• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    體外培養(yǎng)1 d對玻璃化解凍卵裂期胚胎移植效果的影響

    2015-01-03 11:03:20程立子吳日然于文娟徐建亞廖月嬋
    中國當(dāng)代醫(yī)藥 2015年27期
    關(guān)鍵詞:卵裂玻璃化桑葚

    程立子 吳日然 于文娟 徐建亞 廖月嬋 杜 靜

    南方醫(yī)科大學(xué)附屬中山市博愛醫(yī)院生殖中心,廣東中山 528403

    體外培養(yǎng)1 d對玻璃化解凍卵裂期胚胎移植效果的影響

    程立子 吳日然 于文娟 徐建亞 廖月嬋 杜 靜

    南方醫(yī)科大學(xué)附屬中山市博愛醫(yī)院生殖中心,廣東中山 528403

    目的探討體外培養(yǎng)1 d對玻璃化解凍卵裂期胚胎移植效果的影響。方法選擇本中心2012年1~7月進行玻璃化冷凍并復(fù)蘇的277周期卵裂期胚胎作為研究對象,根據(jù)解凍后是否多培養(yǎng)1 d分為對照組和實驗組。對照組在解凍當(dāng)天移植,共123周期。實驗組解凍后多培養(yǎng)1 d,共154周期。實驗組又分為培養(yǎng)后含桑葚胚組(A 組)及無桑葚胚組(B組)。觀察延長體外培養(yǎng)時間對妊娠結(jié)局的影響以及培養(yǎng)后胚胎發(fā)育情況與妊娠結(jié)局的關(guān)系。結(jié)果實驗組的妊娠率和著床率顯著高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。A組的妊娠率與著床率顯著高于B組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論體外培養(yǎng)1 d不影響玻璃化解凍后卵裂期胚胎的移植效果,延長培養(yǎng)時間有利于選擇發(fā)育良好的胚胎并顯著提高臨床妊娠率和著床率。

    體外培養(yǎng);玻璃化解凍;卵裂期胚胎;桑葚胚

    胚胎冷凍保存技術(shù)在輔助生殖技術(shù)中占有重要地位。研究顯示,玻璃化冷凍復(fù)蘇后的胚胎代謝和細(xì)胞分裂的速度比程序冷凍解凍后的胚胎更快[1]。這項技術(shù)大大提高了體外授精-胚胎移植 (in vitro fertil ization and embryo transfer,IVF-ET)的累積妊娠率,有利于預(yù)防嚴(yán)重的卵巢過度刺激綜合征(ovarian hyperstimulation syndrome,OHSS),在為患者減少經(jīng)濟負(fù)擔(dān)的同時也增加了患者受孕的概率。本研究選取玻璃化解凍后在體外培養(yǎng)1 d的胚胎作為研究對象,觀察其發(fā)育情況,旨在探討延長體外培養(yǎng)時間對妊娠結(jié)局的影響。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料

    選擇本中心2012年1~7月進行玻璃化冷凍并復(fù)蘇的卵裂期胚胎作為研究對象,共277周期,冷凍胚胎均為第3天卵裂期胚胎。根據(jù)復(fù)蘇后移植時間的不同分為對照組(當(dāng)天移植組)和實驗組(體外培養(yǎng)1 d后移植組)。對照組共123周期,平均年齡為(31.03± 4.10)歲。實驗組共154周期,平均年齡為(31.26± 3.81)歲。所有患者均按本中心常規(guī)方法進行促排卵、取卵、體外受精及培養(yǎng)。所有胚胎均于第3天進行玻璃化冷凍。實驗組根據(jù)胚胎發(fā)育后是否含有桑椹胚分為A組(含桑葚胚)和B組(不含桑葚胚),桑葚胚指含有12~16個卵裂球的胚胎。

    1.2 方法

    1.2.1 冷凍胚胎選擇 根據(jù)胚胎形態(tài)學(xué)標(biāo)準(zhǔn)于第3天對胚胎進行分級,正常受精且第3天卵裂球數(shù)≥4個并且碎片≤20%的Ⅰ、Ⅱ級胚胎為可利用胚胎。經(jīng)患者同意,將移植后剩余的可利用胚胎冷凍或者將所有可利用胚胎冷凍。

    1.2.2 胚胎冷凍解凍方法 玻璃化冷凍液(Vitrolife?,RapidVitTMCleave,3×10 ml,REF 10117)及解凍液(Vitrolife?,RapidWarmTMCleave,4×10ml,REF 10118)由廣州尊博醫(yī)療器械有限公司提供。①玻璃化冷凍方法:按照Vitrolife?公司RapidVitTMCleave試劑說明書要求,將試劑從冰箱內(nèi)取出后預(yù)熱至37℃,將1~3個胚胎放入Vitri 1TMCleave液中平衡5~10 min,然后放入Vitri2TMCleave液中2min,可看到胚胎先皺縮后恢復(fù)原狀,然后將胚胎轉(zhuǎn)移入Vitri3TMCleave液中約30 s,吹打2~3次后將胚胎放到冷凍載體(自制)上,立即投入液氮中。整個過程均在37℃條件下進行。②玻璃化解凍方法:按照Vitrolife?公司RapidWarmTMCleave試劑說明書要求,將試劑從冰箱內(nèi)取出后預(yù)熱至37℃,將裝有胚胎的載體從液氮中取出,迅速放入復(fù)蘇液Warm 1TMCleave中,10~30 s后將胚胎依次轉(zhuǎn)移至Warm 2TMCleave 1 min、Warm 3TMCleave 2 min,Warm 4TMCleave 5min,最后轉(zhuǎn)入囊胚培養(yǎng)液Vitrolife?G-2 plus中,置于37℃、6%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。

    1.2.3 胚胎復(fù)蘇成功標(biāo)準(zhǔn) 解凍后存活卵裂球數(shù)≥50%。

    1.2.4 患者的準(zhǔn)備 ①自然周期:月經(jīng)規(guī)律、排卵正常患者采用自然周期,利用陰道超聲技術(shù)監(jiān)測卵泡及內(nèi)膜發(fā)育情況,當(dāng)優(yōu)勢卵泡直徑≥16 mm、子宮內(nèi)膜厚度≥8 mm時檢測是否出現(xiàn)黃體生成素(LH)峰,LH峰后36 h左右排卵,排卵日開始肌注黃體酮20~60 mg/d,排卵后第3天解凍胚胎。②激素替代周期:月經(jīng)不規(guī)則、排卵障礙、子宮內(nèi)膜生長不良等患者采用激素替代周期。于月經(jīng)第3天起用遞增法口服戊酸雌二醇(補佳樂,先靈公司),B超監(jiān)測子宮內(nèi)膜厚度,當(dāng)內(nèi)膜厚度≥8mm時開始每日肌注黃體酮,3 d后解凍胚胎。胚胎移植在B超引導(dǎo)下進行。

    1.3 妊娠診斷

    移植2周后測定血HCG水平,陽性者為生化妊娠,35 d后行B超檢查,有孕囊者則診斷為臨床妊娠。

    1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

    采用SPSS 19.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進行分析,計量資料以±s表示,采用t檢驗,計數(shù)資料采用χ2檢驗,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 實驗組與對照組胚胎復(fù)蘇率、平均移植胚胎數(shù)、妊娠率與著床率的比較

    實驗組的妊娠率和著床率顯著高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)(表1)。

    表1 實驗組與對照組胚胎復(fù)蘇率、平均移植胚胎數(shù)、妊娠率與著床率的比較

    2.2 A組與B組平均移植胚胎數(shù)、妊娠率與著床率的比較

    A組的妊娠率與著床率顯著高于B組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)(表2)。

    表2 A組與B組平均移植胚胎數(shù)、妊娠率與著床率的比較

    3 討論

    3.1 凍融后獲得高質(zhì)量的胚胎是影響冷凍胚胎移植結(jié)果的重要因素

    在輔助生殖技術(shù)中,由于控制性超排卵技術(shù)的應(yīng)用,90%的患者可在一次體外受精周期獲得較多胚胎。本中心70%以上患者的胚胎需要進行冷凍保存。玻璃化冷凍方法穩(wěn)定、高效、對胚胎的發(fā)育潛力影響最小,為預(yù)防OHSS發(fā)生起到了重要作用,甚至有人認(rèn)為解凍周期移植可能會完全取代新鮮周期移植[2],但目前凍融過程仍不完美,胚胎經(jīng)過冷凍和復(fù)蘇的過程后,部分卵裂球會受損傷,發(fā)生裂解凋亡或者壞死,而壞死的卵裂球也會影響其他卵裂球的發(fā)育[3]。即使是卵裂球全部存活的解凍胚胎也有可能受到肉眼無法分辨的損傷,繼而降低繼續(xù)分裂的能力。研究顯示,胚胎冷凍雖然能保持胚胎的發(fā)育潛力,但冷凍和解凍的過程會導(dǎo)致胚胎減少30%的發(fā)育能力,進而導(dǎo)致囊胚形成率和妊娠率降低[4]。

    3.2 延長體外培養(yǎng)時間、觀察解凍后胚胎的繼續(xù)發(fā)育情況對評價胚胎發(fā)育潛力的意義

    關(guān)于延長體外培養(yǎng)時間對胚胎發(fā)育的影響,目前觀點尚不統(tǒng)一,本研究結(jié)果與葉英輝等[4-9]的研究結(jié)果一致,提示延長胚胎復(fù)蘇后的體外培養(yǎng)時間,相比于解凍當(dāng)日移植的胚胎,其妊娠率和種植率均可明顯提高,而Rato等[10]的研究顯示,胚胎解凍后培養(yǎng)2~5 h,其種植率及活產(chǎn)率均高于解凍后培養(yǎng)24 h,相關(guān)研究結(jié)果同樣顯示解凍后次日移植不能提高臨床妊娠率和種植率[11-13]。

    延長解凍后體外培養(yǎng)時間,無疑會更有利于觀察胚胎的發(fā)育情況。本研究結(jié)果顯示,解凍后大多胚胎都能恢復(fù)應(yīng)有的發(fā)育能力,但是其中部分胚胎發(fā)育速度較慢(如只增多1~3個卵裂球),這些胚胎在妊娠率、著床率方面顯著低于正常發(fā)育的移植胚胎。羅金等[14]的研究顯示,延長解凍后體外培養(yǎng)時間,可觀察到無法繼續(xù)生長的胚胎,這類胚胎發(fā)育潛能低,因此,可根據(jù)解凍后胚胎生長情況來選擇發(fā)育潛能大的胚胎進行移植。此外,其研究顯示,部分已復(fù)蘇的胚胎可能受到了不可見的損傷,僅少數(shù)卵裂球恢復(fù)發(fā)育能力,這些胚胎的整體發(fā)育潛能較低下,這與本研究結(jié)果一致。

    3.3 胚胎發(fā)育與子宮內(nèi)膜生長是否同步對著床的影響

    本研究結(jié)果顯示,解凍后培養(yǎng)1 d后再行移植的含有發(fā)育至桑葚胚及以上的胚胎,其著床率及妊娠率顯著高于移植不含桑葚胚的胚胎。凍融胚胎移植時機的選擇非常重要,胚胎發(fā)育的速度與子宮內(nèi)膜成熟度不一致也可能是導(dǎo)致種植失敗的原因之一。玻璃化冷凍胚胎解凍后發(fā)育速度較快,只有提前1 d準(zhǔn)備子宮內(nèi)膜,才能更好地讓兩者保持一致,而凍融后選擇發(fā)育潛能好的胚胎進行移植,其著床率與妊娠率均有顯著提高[15-17]。

    綜上所述,胚胎質(zhì)量是影響解凍周期移植成功的關(guān)鍵因素[18],延長體外培養(yǎng)時間不會增加胚胎自身的發(fā)育潛能,但是可以通過此種方法來觀察胚胎復(fù)蘇后的生長情況,繼而更好地評估其未來的發(fā)育潛力。發(fā)育潛力高的胚胎與子宮內(nèi)膜成熟度的同步性越高,越有利于胚胎著床。通過多培養(yǎng)1 d選擇出更適宜移植的胚胎,可以將發(fā)育潛力差的胚胎淘汰,保證移植周期中的胚胎質(zhì)量,提高臨床妊娠率和著床率。

    [1]Cercas R,Villas C,Pons I,et al.Vitrification can modify embryo cleavage stage after warming.Should we change endometrial preparation?[J].J Assist Reprod Genet,2012,29(12):1363-1368.

    [2]Wong KM,Mastenbroek S,Repping S.Cryopreservation of human embryos and its contribution to in vitro fertilization success rates[J].Fertil Steril,2014,102(1):19-26.

    [3]Edgar DH,Archer J,Bourne H.The application and impact of cryopreservation of early cleavage stage embryos in assisted reproduction[J].Hum Fertil(Camb),2005,8(4):225-230.

    [4]葉英輝,金帆,邢蘭鳳,等.凍存胚胎復(fù)蘇移植的影響因素[J].科技通報,2001,17(1):68-70

    [5]龔紹瓊.移植復(fù)蘇后進一步卵裂胚胎可提高凍融胚胎移植臨床妊娠率[J].現(xiàn)代醫(yī)院,2012,12(7):11-13.

    [6]李瑞岐,王文軍,麥美琪,等.慢速冷凍胚胎TET周期當(dāng)天與解凍后培養(yǎng)1 d移植結(jié)果分析[J].中山大學(xué)學(xué)報,2011,32(6):824-827.

    [7]王寧怡,孫曉溪,陸朱娣,等.影響凍融胚胎發(fā)育潛能及妊娠結(jié)局因素的探討[J].生殖與避孕,2012,32(8):533-539.

    [8]陸湘,李路,高曉紅,等.卵裂球的完整性和生長與否對凍融胚胎移植妊娠結(jié)局的影響[J].生殖與避孕,2007,27 (8):518-522.

    [9]柴三明,王琰,倪亞莉.過夜培養(yǎng)對凍融胚胎移植周期妊娠結(jié)局的影響[J].生殖與避孕,2010,30(7):490-493

    [10]Rato ML,Gouveia-Oliveira A,Plancha CE.Influence of post-thaw culture on the developmental potential of human frozen embryos[J].JAssistReprod Genet,2012,29(8): 789-795.

    [11]劉曉音,薛松果,金煒,等.人卵裂期胚胎玻璃化凍融體外培養(yǎng)時間對妊娠結(jié)局的影響[J].生殖醫(yī)學(xué)雜志,2010,19(2):104-107.

    [12]李志強,李艷,田之瑩,等.胚胎復(fù)蘇后體外孵育時間對妊娠結(jié)局的影響[J].中國醫(yī)療前沿,2008,3(2):29-30.

    [13]馬博,許麗萍,張紅.冷凍胚胎復(fù)蘇后體外培養(yǎng)時間對妊娠的影響[J].第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報,2010,32(10):1027-1037.

    [14]羅金,楊菁,徐望明.胚胎凍融后體外培養(yǎng)時間對妊娠結(jié)局的影響[J].生殖與避孕,2011,31(2):97-101.

    [15]李冬梅,黎淑貞,陳希曦,等.兩種內(nèi)膜準(zhǔn)備方案不同移植時間對凍融胚胎臨床結(jié)局的影響[J].生殖醫(yī)學(xué)雜志,2013,22(6):451-454.

    [16]葛明曉,張金玉.提前48h解凍胚胎移植用于重復(fù)異位妊娠反復(fù)IVF-ET失敗患者:2例報道及分析[J].生殖與避孕,2010,30(4):279-280.

    [17]郭慧,龔斐,盧光琇.不同解凍和移植時間的凍融胚胎成功率分析[J].生殖醫(yī)學(xué)雜志,2012,21(1):64-66.

    [18]Bottin P,Achard V,Courbiere B,et al.Elective single embryo transfer policy at 48/72h:which results after fresh transfers and frozen/thawed transfers?[J].Gynecol Obstet Fertil,2015,43(4):297-303.

    Influence of one-day culture in vitro on embryo transp lantation effect of vitrification-unfreezing at cleavage stage

    CHENG Li-zi WU Ri-ran YUWen-juan XU Jian-ya LIAO Yue-chan DU Jing
    Reproductive Cente,Boai Hospital of Zhongshan City Affiliated to Southern Medical University,Zhongshan 528403, China

    ObjectiveTo explore the influence of one-day culture in vitro on embryo transplantation effect of vitrification-unfreezing at cleavage stage.Methods277 cycles of cleavage stage embryos on revived transplantation of vitrification-unfreezing at cleavage stage from January 2012 to July in our center were selected and divided into the control group(123 cycles)and the experimental group(154 cycles)according towhether one-daymore culture after unfreezing. The control group was transplantated during the same day after unfreezing,the experimental group was transplantated one-daymore culture after unfreezing.The experimental group was again divided intomorula group(group A)and nonmorula group(group B)after cultivation.Influences on extended culture in vitro on pregnancy outcome and relationships between embryonic development after cultivation and pregnancy outcome were observed.ResultsThe pregnancy rate and the rate of embryonic implantation in the experimental group was higher than that in the control group,with significant difference(P<0.05).The pregnancy rate and the rate of embryonic implantation in group A was higher than that in group B,with significant difference(P<0.05).ConclusionOne-daymore culture in vitro does not affect on embryo transplantation of vitrification-unfreezing at cleavage stage.Extension of culture period is beneficial to selectwell-developed embryo and also remarkably improves clinical pregnancy rate and rate of embryonic implantation.

    Culture in vitro;Vitrification-unfreezing;Cleavage-stage embryo;Morula

    R321

    A

    1674-4721(2015)09(c)-0045-04

    2015-03-09 本文編輯:祁海文)

    廣東省中山市醫(yī)學(xué)科研基金項目(2013A020016)

    猜你喜歡
    卵裂玻璃化桑葚
    植入前胚胎異常分裂對胚胎持續(xù)發(fā)育能力的影響
    早期異常卵裂不影響囊胚染色體整倍性
    桑葚
    啟蒙(3-7歲)(2019年4期)2019-06-27 07:06:30
    用桑葚干解酒,靠譜嗎
    摘桑葚
    草莓玻璃化苗的分析
    又一年桑葚熟了
    草莓玻璃化苗的分析
    移植早期卵裂胚胎對IVF-ET妊娠結(jié)局的影響研究
    左卡尼汀對玻璃化冷凍小鼠卵母細(xì)胞體外受精結(jié)局的影響
    免费av中文字幕在线| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 婷婷成人精品国产| 午夜激情久久久久久久| 亚洲中文av在线| 蜜桃在线观看..| 精品人妻一区二区三区麻豆| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 欧美成人午夜精品| 国产成人av激情在线播放| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 亚洲中文字幕日韩| svipshipincom国产片| 中文字幕最新亚洲高清| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 咕卡用的链子| 精品卡一卡二卡四卡免费| 精品第一国产精品| 一级毛片精品| 热99国产精品久久久久久7| 999精品在线视频| 精品人妻1区二区| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 另类亚洲欧美激情| 蜜桃在线观看..| 成年人免费黄色播放视频| 美女主播在线视频| 99热网站在线观看| 91老司机精品| 国产成人av激情在线播放| 午夜福利视频精品| 黄色视频在线播放观看不卡| 99国产精品99久久久久| 国产在视频线精品| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 国产成人系列免费观看| 人妻 亚洲 视频| 波多野结衣av一区二区av| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 老司机靠b影院| 午夜免费成人在线视频| 久久亚洲精品不卡| 99re6热这里在线精品视频| 99国产综合亚洲精品| 亚洲激情五月婷婷啪啪| bbb黄色大片| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 下体分泌物呈黄色| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 欧美 日韩 精品 国产| 亚洲三区欧美一区| 久久久精品区二区三区| 丝袜在线中文字幕| 99国产极品粉嫩在线观看| 男女无遮挡免费网站观看| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 涩涩av久久男人的天堂| 国产视频一区二区在线看| 欧美性长视频在线观看| 黄色a级毛片大全视频| 国产精品欧美亚洲77777| 狂野欧美激情性xxxx| 99热网站在线观看| 精品国产一区二区久久| 制服诱惑二区| 最近最新免费中文字幕在线| 叶爱在线成人免费视频播放| 国产免费现黄频在线看| 老汉色av国产亚洲站长工具| 国产91精品成人一区二区三区 | 丝袜在线中文字幕| 久热爱精品视频在线9| 午夜91福利影院| 日韩制服骚丝袜av| 啪啪无遮挡十八禁网站| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 精品亚洲成国产av| 999久久久国产精品视频| 一区二区三区激情视频| 一级a爱视频在线免费观看| 91九色精品人成在线观看| 久久久久久久精品精品| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 久久香蕉激情| 久久九九热精品免费| 美女大奶头黄色视频| 满18在线观看网站| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 国产一区二区三区在线臀色熟女 | 高清视频免费观看一区二区| kizo精华| 久久久精品免费免费高清| 国产日韩欧美在线精品| 国产一区有黄有色的免费视频| 18禁观看日本| 12—13女人毛片做爰片一| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 久久人人爽人人片av| 狂野欧美激情性bbbbbb| a级毛片黄视频| 成年人午夜在线观看视频| 成年人午夜在线观看视频| 免费日韩欧美在线观看| 9191精品国产免费久久| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 黑人欧美特级aaaaaa片| 黄色毛片三级朝国网站| 欧美日韩精品网址| 亚洲精品一区蜜桃| 久久中文看片网| 51午夜福利影视在线观看| 69精品国产乱码久久久| 黑人猛操日本美女一级片| 亚洲欧美一区二区三区久久| 性色av一级| 男人添女人高潮全过程视频| 国产精品.久久久| 大型av网站在线播放| 国产精品成人在线| 夜夜夜夜夜久久久久| 国产男女内射视频| 久久影院123| 热re99久久国产66热| 国产精品一区二区精品视频观看| 一级a爱视频在线免费观看| 亚洲国产精品成人久久小说| 岛国在线观看网站| 精品国产超薄肉色丝袜足j| videos熟女内射| 久久毛片免费看一区二区三区| 国产在线视频一区二区| 一个人免费在线观看的高清视频 | 久9热在线精品视频| 欧美日韩一级在线毛片| 日本一区二区免费在线视频| 精品国产一区二区久久| 亚洲精品乱久久久久久| 国产激情久久老熟女| 午夜久久久在线观看| svipshipincom国产片| 淫妇啪啪啪对白视频 | 12—13女人毛片做爰片一| av线在线观看网站| 精品视频人人做人人爽| 国产在线观看jvid| 天天影视国产精品| 国产淫语在线视频| 无遮挡黄片免费观看| 丝瓜视频免费看黄片| 超碰97精品在线观看| 97精品久久久久久久久久精品| 精品福利观看| 水蜜桃什么品种好| 下体分泌物呈黄色| 手机成人av网站| 国产精品一区二区精品视频观看| 美女国产高潮福利片在线看| 老司机亚洲免费影院| 老司机亚洲免费影院| 亚洲一区中文字幕在线| 美女国产高潮福利片在线看| 水蜜桃什么品种好| 亚洲国产精品成人久久小说| 水蜜桃什么品种好| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 亚洲成人免费电影在线观看| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 精品国产乱码久久久久久男人| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 亚洲第一青青草原| 大型av网站在线播放| 在线观看免费午夜福利视频| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 99热全是精品| 午夜福利,免费看| 麻豆国产av国片精品| 精品一区二区三区av网在线观看 | 色老头精品视频在线观看| videos熟女内射| 黑丝袜美女国产一区| 热99re8久久精品国产| av国产精品久久久久影院| 美女视频免费永久观看网站| 捣出白浆h1v1| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 国产精品熟女久久久久浪| 国产精品久久久av美女十八| 国产在线免费精品| 精品熟女少妇八av免费久了| 看免费av毛片| 在线观看www视频免费| 欧美黑人欧美精品刺激| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 男女之事视频高清在线观看| 最近最新中文字幕大全免费视频| 国产成人精品无人区| 男女下面插进去视频免费观看| 嫁个100分男人电影在线观看| 99热网站在线观看| www.熟女人妻精品国产| 窝窝影院91人妻| www日本在线高清视频| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 精品人妻1区二区| 免费在线观看完整版高清| 黄色视频,在线免费观看| 伊人亚洲综合成人网| 美女主播在线视频| 亚洲国产欧美在线一区| 欧美中文综合在线视频| 色视频在线一区二区三区| 精品国产国语对白av| 九色亚洲精品在线播放| 中文字幕制服av| 久久精品国产亚洲av香蕉五月 | 91老司机精品| 免费日韩欧美在线观看| 午夜精品国产一区二区电影| 人妻 亚洲 视频| 99精国产麻豆久久婷婷| 国产精品成人在线| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区 | www.av在线官网国产| 人成视频在线观看免费观看| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频 | 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 考比视频在线观看| 亚洲人成77777在线视频| 又大又爽又粗| 国产一区二区在线观看av| 久久ye,这里只有精品| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| av免费在线观看网站| 久久久久国产精品人妻一区二区| 国产精品国产三级国产专区5o| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 丝瓜视频免费看黄片| 国产不卡av网站在线观看| 国产成人精品在线电影| 麻豆av在线久日| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 高清在线国产一区| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 人妻 亚洲 视频| 精品国产乱码久久久久久男人| 成人黄色视频免费在线看| 亚洲欧洲日产国产| 高清黄色对白视频在线免费看| 两性夫妻黄色片| 国产男女内射视频| 美女福利国产在线| 下体分泌物呈黄色| 男女午夜视频在线观看| 久久久久精品人妻al黑| 久久久久国内视频| av又黄又爽大尺度在线免费看| 99国产精品99久久久久| 亚洲三区欧美一区| 久久狼人影院| 亚洲性夜色夜夜综合| 香蕉国产在线看| 成人影院久久| 岛国在线观看网站| 男女午夜视频在线观看| 欧美激情极品国产一区二区三区| 国产免费av片在线观看野外av| 十八禁网站网址无遮挡| 人成视频在线观看免费观看| 女人精品久久久久毛片| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 性色av一级| 丰满饥渴人妻一区二区三| 韩国高清视频一区二区三区| 国产精品久久久久久精品电影小说| 国产日韩欧美视频二区| 新久久久久国产一级毛片| 日韩欧美一区视频在线观看| 国产一区二区激情短视频 | 99国产精品99久久久久| 动漫黄色视频在线观看| 久久亚洲精品不卡| 男女免费视频国产| 在线av久久热| 咕卡用的链子| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 高清视频免费观看一区二区| 麻豆av在线久日| 精品欧美一区二区三区在线| 99九九在线精品视频| 999精品在线视频| 蜜桃在线观看..| 老鸭窝网址在线观看| 国产精品亚洲av一区麻豆| 午夜福利视频精品| 老汉色∧v一级毛片| a级片在线免费高清观看视频| 国产成人精品无人区| 在线av久久热| 精品国产国语对白av| 18禁观看日本| www.999成人在线观看| 亚洲精品自拍成人| 美女扒开内裤让男人捅视频| 老司机深夜福利视频在线观看 | 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 欧美一级毛片孕妇| 国产精品久久久久成人av| 精品人妻1区二区| 电影成人av| 国精品久久久久久国模美| 精品亚洲成a人片在线观看| 亚洲黑人精品在线| 亚洲精品久久午夜乱码| 午夜福利视频在线观看免费| 久久久久国内视频| 99久久综合免费| av视频免费观看在线观看| 免费在线观看黄色视频的| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 亚洲国产精品999| 亚洲国产av新网站| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 91精品三级在线观看| 日本wwww免费看| 中文字幕精品免费在线观看视频| 两个人免费观看高清视频| 香蕉国产在线看| 国产1区2区3区精品| 男人舔女人的私密视频| 精品国产乱码久久久久久男人| 高清在线国产一区| 久久久久久久国产电影| 色94色欧美一区二区| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 搡老乐熟女国产| 亚洲欧美激情在线| 国产av一区二区精品久久| 亚洲精品自拍成人| 欧美精品av麻豆av| 亚洲中文字幕日韩| 99re6热这里在线精品视频| 日本av免费视频播放| xxxhd国产人妻xxx| 欧美 日韩 精品 国产| 成年人免费黄色播放视频| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频 | 91麻豆精品激情在线观看国产 | 十八禁人妻一区二区| 正在播放国产对白刺激| 日韩中文字幕欧美一区二区| 人妻一区二区av| 国产黄频视频在线观看| 色视频在线一区二区三区| 少妇粗大呻吟视频| 女人久久www免费人成看片| 制服诱惑二区| 久久国产亚洲av麻豆专区| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 91成年电影在线观看| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 99国产精品99久久久久| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 国产成人欧美在线观看 | 国产亚洲精品久久久久5区| 一本色道久久久久久精品综合| 老司机深夜福利视频在线观看 | 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 亚洲欧美一区二区三区久久| 国产在线一区二区三区精| 国产男女超爽视频在线观看| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 在线观看舔阴道视频| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 精品免费久久久久久久清纯 | 999久久久国产精品视频| 视频区欧美日本亚洲| 老司机午夜十八禁免费视频| 不卡av一区二区三区| 欧美97在线视频| 啪啪无遮挡十八禁网站| 国产精品 欧美亚洲| 亚洲中文字幕日韩| 91精品三级在线观看| 日韩有码中文字幕| 99久久综合免费| 国产亚洲精品第一综合不卡| 亚洲精品中文字幕一二三四区 | 少妇人妻久久综合中文| av视频免费观看在线观看| 十八禁人妻一区二区| 看免费av毛片| 老熟女久久久| 国产亚洲精品久久久久5区| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 97精品久久久久久久久久精品| 亚洲成人国产一区在线观看| 久久九九热精品免费| 岛国在线观看网站| 美女高潮到喷水免费观看| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 99久久人妻综合| 香蕉国产在线看| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 大香蕉久久网| 欧美少妇被猛烈插入视频| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 91国产中文字幕| 欧美性长视频在线观看| 久久久水蜜桃国产精品网| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 亚洲国产成人一精品久久久| 一级片免费观看大全| 99久久综合免费| 久久毛片免费看一区二区三区| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 欧美黑人欧美精品刺激| 夜夜夜夜夜久久久久| 国产精品一二三区在线看| 欧美激情高清一区二区三区| 亚洲精品久久午夜乱码| 在线观看一区二区三区激情| 天天操日日干夜夜撸| 久久久久久久久免费视频了| 午夜精品国产一区二区电影| 99国产综合亚洲精品| 大片电影免费在线观看免费| 99热全是精品| 性高湖久久久久久久久免费观看| 国产成人欧美在线观看 | 欧美精品人与动牲交sv欧美| 久久影院123| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 最近中文字幕2019免费版| 国产亚洲欧美精品永久| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| av电影中文网址| 久久毛片免费看一区二区三区| 99精品久久久久人妻精品| 无限看片的www在线观看| 国产免费av片在线观看野外av| 在线观看免费午夜福利视频| 国产精品熟女久久久久浪| 久久av网站| 国产区一区二久久| 国产视频一区二区在线看| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 国产亚洲欧美精品永久| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 黄频高清免费视频| 两个人看的免费小视频| 亚洲少妇的诱惑av| 最近最新免费中文字幕在线| 91精品国产国语对白视频| 精品视频人人做人人爽| 精品熟女少妇八av免费久了| 久久久久网色| 日韩三级视频一区二区三区| 亚洲国产欧美在线一区| 婷婷成人精品国产| av网站免费在线观看视频| 窝窝影院91人妻| 日韩精品免费视频一区二区三区| 在线观看免费午夜福利视频| 成年人午夜在线观看视频| 国产一区二区三区综合在线观看| 中文字幕色久视频| 亚洲精品在线美女| 精品免费久久久久久久清纯 | 日韩,欧美,国产一区二区三区| 欧美一级毛片孕妇| 精品人妻一区二区三区麻豆| av网站免费在线观看视频| 国产99久久九九免费精品| 欧美精品高潮呻吟av久久| 日韩大码丰满熟妇| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 日韩有码中文字幕| a级毛片黄视频| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 欧美国产精品一级二级三级| 久久久久久久国产电影| 永久免费av网站大全| 精品国内亚洲2022精品成人 | 51午夜福利影视在线观看| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 亚洲成人免费av在线播放| 丝袜人妻中文字幕| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 1024香蕉在线观看| 十分钟在线观看高清视频www| 国产亚洲一区二区精品| 性色av乱码一区二区三区2| 天堂8中文在线网| 国产成人系列免费观看| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| av不卡在线播放| www.999成人在线观看| 美女扒开内裤让男人捅视频| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 99国产精品一区二区蜜桃av | 黄色视频不卡| 亚洲国产中文字幕在线视频| 丝瓜视频免费看黄片| 免费看十八禁软件| 亚洲欧美清纯卡通| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 中文字幕最新亚洲高清| 午夜影院在线不卡| 女人精品久久久久毛片| av在线app专区| 69精品国产乱码久久久| 欧美精品亚洲一区二区| 亚洲一区二区三区欧美精品| 国产av国产精品国产| 欧美黑人精品巨大| 欧美少妇被猛烈插入视频| 一区二区日韩欧美中文字幕| 老司机福利观看| 久久久欧美国产精品| 国产人伦9x9x在线观看| 欧美黑人欧美精品刺激| 国产人伦9x9x在线观看| 亚洲av美国av| 黄色毛片三级朝国网站| videosex国产| 中文字幕精品免费在线观看视频| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| cao死你这个sao货| 热99国产精品久久久久久7| 亚洲一码二码三码区别大吗| 欧美日韩精品网址| 久久久久久久久久久久大奶| 亚洲中文字幕日韩| 后天国语完整版免费观看| 亚洲专区中文字幕在线| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 在线观看一区二区三区激情| 精品欧美一区二区三区在线| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 在线av久久热| tube8黄色片| 老司机午夜福利在线观看视频 | 老司机亚洲免费影院| 欧美xxⅹ黑人| 男人爽女人下面视频在线观看| 中文字幕人妻丝袜制服| 免费日韩欧美在线观看| a级毛片在线看网站| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 中亚洲国语对白在线视频| 国产日韩欧美视频二区| 成年人黄色毛片网站| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 日本91视频免费播放| 成人三级做爰电影| 国产麻豆69| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 国产精品成人在线| 91字幕亚洲| 免费不卡黄色视频| 亚洲第一av免费看| www.精华液| 久久精品国产亚洲av香蕉五月 | 高清视频免费观看一区二区| 国精品久久久久久国模美| 亚洲av欧美aⅴ国产| 亚洲精品一区蜜桃| 精品第一国产精品| 亚洲精品中文字幕一二三四区 | 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| av免费在线观看网站| 亚洲国产av新网站| 日本精品一区二区三区蜜桃| 女性被躁到高潮视频| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 亚洲国产精品999| 99国产精品一区二区三区| 日韩有码中文字幕| 另类亚洲欧美激情| 人妻人人澡人人爽人人| 国产av又大| 午夜免费观看性视频| 人妻人人澡人人爽人人| 成年人黄色毛片网站| 波多野结衣av一区二区av| 国产精品一区二区在线不卡| 91av网站免费观看| 另类精品久久| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 性色av一级| 法律面前人人平等表现在哪些方面 | 一级片'在线观看视频| 性高湖久久久久久久久免费观看| 亚洲熟女毛片儿| 2018国产大陆天天弄谢| 国产亚洲欧美在线一区二区| 欧美精品亚洲一区二区| 桃花免费在线播放| 大香蕉久久网| 亚洲熟女毛片儿|