微量注射泵添加二甲基亞砜對冰凍機采血小板微聚物的效果分析

馮志芬，李瑞玲，馮志瑾

（1.河南大學護理學院，河南開封475004；2.鶴壁市中心血站，河南鶴壁458030）

微量注射泵添加二甲基亞砜對冰凍機采血小板微聚物的效果分析

馮志芬1，李瑞玲1，馮志瑾2

（1.河南大學護理學院，河南開封475004；2.鶴壁市中心血站，河南鶴壁458030）

目的通過手工和微量注射泵兩種方法添加二甲基亞砜（DMSO）并進行比較，系統(tǒng)總結使用微量注射泵降低血小板微聚物發(fā)生的主要成效，為各地成分血的推廣提供參考。方法應用美國Trima血細胞分離機采集血小板，對冰凍血小板制備過程及整改前后微聚物陽性率進行比較分析。結果微量注射泵添加DMSO冰凍單采血小板微聚物陽性率明顯下降。說明DMSO注入速度和操作規(guī)范狀況對血小板質量影響較大。整改前，微聚物出現陽性率為14.77%；整改后，微聚物出現陽性率為2.75%。結論使用微量注射泵添加DMSO能明顯降低血小板微聚物陽性率。而加強全程質控，嚴格篩選獻血者、規(guī)范單采血小板的制備、保證冰凍溫度等是降低微聚物發(fā)生的重要方面。

冰凍單采血小板；微聚物；微量注射泵；陽性率

機采血小板具有儲存期長、使用方便、療效好、副作用少等優(yōu)點，主要適用于血小板計數低或功能障礙引起的出血病人的搶救和治療[1]。鶴壁市中心血站自2003年開展冰凍單采血小板成分血以來，臨床應用逐年增多。但是，冰凍單采血小板因采集制備過程比較復雜，在解凍過程中出現微聚物的情況屢屢發(fā)生。筆者通過總結工作經驗，得到一些行之有效的整改方法，現報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

Trima血細胞分離機及相應耗材，－80℃深低溫冰箱（日本SANYO公司），DK－8A型電熱恒溫水浴箱（揚州三發(fā)電子有限公司），WZ－50C2系列微量注射泵（浙江大學醫(yī)學儀器有限公司），二甲基亞砜（DMSO，美國），血小板震蕩儀（蘇州醫(yī)用儀器廠），一次性注射器（山東威高公司），4號半一次性靜脈針頭（山東威高公司），一次性加藥件（四川南格爾公司）。

1.2 方法

（1）應用美國Trima血細胞分離機進行采集。嚴格按照《獻血者健康檢查標準》進行獻血者篩選，年齡18～55歲，進行獻血者體重、性別、血型、血細胞比容（HCT）、血小板計數（PLT）等信息錄入，設備自動計算并顯示采集雙份或單份。一個U的血小板總容量為220～250 ml，采后血小板計數≥2．5×1011/袋。采血過程順暢，沒有沖紅和血小板的凝聚，外觀呈云霧狀。

（2）采集完成后震蕩30～60 min，采用兩種方法嚴格在百級凈化間添加DMSO。整改前傳統(tǒng)手工添加DMSO按照5%的終濃度計算DMSO用量，用注射器抽取DMSO后去掉針頭，連接一次性靜脈針頭，消毒后加入DMSO，速度緩慢而均衡，以1 ml/ min為宜，同時震蕩儀不斷搖動血小板袋，使加入的DMSO迅速擴散混勻，避免局部溫度過高，大量產熱會損壞血小板。加完后排凈血袋中的氣泡于－80℃深低溫冰箱保存。整改后用微量注射泵添加DMSO：在百級凈化間用一次性注射器準確抽取所需DMSO的量，同時連上加藥件、一次性靜脈針頭，排出注射器內的空氣，正確置入注射泵卡座中，加入速度為50 ml/h，將單采血小板置于震蕩儀上，設置旋轉參數，啟動微量注射泵勻速注入DMSO。液體完全加入后，排出血袋內空氣，水平置于－80℃深低溫冰箱保存。

（3）于37℃電子恒溫水浴箱內解凍，解凍時固定冰凍血小板，完全浸沒水中，水平振蕩，5～10 min完全融化。

1.3 統(tǒng)計學處理

采用χ2檢驗。

2 結果

對使用微量注射泵添加DMSO實施前、后3個月冰凍血小板解凍時出現微聚物的陽性率進行對比，見表1～3。

表1 整改前冰凍血小板解凍出現微聚物陽性率

表2 整改后冰凍血小板解凍出現微聚物陽性率

表3 整改前后冰凍血小板解凍出現微聚物陽性率對比

從表3可以看出整改前后陽性率分別為14．77%、2．75%，存在顯著性差異（χ2=15．67，P＜0．01）。說明整改后效果明顯，有效提高了冰凍血小板的質量，降低了冰凍血小板因微聚物而造成的報廢。

3 討論

劉作斌[2]、馬海峰等[3]等研究報道：纖維蛋白和血小板的損傷正是冰凍血小板融化后出現析出物的主要原因。筆者應用以上兩種方法添加DMSO制備冰凍單采血小板，解凍后對比效果分析可以說明微量注射泵添加DMSO對減少血小板微聚物有較好效果。微量注射泵能保證DMSO溶液緩慢勻速地添加而使管壁顏色無變化，從而保證血小板解聚擴散界面的溫度控制在40℃以下，避免了血漿蛋白遇熱變性和血小板的熱灼傷，保護了血小板的功能。同時這也符合深低溫保存血小板的關鍵技術指導原則[4]。傳統(tǒng)的手工添加DMSO受人為因素影響較大，因添加時間在10～15 min，人工手推DMSO不能保證緩慢而勻速的要求，易造成血袋管壁產熱變白，從而出現微聚物現象，使血液報廢。其原因是由于DMSO不宜與塑料接觸，加入過快局部產熱使蛋白變性，且使血小板聚集、激活，影響了血小板的質量及功能[5]?？傊c傳統(tǒng)手工添加DMSO相比，微量注射泵添加DMSO大大降低了微聚物陽性率，且符合血站基本操作規(guī)范，具有推廣價值。

綜上所述，冰凍單采血小板采集過程長，操作復雜，通過比較證明添加DMSO的速度尤為重要。但是，血小板微聚物的發(fā)生是綜合因素導致的，需要全程質控，包括獻血者的嚴格篩選、規(guī)范單采血小板的制備、保證冰凍溫度等諸多方面，以避免微聚物的發(fā)生，保證血小板的質量。

[1]劉景漢．臨床輸血學[M]．北京：人民衛(wèi)生出版社，2011．

[2]劉作斌，徐亦清，張佐云，等．冰凍保護劑二甲基亞砜的毒副作用及應用劑量研究[J]．中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院學報，1990，11（1）：31．

[3]馬海峰，孟莉，黃慶香，等．微量注射泵在制備冰凍血小板中的應用[J]．2007，20（6）：513．

[4]劉景漢，李茨芬，殷宗健，等．二甲基亞砜冷凍保存血小板[J]．解放軍醫(yī)學雜志，1989，14（2）：106．

[5]張潔，張偉強，豐炳亮，等．微量注射泵在制備冰凍血小板中的應用[J]．中國輸血雜志，2003，16（3）：190－191．

R472.9

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1671-1246（2015）05-0107-02

注：本文系河南大學科研基金項目（2012YBZR017）