用于紅花注射液生產的紅花藥材吸光度的質量標準研究

潘紅炬胡 美董 禮吳建國李 蓉胡 敏衛(wèi)天喜史琳莉

（1.廣東省佛山市華潤順峰藥業(yè)有限公司，廣東 佛山 528000；2.雅安三九藥業(yè)有限公司，四川 雅安 625000）

·實驗報告·

用于紅花注射液生產的紅花藥材吸光度的質量標準研究

潘紅炬1胡 美2△董 禮2吳建國2李 蓉2胡 敏2衛(wèi)天喜2史琳莉2

（1.廣東省佛山市華潤順峰藥業(yè)有限公司，廣東 佛山 528000；2.雅安三九藥業(yè)有限公司，四川 雅安 625000）

目的建立適用于紅花注射液生產的紅花原料吸光度的質量標準。方法采用紫外分光光度法，追蹤紅花注射液生產過程吸光度指標的變化趨勢，同時建立紅花原料吸光度檢測方法，并追蹤多批2012年至2014年紅花原料吸光度質量情況，建立紅花原料的吸光度控制標準。結果紅花注射液質量標準中檢測的吸光度指標，在工藝過程中不斷下降；近3年紅花原料吸光度波動較??；當紅花原料吸光度大于0.35時，可用于紅花注射液的生產。結論紅花原料吸光度標準的建立，可從原料源頭控制質量，從而保證紅花注射液成品吸光度質量穩(wěn)定。

紅花注射液 藥材 吸光度

紅花注射液具有活血化瘀、消腫止痛的功效，主要用于治療閉塞性腦血管疾病、冠心病、心肌梗死、脈管炎，臨床上對高脂血癥、糖尿病并發(fā)癥、月經不調、類風濕關節(jié)炎等疾病，有良好的輔助治療作用［1］。2012年11月7日，國家食品藥品監(jiān)督管理局頒布執(zhí)行了紅花注射液質量標準［2］（WS3-B-3825-98-2012）。該標準的質量控制項目中，有吸光度控制項，要求成品在（267± 1）nm下檢測，吸光度不低于0.5。為控制該指標質量穩(wěn)定，需要對該指標在生產工藝中的變化以及原料本身的質量進行認識，并制定相應的質量標準。紅花注射液原料為菊科植物紅花（Carthamus tinctorius L.）。紅花藥材為活血化瘀的主要中藥之一，用于治療冠心病、腦血栓等心腦血管疾?。?］。紅花藥材國家標準中也對吸光度進行了控制［4］，但該標準控制的吸光度波長為518 nm，與紅花注射液吸光度波長不一致，不能直觀反映用于紅花注射液的紅花藥材質量。本文將從紅花注射液工藝過程吸光度變化進行跟蹤，建立紅花藥材吸光度檢測方法，從而制定適合紅花注射液生產的紅花藥材吸光度標準，為企業(yè)的內控標準制定提供依據。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 中藥中試平臺提取自動化系統(tǒng)（浙遠自動化工程技術有限公司）、安瓿聯(lián)動灌封中試系統(tǒng)（楚天科技股份有限公司）、紫外-可見分光光度計（島津UV-2600）、電子天平（Satarius，BS244S）、高速中藥粉碎

△通信作者（電子郵箱：humei@ya999.com）機（XFB-200，吉首市中誠制藥機械廠）；水為純化水。

1.2 藥材 紅花藥材（新疆，吉木薩爾，雅安三九藥業(yè)紅花GAP基地），每年樣品各取5批。2012年至2014年紅花（7月采收），曬干，凈選后真空包裝，放于4℃冰箱冷藏保存。標本存放于雅安三九藥業(yè)有限公司，標本存放室。

1.3 工藝過程吸光度變化 監(jiān)測點根據2012年國家食品藥品監(jiān)督管理局頒布的紅花注射液質量標準（WS3-B-3825-98-2012）中制法，選擇10個關鍵質量監(jiān)測點，見表1。

表1 紅花注射液生產過程關鍵監(jiān)控點

1.4 檢測方法 取監(jiān)控加工藥液，用純化水將藥液稀釋至0.5 g/mL生藥量濃度，再用1%鹽酸調pH至（7.0±0.1），過濾，取續(xù)濾液，作供試品。按照紅花注射液質量標準（WS3-B-3825-98-2012）吸光度檢測項下方法，檢測供試品吸光度，記錄，即得。

1.5 藥材吸光度方法建立 1）檢測法。取紅花藥材置硅膠干燥器中干燥24 h，研成細粉［4］。取藥粉約2.50 g，分別置三角燒瓶中，精密加水50 mL，稱定質量。連接冷凝管，置沸水浴中，加熱2 h，取出放冷，稱定質量，以水補足減失質量。過濾，精密量取續(xù)濾液2 mL置500 mL容量瓶中，加水至刻度，搖勻，作為供試品溶液。照紫外-可見分光光度法，以水為空白，（267±1）nm下，測定供試品（267±1）nm處吸光度，記錄，即得。2）重復性實驗。取紅花藥材細粉6份，照1）項下第1步檢測法測定吸光度，計算RSD為1.87%，表明方法重復性良好。3）穩(wěn)定性實驗。取重復性試驗后樣，于0 h、2 h、4 h、8h、24 h照1）項下第1步檢測法測定吸光度，計算RSD為0.4%，表明樣品在24 h內穩(wěn)定。

1.6 藥材質量檢測 見圖1。取紅花藥材，照1.6第1步檢測法測定吸光度，267 nm處為紅花中黃酮類成分特征吸收峰。

圖1 紅花藥材提取液紫外吸收光譜（200~300 nm）

2 結 果

2.1 工藝過程吸光度變化 見圖2。在中試平臺，按紅花注射液標準制法生產3批紅花注射液，檢測10個工藝點樣品吸光度，以工藝點為橫坐標，吸光度為縱坐標作圖。結果示紅花注射液生產過程，吸光度逐漸下降，未出現上升，說明工藝過程不會造成對（267±1）nm吸光度有貢獻的化學成分增加；要保證產品吸光度質量，控制紅花藥材吸光度是關鍵控制點之一。

圖2 紅花注射液工藝過程吸光度變化規(guī)律（n=3）

2.2 3年內紅花藥材質量檢測 見表2。結果示2012年、2013年、2014年 3年內紅花藥材吸光度值在0.37～0.40之間，吸光度批間波動較小。

2.3 近3年藥材吸光度質量控制分析 見圖3。結果示最近3年藥材吸光度質量穩(wěn)定，均在平均值±2δ范圍內；表明GAP基地生產的紅花藥材吸光度質量穩(wěn)定。

表2 3年紅花藥材吸光度檢測結果

圖3 近3年紅花藥材吸光度質量控制圖

3 討 論

關于（267±1）nm處吸光度質量控制的意義，王常銘等［5］在紅花注射液質量標準的研究中通過紅花注射液對ADP誘導家兔血小板聚集影響的實驗已經證實——紅花注射液在 （267±1）nm處吸光度能夠反映紅花注射液的內在質量，因此選擇（267±1）nm處吸光度作為紅花藥材的控制標準，具有質量控制意義。

紅花注射液中的黃酮類成分為有效成分［6］。大多數黃酮類化合物分子中存在桂皮?；捅郊柞；M成的交叉共軛體系，其紫外光譜200~400 nm的區(qū)域內存在兩個紫外吸收帶，峰帶Ⅰ （300~400 nm）和峰帶Ⅱ（220~300 nm）［7］。說明紅花注射液質量標準中 （267± 1）nm吸光度控制，實際是控制的黃酮類及其他具有苯甲?；牡幕瘜W成分含量。

研究以 （267±1）nm吸光度追蹤工藝過程中化學成分的變化，發(fā)現在整個工藝過程中，未出現吸光度的升高，說明在工藝過程中對（267±1）nm吸光度有貢獻的化學成分無顯著產生，提示原料的吸光度質量將決定紅花注射液成品的吸光度質量，因此控制原料的吸光度穩(wěn)定和質量下限，將有助于保證紅花注射液成品質量。

檢測2012年至2014年紅花藥材吸光度，顯示紅花藥材年內批間波動較?。槐容^最近3年藥材吸光度水平，顯示近3年藥材吸光度無顯著性差異 （P＞0.05）；根據近3年的15批紅花藥材吸光度質量作質量控制圖，發(fā)現15批原料質量波動都在質量警戒范圍（±2δ）；結合工藝過程吸光度的損失率，認為原料吸光度應不低于0.35，能保證紅花注射液成品吸光度質量合格。

綜上研究和討論，本研究建立紅花藥材吸光度檢測方法及控制限度，可作為企業(yè)生產紅花注射液的內控標準，也可作為評價紅花藥材質量的依據。

［1］ 田代華.實用中藥辭典［M］.上卷.北京：人民衛(wèi)生出版社，2002：812.

［2］ 中國食品藥品監(jiān)督管理局.WS3-B-3825-98-2012紅花注射液質量標準［S］.2012.

［3］ 武永剛，李雪瑩，王蘇麗，等.紅花黃色素化學成分及對心腦血管作用研究進展［J］.齊魯藥事，2011，30（8）：481-484.

［4］ 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（2010版一部）［M］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：141.

［5］ 王常銘，竇愛蘭，王天玲，等.紅花注射液質量標準的研究［J］.中成藥研究，1982，5（1）：17-19.

［6］ 劉倩，陳晨，戴忠，等.紅花注射液有效成分的確定及不同廠家中量效關系的比較［J］.藥物分析雜志，2012，32（7）：1158.

［7］ 姚新生.天然藥物化學［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2001：184-186.

R289.5

A

1004-745X（2015）07-1197-03

10.3969/j.issn.1004-745X.2015.07.026

2015-01-05）