糧油食品中黃曲霉素檢測方法及比較

摘要：根據(jù)相關(guān)檢測發(fā)現(xiàn)，黃曲霉素是一種具有很強毒性的物質(zhì)，一般在糧食、食用油中存在，具有引發(fā)癌癥的特性。因此，在生產(chǎn)過程中，必須對糧油食品中黃曲霉素的檢測給以高度重視，以保證人們?nèi)粘Ｉ畹氖秤冒踩?，避免癌癥患者不斷增多。本文就糧油食品中黃曲霉素的幾種常用檢測方法進行闡述和對比，以為提高糧油食品中黃曲霉素檢測結(jié)果準(zhǔn)確性提供可參考依據(jù)。

關(guān)鍵詞：糧油食品;黃曲霉素;檢測方法

目前，糧油食品中黃曲霉素的檢測方法主要包括高效液相色譜法、酶聯(lián)免疫法、免疫膠體金檢測法和免疫親和柱和熒光光度法等四種，根據(jù)實際情況選擇最合適的檢測方法，可以大大提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，從而提高糧油食品食用的安全性。

一、高效液相色譜法分析

在相關(guān)資料中，高效液相色譜法也被叫做是“高速液相色譜”、“高壓液相色譜”、“近代柱色譜”和“高分離度液相色譜”等，一般采用液體的方式進行檢測。在高壓系統(tǒng)中安裝有不同極性的單一或者混合的容積所對應(yīng)的色譜柱，在液體被輸入系統(tǒng)后，各種成分會被分離開，從而在各種檢測器中進行相應(yīng)的檢測，以對試樣進行全面分析。

在實踐過程中采用高效液相色譜法，可以快速、定性的進行黃曲霉素的檢測，并且檢測下限較低，大大提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。一般情況下，20分鐘可以完成黃曲霉素的檢測，并將相關(guān)的毒素分離出來，檢測下限可以達到每千克0.5μg，與國家提出的糧食、油等食品中黃曲霉素的含量相比，濃度低很多。但是，高效液相色譜法使用的相關(guān)設(shè)備儀器成本較高，對樣品的要求也比較高，事先處理的相關(guān)操作比較繁瑣，如果采用免疫親和小柱進行處理，則會大大提高檢測成本。因此，采用高效液相色譜法進行黃曲霉素的檢測，在基層部門中無法進行推廣，只適用于國家或省級的相關(guān)檢測機構(gòu)中。

二、酶聯(lián)免疫法分析

一般情況下，酶聯(lián)免疫法也被叫做是酶聯(lián)免疫吸附法，通過將可溶性抗原或抗體吸附到聚苯乙烯等固態(tài)物質(zhì)上的方式，對免疫反應(yīng)進行定性和定量檢測，以保證檢測結(jié)果的可靠性。根據(jù)酶、免疫和生化計數(shù)的相關(guān)知識，對黃曲霉素的檢測進行全面分析，并靈活運用固態(tài)酶聯(lián)免疫吸附的相關(guān)原理，在聚苯乙烯微量反應(yīng)板的空穴中放入AFTB1特異性抗體，同時將樣品提取液（未知抗原）和酶標(biāo) AFTB1 抗原（已知抗原）放入其中，讓他們與抗體進行強烈的免疫競爭方反應(yīng)。待上述操作完成后，加入酶底物進行顯色，并根據(jù)顏色的深淺情況，對抗體和酶標(biāo)AFTB1抗原結(jié)合的量進行判斷，如果樣品中的AFTB1較多，那么被抗原結(jié)合的酶標(biāo)AFTB1抗原則很少，即呈現(xiàn)淺色狀態(tài);如果樣品中的AFTB1較少，那么被抗原結(jié)合的酶標(biāo)AFTB1抗原則很多，即呈現(xiàn)深色狀態(tài)。

在實際檢測過程中，使用酶聯(lián)免疫法進行黃曲霉素的檢測，具有毒性小、檢測速度較快等特點，但試劑的使用壽命較短，并且重復(fù)性不強，必須在溫度較低的情況下才能進行保存。因此，酶聯(lián)免疫法檢測結(jié)果中，假陽性概率比較高，為了保證檢測結(jié)果的真實性和可靠性，必須配置專門的酶標(biāo)儀。與此同時，酶聯(lián)免疫法在進行基層檢測時，具有較高的暗度，對樣品提出了較高要求，因此，在進行脂肪量和含鹽量較高的樣品時，要事先進行相關(guān)處理后才能按照上述流程進行檢測。在實踐過程中，酶聯(lián)免疫法一般可以先進行初篩，在陰性狀態(tài)下則可去除，在陽性狀態(tài)下則可繼續(xù)下一步檢測。

三、免疫膠體金檢測法分析

在相關(guān)檢測中，免疫膠體金檢測法也被叫做金標(biāo)免疫層析法，通過在抗原以內(nèi)將膠體金看作是示蹤標(biāo)志的方式，可以了解黃曲霉素的分布情況，從而對樣品中黃曲霉素的檢測結(jié)果進行全面分析。一般膠體金是還原劑的作用下，氯金酸通過聚合的方式形成的具有一定大小的金顆粒，同時在靜電作用下，這種金顆?？梢员３直容^穩(wěn)定的膠體狀態(tài)，從而稱作是膠體金。在檢測過程中，堿性情況下膠體金會帶負電荷，從而與蛋白質(zhì)分子中的正電荷基團會緊密結(jié)合在一起。與此同時，作為特定的免疫反應(yīng)標(biāo)記物，可以將反應(yīng)物的定位和分布情況在電鏡下清晰顯示出來，以便于進行有效分析。例如：通過還原法使用檸檬酸三鈉進行膠體金顆粒的制作，并將抗黃曲霉素其中一個素標(biāo)記出來，同時在玻璃纖維上噴灑其單克隆抗體，這種素的偶聯(lián)抗原和二抗鼠抗驢會分別在硝酸纖維膜上結(jié)合。最后通過切割的方式，將樣本墊、膠金墊、硝酸纖維膜、吸水紙組裝切成膠體金試紙，并放入到檢測卡中進行檢測。

在實踐過程中，這種檢測方法所需要的時間比較短，操作比較簡單、方便和快捷，可用于單份樣品的檢測，具有非常高的檢測效率，從而在現(xiàn)場快速檢測中應(yīng)用較多。但是，通常是通過半定量的方式進行檢測，作為一種快速篩查的方法。

四、免疫親和柱和熒光光度法分析

由于免疫親和柱具有較強的免疫反應(yīng)活性、熒光光度計具有較高的檢測靈敏度，因此，將兩者結(jié)合在一起，可以形成一種新的監(jiān)測技術(shù)，成為了檢測糧油食品中黃曲霉素的一種國標(biāo)方法。在實際操作過程中，通過采用經(jīng)過濾、水稀釋和用含有黃曲霉素其中一種的抗體的免疫親和柱進行凈化后的甲醇與水的溶液進行提取，其中，甲醇和水的比例為七比三，在經(jīng)過甲醇的洗滌和脫水后，在添加

溴溶液進行行衍生，可以有效提高檢測靈敏度，從而提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

采用這種方法進行黃曲霉素的檢測，與色譜法相比，準(zhǔn)確性更高，操作更簡單、方便和快捷，并且不會出現(xiàn)安全事故，在不需要進行毒素標(biāo)樣、毒氣柜和不與黃霉曲素直接接觸的情況下，有機試劑的用量也比較少，從而節(jié)省檢測時間。但是，這種方法只適合于檢測黃曲霉素的總量，不能用于單獨檢測中，對水和試劑都有較高的要求，必須在高純水和重蒸水情況下，才能保證檢測結(jié)果的可靠性。

結(jié)束語：

綜上所述，在實踐過程中，糧油食品中黃曲霉素的檢測，需要根據(jù)不同級別、不同機構(gòu)性質(zhì)來選擇合適的檢測方法，才能滿足上述各種方法的檢測特點，從而保證檢測結(jié)果的可靠性，使檢測銷量和檢測率得到不斷提高，最終提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，確保食品食用過程的安全。

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