IgG陽(yáng)性分別與HBV、HCV、HIV共感情況[n(%)]

3 討 論

細(xì)小病毒B19是臨床上人感染細(xì)小病毒最重要的病原體，能夠在人紅細(xì)胞中進(jìn)行復(fù)制，B19病毒的致病機(jī)制逐漸成為國(guó)內(nèi)外學(xué)者研究方向。作為一個(gè)重要的人類(lèi)病原體，越來(lái)越多的研究發(fā)現(xiàn)，B19感染可以累及多臟器，導(dǎo)致胎兒流產(chǎn)和在免疫功能低下的患者中引起多種疾病，因而對(duì)B19感染進(jìn)行診斷和流行病學(xué)監(jiān)測(cè)很有必要，這也需要在常規(guī)醫(yī)療中，如輸血、移植等醫(yī)學(xué)領(lǐng)域開(kāi)展簡(jiǎn)單有效的篩查診斷，預(yù)防B19病毒的傳播。

本研究的無(wú)償獻(xiàn)血者血液樣本中，男性占60.24%，年齡結(jié)構(gòu)主要是18～45歲的中青年，占85.96%，從事自由職業(yè)和其他職業(yè)者獻(xiàn)血比重大，從地域結(jié)構(gòu)看，79.35%為重慶市人，主城區(qū)略高于郊縣。B19病毒血清學(xué)檢測(cè)包括抗原和抗體的檢測(cè)。其中，抗體檢測(cè)是目前臨床診斷及流行病學(xué)調(diào)查B19感染的主要方法。在被檢人群中，B19 IgM抗體陽(yáng)性常標(biāo)志著急性感染，B19 IgG抗體陽(yáng)性指示既往感染。B19 IgM抗體常在患者臨床癥狀后3 d出現(xiàn)，發(fā)病后約30～60 d抗體滴度和陽(yáng)性率開(kāi)始下降[4]，B19 IgG抗體通常在發(fā)病后7 d出現(xiàn)，持續(xù)數(shù)年甚至終身。B19的持續(xù)性感染已經(jīng)被多個(gè)國(guó)家和地區(qū)報(bào)道，B19 IgG抗體陽(yáng)性率在不同地區(qū)和時(shí)間呈不同的流行趨勢(shì)[5]。本研究結(jié)果顯示，獻(xiàn)血者中B19 IgM陽(yáng)性率為5.07%，B19 IgG陽(yáng)性率為36.68%；二者陽(yáng)性率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。鄭優(yōu)榮等[6]報(bào)道廣州地區(qū)獻(xiàn)血人群中B19 IgM和IgG陽(yáng)性率分別為1.90%%和38.60%，臺(tái)灣地區(qū)B19 IgM和IgG陽(yáng)性率分別為0.35%和32.80%，吉林地區(qū)B19 IgG陽(yáng)性率為55.43%[7]；有英國(guó)學(xué)者報(bào)道B19 IgG抗體陽(yáng)性率為67.80%；而非洲西部IgG陽(yáng)性率可達(dá)82.30%[8]；因此，重慶地區(qū)獻(xiàn)血者中B19病毒既往感染率處于相對(duì)較低水平，而急性感染率高于中國(guó)其他部分地區(qū)。提示本市仍有部分處于B19急性感染期的獻(xiàn)血者進(jìn)行獻(xiàn)血。

B19病毒抗體在普通人群中廣泛存在，多數(shù)人在感染病毒后，沒(méi)有癥狀。在病毒血癥早期，血液中病毒含量很高，能傳播病毒引起成人關(guān)節(jié)炎、孕婦畸胎或流產(chǎn)等疾病。有病例對(duì)照研究發(fā)現(xiàn)，有反復(fù)流產(chǎn)史的妊娠婦女B19感染率達(dá)84%，而正常妊娠婦女的感染率僅16.7%[9]，這可能與婦女在妊娠期間內(nèi)分泌改變及免疫功能下降有關(guān)。B19感染常引起關(guān)節(jié)炎和關(guān)節(jié)痛，女性(60%～80%)多于男性。多在2周內(nèi)自行恢復(fù)，持續(xù)數(shù)月或數(shù)年者均系女性，并認(rèn)為與HLA-DR1缺乏有關(guān)。本研究也同樣發(fā)現(xiàn)在不同性別的獻(xiàn)血者中，女性B19 IgM陽(yáng)性率為7.52%，男性陽(yáng)性率為3.46%，女性高于男性。B19 IgG陽(yáng)性率女性也高于男性。與國(guó)內(nèi)吉林地區(qū)[7]、臨沂地區(qū)[10]報(bào)道一致。這是否與女性的免疫機(jī)制有關(guān)，還待進(jìn)一步研究。

B19病毒感染一年四季均可發(fā)生，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示重慶地區(qū)四季感染率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。B19疾病呈世界性分布，其病毒可引起局部流行和暴發(fā)性流行。其感染率高，大部分B19急性感染發(fā)生在學(xué)齡兒童和青少年[11]。本研究結(jié)果顯示，急性感染率高峰為18～28歲年齡段，并隨年齡增長(zhǎng)有所減低，這也說(shuō)明本地區(qū)的獻(xiàn)血者比較年輕。既往感染率隨年齡增長(zhǎng)而增高，而其他學(xué)者的所有研究幾乎都得出了陽(yáng)性率隨年齡增長(zhǎng)而增高。重慶市獻(xiàn)血人群中B19既往感染率隨著文化程度的降低呈增長(zhǎng)趨勢(shì)。本研究結(jié)果顯示獻(xiàn)血者不同血型間B19 IgM和IgG陽(yáng)性率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，與國(guó)內(nèi)其他學(xué)者報(bào)道結(jié)果不符[12]。

在獻(xiàn)血者中，存在一部分HBV、HCV、HIV病毒攜帶者，如B19感染免疫缺陷患者，能造成嚴(yán)重的慢性貧血等。有文獻(xiàn)報(bào)道B19病毒在乙型肝炎相關(guān)肝病中有較高的感染率[13]，HIV感染人群B19病毒遠(yuǎn)期和近期感染率明顯高于健康人群[14]。但在本實(shí)驗(yàn)研究的HBV、HCV、HIV共有陽(yáng)性與3項(xiàng)均陰性的結(jié)果中，B19病毒的感染情況無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可能是因?yàn)檫@部分獻(xiàn)血者大多是青年人，屬于健康病毒攜帶者。通過(guò)對(duì)HBV、HCV、HIV病毒攜帶者中B19 IgM和IgG陽(yáng)性率進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，B19感染差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，而在HIV急性感染中B19 IgM陽(yáng)性率最高，這與本地區(qū)無(wú)償獻(xiàn)血者中HIV感染率呈逐年上升趨勢(shì)，且HIV感染者主要是小于30歲年齡段人群[15]有關(guān)。

綜上所述，重慶市無(wú)償獻(xiàn)血者中，部分人群存在B19病毒急性感染和既往感染。目前，國(guó)家還沒(méi)有制訂針對(duì)獻(xiàn)血者血液及血液制品中人細(xì)小病毒B19的篩查策略，本研究為輸血安全和血液制品安全管理政策的制訂提供了一定的理論依據(jù)。

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Study on the infection status of human parvovirus B19 among unpaid blood donors in Chongqing*

QinWeifei1，LiaoHongmei2,TanXixi2,TianYunbo2,HuangXia2,LiYafei1△

(1.DepartmentofEpidemiology,CollegeofPreventiveMedicine,ThirdMilitaryMedicalUniversity，Chongqing400038，China；2.ChongqingBloodCenter，Chongqing400015,China)

Objective To provide basic datas for enriching the scientific and reasonable security strategy of blood transfusion in Chongqing,even for the national use in the future,we studied the infection status of human parvovirus B19(B19V) among unpaid blood donors and evaluated the prevalence of B19V in Chongqing.MethodsB19 IgM and B19 IgG antibody from blood donors were detected by the method of enzyme linked immunosorbent assay.ResultsAmong 1 104 blood samples of blood donors,the positive rate of B19 IgM was 5.07%,and the positive rate of B19 IgG was 36.68%,there was a significant difference between them(P<0.05).The positive rate of B19 IgM from females was higher than males′(P<0.05),but there was no statistical difference for the positive rate of B19 IgG between different gender(P>0.05).Comparing with various age groups,There was still no significant difference of the positive rate of B19 IgM among them(P>0.05),but the positive rates of B19 IgG increased with age increasing(P<0.05).The different blood types or collection seasons,and the statistical difference were not established in these two conditions (P>0.05).And there was no significant difference for positive rate of B19 IgM between positive samples and negative samples of HBV,HCV,HIV,the results of B19 IgG also were such(P>0.05).ConclusionAmong blood donors in Chongqing,although there was no screening for B19V,we still found infections by B19V.So this may illustrated that the risk of blood transfusion by B19V was still existed.

blood donors；parvovirus B19,human；antibody；epidemiology

10.3969/j.issn.1671-8348.2015.35.022

重慶市衛(wèi)生局醫(yī)學(xué)科研基金資助項(xiàng)目(2012-2-482)。

:秦偉斐(1981-),檢驗(yàn)師,在讀碩士,主要從事血液傳染病學(xué)研究?！?/p>

，Tel：(023)68752293；E-mail：liyafei2008@hotmail.com。

R18;R373

A

1671-8348(2015)35-4968-04

2015-06-16

2015-08-24)