丹參山楂提取物預(yù)防大鼠高脂血癥形成的藥理研究

劉 瑩，李瑞霞，張 杰

丹參山楂提取物預(yù)防大鼠高脂血癥形成的藥理研究

劉 瑩1，李瑞霞2，張 杰2

目的 觀察口服丹參山楂提取物對(duì)預(yù)防大鼠高脂血癥形成的影響。方法 取雄性SD大鼠58只，按血清總膽固醇(TC)水平進(jìn)行分層分組，正常對(duì)照組；高脂模型組；丹參山楂提取物小劑量組(40 mg/kg)；丹參山楂提取物中劑量組(80 mg/kg)；丹參山楂提取物大劑量組(160 mg/kg)；血脂康組(100 mg/kg)。各個(gè)治療組連續(xù)給藥17 d ，從第4天開(kāi)始，除正常對(duì)照組外，其余各組大鼠每日以10 mL/kg體積灌服脂肪乳劑。在實(shí)驗(yàn)第18天，測(cè)定所有大鼠血清TC、三酰甘油(TG)和高密度脂蛋白(HDL-C)，計(jì)算低密度脂蛋白(LDL-C)值；同時(shí)取出肝臟稱(chēng)重，并進(jìn)行病理學(xué)檢查。結(jié)果 大鼠連續(xù)14 d灌服脂肪乳劑后，可形成高脂血癥和肝脂肪變，在給脂肪乳劑時(shí)給予丹參山楂提取物(消瘀降脂膠囊原料藥)，則可明顯減少大鼠血清TC、TG、LDL-C、TC/HDL-C比值及肝重量系數(shù)的增加，防止HDL-C的降低及肝脂肪變的形成。結(jié)論 給大鼠連續(xù)灌服丹參山楂提取物后，可明顯抑制高脂血癥和肝脂肪變的形成。

高脂血癥；丹參山楂提取物；大鼠；脂肪乳劑；肝脂肪變

丹參和山楂提取物的主要成分為丹參總酚酸和山楂總?cè)扑?，系貴陽(yáng)新天藥業(yè)股份有限公司消瘀降脂膠囊的原料藥，該品種來(lái)自上海名老中醫(yī)陳惠林教授之經(jīng)驗(yàn)方，其臨床適應(yīng)證為高脂血癥。以下為藥品研發(fā)期間大鼠模型上的藥理研究，旨在評(píng)價(jià)丹參山楂提取物對(duì)預(yù)防高脂血癥的作用。

1 材料與方法

1．1 受試藥物 丹參山楂提取物(消瘀降脂膠囊原料藥)由蘇州中藥研究所提供。將丹參水溶性總酚酸提取物和山楂總?cè)扑崽崛∥锇?5∶35配比稱(chēng)樣，充分研細(xì)后，用蒸餾水配制成0．4%、0．8%和1．6%濃度的混懸液，供實(shí)驗(yàn)所用。

1．2 陽(yáng)性對(duì)照藥物 血脂康膠囊，由北京北大維信生物科技有限公司生產(chǎn)，批準(zhǔn)文號(hào)：(95)衛(wèi)藥準(zhǔn)字Z-94號(hào)(0000114，0．3 g/粒)。用蒸餾水配制成1%濃度的混懸液供實(shí)驗(yàn)所用。

1．3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 雄性SD大鼠58只，體重165．2 g±18．4 g，由蘇州大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供[合格證：蘇動(dòng)(環(huán))97020，蘇動(dòng)(質(zhì))97018]。

1．4 生化試劑 膽固醇，豬油，3號(hào)膽鹽。甲硫氧嘧啶(國(guó)營(yíng)武進(jìn)縣制藥廠，批號(hào)：981216)。血清總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)和高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)測(cè)定試劑盒，由東甌生物工程公司提供，批號(hào)分別為200015008、200015034、20001401。

1．5 方法[1，2]取雄性大鼠58只，在實(shí)驗(yàn)室適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后，用毛細(xì)玻璃管由大鼠眼眶靜脈取血，測(cè)定血脂含量，按血清TC水平進(jìn)行分層分組：正常對(duì)照組，高脂模型組，丹參山楂提取物小劑量組(40 mg/kg)，丹參山楂提取物中劑量組(80 mg/kg)，丹參山楂提取物大劑量組(160 mg/kg)，血脂康組(100 mg/kg)。各給藥組均以10 mL/kg體積計(jì)算用藥量，于09：00～10：00灌服給藥；正常對(duì)照組和高脂模型組給予等體積的蒸餾水。連續(xù)灌服3 d后，除正常對(duì)照組外，其余各組大鼠13：00～14：00以10 mL/kg體積灌服脂肪乳劑，連續(xù)灌服14 d[3]。

實(shí)驗(yàn)第18天，在各組大鼠禁食15 h后，用戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉，由腹主動(dòng)脈取血，分離血清后分別按試劑盒方法測(cè)定血清TC、TG和HDL-C，LDL-C。取出肝臟稱(chēng)重，計(jì)算肝重量系數(shù)；肝組織稱(chēng)重后用10%甲醛溶液固定，進(jìn)行病理學(xué)檢查[4]。

2 結(jié) 果

2．1 對(duì)血脂的影響 (見(jiàn)表1) 高脂模型組大鼠連續(xù)給予脂肪乳劑14 d后，血清TC、TG、LDL-C及TC/HDL-C均明顯增加，HDL-C降低，與正常對(duì)照組相比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0．01)。若在給脂肪乳劑的同時(shí)，給予丹參山楂提取物(40～160)mg/kg，可不同程度地阻斷大鼠高脂血癥的形成。與高脂模型組相比，各劑量組血清TC、TG、LDL-C及TC/HDL-C均降低，中劑量組有明顯降低血清TG的作用(P<0．01)，大劑量可使血清TC降低(P<0．05)，TG和TC/HDL-C明顯降低(P<0．01)。給大鼠中、大劑量丹參山楂提取物對(duì)升高HDL-C也有明顯作用(P<0．01)，且整體治療效果優(yōu)于血脂康。

組別nTC(mmol/L)TG(mmol/L)HDL-C(mmol/L)LDL-C(mmol/L)TC/HDL-C肝重量系數(shù)(g/100g)正常對(duì)照組10 1.701±0.2602)0.245±0.0932)1.072±0.1872) 0.526±0.1442) 1.599±0.1232) 3.183±0.2032)高脂模型組103.595±0.7420.660±0.2530.546±0.1082.749±0.8046.817±1.8553.828±0.269小劑量組(40mg/kg)83.456±0.8160.499±0.1700.639±0.1592.590±0.8145.632±1.6213.791±0.214中劑量組(80mg/kg)103.473±0.8590.362±0.1122)0.698±0.1431)2.475±1.0485.225±2.0333.741±0.207大劑量組(160mg/kg)102.996±0.4781)0.366±0.1722)0.638±0.0631)2.192±0.5074.758±1.0472)3.671±0.226血脂康組(100mg/kg)103.429±0.6470.353±0.1292)0.634±0.1522.635±0.6295.666±1.7573.531±0.258 與高脂模型組相比,1)P<0.05,2)P<0.01。

2．2 對(duì)肝重量系數(shù)和肝脂肪變的影響 高脂模型組大鼠的肝重量系數(shù)明顯較正常對(duì)照組高(P<0．01)，病理學(xué)檢查可見(jiàn)肝臟有彌漫性脂肪空泡。各治療組肝重量系數(shù)有一定的降低趨勢(shì)，肝脂肪變程度也明顯減輕，部分動(dòng)物未見(jiàn)有明顯的肝脂肪變，但大劑量丹參山楂提取物對(duì)預(yù)防肝脂肪變與中劑量相比未見(jiàn)有更好的作用，血脂康組與高脂模型組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(見(jiàn)表2)。

表2 丹參山楂提取物預(yù)防大鼠肝脂肪變病理檢查 例

3 討 論

高血脂與動(dòng)脈粥樣硬化等心血管疾病的病理進(jìn)程密切相關(guān)，血脂異常是冠心病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，加之現(xiàn)代人飲食結(jié)構(gòu)的改變，共同促進(jìn)了調(diào)血脂藥物的需求。

山楂葉黃酮對(duì)高脂血癥大鼠的脂質(zhì)代謝紊亂有明顯的調(diào)節(jié)作用，對(duì)高脂血癥血液高黏狀態(tài)也有顯著的調(diào)節(jié)作用，可防治動(dòng)脈粥樣硬化[5，6]。高脂血癥小鼠模型[7]和低密度脂蛋白受體基因敲除小鼠[8]上也發(fā)現(xiàn)，山楂能調(diào)節(jié)血脂代謝，具有明顯的降血脂和預(yù)防動(dòng)脈硬化作用。丹參提取物能有效調(diào)節(jié)高脂地鼠的糖脂代謝[9]，丹參脂溶性成分對(duì)心肌細(xì)胞缺氧缺糖損傷具有顯著的保護(hù)作用[10]。丹參山楂合用具有健脾益腎、燥濕化痰、活血化瘀、降脂化濁的功效，具有改善血脂代謝的作用[11]。

本研究發(fā)現(xiàn)，大鼠連續(xù)14 d被灌服脂肪乳劑后，可形成高脂血癥和肝脂肪變，而在給脂肪乳劑的同時(shí)給予丹參山楂提取物(40～160)mg/kg，則可明顯減少大鼠血清TC、TG、LDL-C、TC/HDL-C的增加，降低肝重量系數(shù)，防止HDL-C的降低及肝脂肪變的形成。說(shuō)明丹參山楂提取物可明顯抑制高脂血癥和肝脂肪變的形成。并且本研究中未發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)大鼠有明顯不良反應(yīng)發(fā)生，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)劑量安全。中藥中含有多種活性成分，作用于多個(gè)靶點(diǎn)，產(chǎn)生綜合療效，作用溫和而持久，對(duì)肝腎的毒性較小。本品中所含藥材山楂和丹參在我國(guó)資源豐富，價(jià)格低廉，有待于生產(chǎn)工藝的升級(jí)，進(jìn)一步優(yōu)化制劑的生產(chǎn)成本，使廣大的人群受惠。

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(本文編輯 王雅潔)

The Pharmacological Research of Radix Salviae Miltiorrhizae and Fructus Crataegi Extracts on the Prevention of Hyperlipidemia in Rats

Liu Ying，Li Ruxia，Zhang Jie

School of Pharmacy，F(xiàn)udan University，Shanghai 201203，China Corresponding Author： Zhang Jie(Shanghai Haitian Medicion Science & Technology Co．，Ltd．，Shanghai 201230，China)

Objective To investigate the influence of Radix Salviae Miltiorrhizae (RSM) and Fructus Crataegi(FC) extracts on the prevention of hyperlipidemia．Methods Fifty-eight male rats were stratified six groups according to their serum total cholesterol (TC) levels：Normal control group，hyperlipidemia model group，RSM and FC extracts low-dose group (40 mg/kg)，middle-dose group (80 mg/kg)，high-dose group (160 mg/kg)，Xuezhikang group (100 mg/kg)．Each treatment group was administered continuously for 17 days．From the 14th day，all rats were daily fed with 10 mL/kg fat emulsion in addition to the normal control group．In 18th day，serum TC，triglycerides (TG)，high density lipoprotein cholesterol (HDL-C) were detected，and low-density lipoprotein cholesterol (LDL-C) value was calculated．Then the livers were harvested to weigh and pathological detection was conducted．Results After 14 days' being fed with fat emulsion continuously，all rats in treatment groups may form hyperlipidemia and hepatic steatosis．But when given the extracts of RSM and FC at the same time(Xiaoyu Jiangzhi capsule active pharmaceutical ingredient)，the serum TC，TG，LDL-C，TC/HDL-C and liver weight coefficient significantly reduced．Conclusion The extracts of RSM and FC can inhibit the formation of hyperlipidemia and hepatic steatosis in rats．

hyperlipidemia；Radix Salviae Miltiorrhizae and Fructus Crataegi extracts； rat；fat emulsion；hepatic steatosis

1．復(fù)旦大學(xué)藥學(xué)院(上海 201203)，E-mail：lysweet0312@163．com；2．上海海天醫(yī)藥科技開(kāi)發(fā)有限公司

張杰，E-mail：quide.zhang@163.com

R285．5

A

10．3969/j．issn．1672-1349．2015．11．010

1672-1349(2015)11-1276-03

2015-07-21)