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    菌糠用作菌劑吸附劑的初步探索*

    2017-03-28 10:51:20劉冬華伍善東孔利華
    中國食用菌 2017年2期
    關(guān)鍵詞:草炭麥麩活菌

    劉冬華,伍善東,肖 蕾,孔利華

    (湖南省微生物研究院植保室,湖南 長沙 410009)

    〈生理生化〉

    菌糠用作菌劑吸附劑的初步探索*

    劉冬華,伍善東**,肖 蕾,孔利華

    (湖南省微生物研究院植保室,湖南 長沙 410009)

    為了獲得適合于解淀粉芽孢桿菌4-3菌液的吸附劑,分別選用麥麩、草炭、菌糠吸附解淀粉芽孢桿菌4-3發(fā)酵菌液,進(jìn)行了常溫下的保藏試驗(yàn)。結(jié)果表明,以菌糠作為吸附劑保藏效果最好,保藏14個(gè)月時(shí),處理4的活菌數(shù)最多,為6.5×108CFU·mL-1,草炭次之,麥麩最差。

    菌糠;吸附劑;保藏

    菌糠(fungus chaff)是在食用菌生產(chǎn)過程中產(chǎn)生的一類廢棄物。它是由食用菌菌絲在培養(yǎng)料中充分生長產(chǎn)生子實(shí)體,在子實(shí)體采收完后遺留下來的培養(yǎng)料殘余,故而又稱之為菇渣 (mushroom residue)。隨著食用菌工廠化栽培的發(fā)展,產(chǎn)生大量菌糠,對廢棄菌渣的再利用研究已成為近年研究熱點(diǎn)。如李碧瓊等[1]利用廢菌渣栽培姬松茸;談峰[2]利用木腐菌菌糠栽培雙孢蘑菇;張丕奇等[3]利用黑木耳菌渣栽培黑木耳;劉明廣等[4]利用杏鮑菇菌渣作為有機(jī)肥栽培雪菜;秦翠靜等[5]在飼料中應(yīng)用菌糠做為反芻動(dòng)物的粗飼料;李勝杰等[6-7]利用蘆筍桿菌渣作為有機(jī)肥栽培黃瓜和辣椒。本文分別選用菌糠、草炭和麥麩做為菌劑的吸附劑,比較了菌糠、草炭和麥麩的保藏效果,其中以菌糠作為吸附劑保藏效果最好,現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

    1 材料與方法

    1.1 供試菌株

    解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)4-3,為從油菜中分離的內(nèi)生菌,保藏的編號(hào)為CCTCC

    1.2 培養(yǎng)基配方及其培養(yǎng)條件

    培養(yǎng)基配方:甘露醇1.8 g、胰蛋白胨1.6 g、NaCl 0.4 g、磷酸二氫鉀0.4 g、硫酸鎂0.3 g、1%鉬酸鈉溶液0.4 mL、1%的檸檬酸鐵溶液0.5 mL、1%硫酸錳溶液0.2 mL,500 mL三角瓶裝量100 mL,pH7.2。培養(yǎng)溫度32℃,轉(zhuǎn)速220 r·min-1。

    1.3 吸附劑的處理

    將麥麩、草炭、菌糠烘干,粉碎后過40目篩。將3種吸附劑分別稱取200 g分裝于聚乙烯塑料袋中,每種9袋,用套環(huán)封蓋后于126℃滅菌60 min。每次滅菌后需將袋中可能結(jié)塊的內(nèi)容物充分拍碎后再進(jìn)行下一次滅菌。經(jīng)反復(fù)滅菌5次后將袋內(nèi)吸附劑充分拍勻后備用。

    1.4 吸附菌液后的保藏和活菌計(jì)數(shù)

    將發(fā)酵好的解淀粉芽孢桿菌4-3菌液,經(jīng)活菌計(jì)數(shù)為2.60×109,分別按以下處理加入菌液,每個(gè)樣品重復(fù)3次,用封口機(jī)密封后,將菌劑充分拍勻,常溫條件下保藏。

    處理1:草炭200 g、菌液100 mL;處理2:草炭200 g、菌液150 mL;處理3:草炭200 g、菌液200 mL;處理4:菌糠200 g、菌液100 mL;處理5:菌糠200 g、菌液150 mL;處理6:菌糠200 g、菌液200 mL;處理7:麥麩200 g、菌液100 mL;處理8:麥麩200 g、菌液150 mL;處理9:麥麩200 g、菌液200 mL。

    將做好的各個(gè)菌液吸附劑樣品,任意三選一剪開袋口,用接種鏟取出,準(zhǔn)確稱取1.00 g至放了50粒玻璃珠的100 mL無菌水三角瓶中,200 r·min-1振蕩30 min,吸取振蕩好的菌液0.5 mL至4.5 mL無菌水中進(jìn)行稀釋,稀釋至10-9,每次吸取前均將稀釋菌液在振蕩器上振蕩1 min,隨后從10-7、10-8、10-9各吸取0.5 mL稀釋菌液于滅過菌的平皿中,每平行3皿,然后加入20 mL左右滅菌培養(yǎng)基(約45℃),充分搖勻,待其完全冷卻后,將平皿倒置于28℃恒溫箱中培養(yǎng)3 d~4 d,計(jì)數(shù)活菌數(shù)。每間隔1個(gè)月取樣1次進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)。

    1.5 保藏菌液吸附劑水分含量的測定

    將保藏的各個(gè)菌液吸附劑樣品,各處理隨機(jī)選1袋,剪開袋口,用滅菌的接種鏟取出樣品,準(zhǔn)確稱取1.0 g~2.0 g樣品到干凈平皿中,編號(hào),將取出的樣品置于105℃電熱恒溫干燥箱中烘干至恒重,準(zhǔn)確稱重并記錄,取完樣品后馬上將保藏樣品封口,重復(fù)取樣2次并記錄結(jié)果。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 吸附菌液后的保藏和活菌計(jì)數(shù)

    各種菌液吸附劑樣品在各保藏時(shí)期的活菌計(jì)數(shù)檢測實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1。

    各處理在常溫陰涼處保藏的前3個(gè)月,菌劑菌數(shù)呈緩慢增加狀態(tài),在保藏3個(gè)月時(shí)達(dá)到峰值,其中以處理5的活菌數(shù)最多,為127.0×108CFU·mL-1,隨著保藏時(shí)間的增加,各處理活菌數(shù)逐漸減少。保藏5個(gè)月時(shí),處理 4的活菌數(shù)最多,為9.6×108CFU·mL-1;當(dāng)保藏14個(gè)月時(shí),處理4的活菌數(shù)最多,為6.5×108CFU·mL-1,當(dāng)菌劑水分含量越低時(shí),則菌劑菌數(shù)變化趨勢越平穩(wěn)。

    表1 各處理不同保藏時(shí)間的活菌數(shù)Tab.1 Number of viable bacteria in the different treatments and preservation time

    在菌劑的保藏過程中,活菌計(jì)數(shù)時(shí)顯示麥麩最容易受到霉菌污染,菌糠則易受細(xì)菌類雜菌污染(原因不詳)。在保藏14個(gè)月時(shí),以麥麩作為吸附劑的處理7~處理9,因?yàn)槊咕喽鴽]有進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)。

    解淀粉芽孢桿菌4-3發(fā)酵菌液分別經(jīng)菌糠、草炭和麥麩這三種吸附劑吸附后,經(jīng)過14個(gè)月的保藏試驗(yàn),進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)后確定菌糠做為吸附劑的保藏效果最好,草炭次之,麥麩最差,菌糠用作解淀粉芽孢桿菌4-3的吸附劑是完全可行的。

    2.2 各處理水分含量的測定

    各處理水分含量的差異除了由添加的菌液量不同造成的,還可能是由于封口的套環(huán)蓋留有一小口,具一定的透氣性,在滅菌時(shí)有蒸汽進(jìn)入造成。結(jié)果顯示麥麩最容易吸水,菌糠次之,草炭最不易吸水,各處理水分含量見表2。

    菌劑的含水量(菌液添加量)與菌數(shù)的變化呈現(xiàn)含水量越少菌數(shù)變化越穩(wěn)定的趨勢??梢栽诒WC菌劑活菌數(shù)量的前提下,盡可能降低菌劑含水量,會(huì)更有利于菌劑的保藏。

    表2 各處理的水分含量Tab.2 Moisture content of the different treatment

    3 討論

    試驗(yàn)結(jié)果表明菌糠是1種良好的吸附劑,可以用作菌劑、菌肥吸附劑進(jìn)行下一步的試驗(yàn)。

    解淀粉芽孢桿菌4-3菌液使用菌糠吸附后,3個(gè)處理在常溫保藏14個(gè)月后的活菌數(shù)與保藏初始時(shí)的活菌數(shù)變化不大,均可達(dá)108CFU·mL-1以上,其中處理4活菌數(shù)變化與保藏初始時(shí)的活菌數(shù)基本相當(dāng),說明菌糠作為吸附劑的穩(wěn)定性很好。吸附劑的穩(wěn)定性與菌液的添加量(菌劑含水量)密切相關(guān),它們之間的相關(guān)性有待于進(jìn)一步研究。

    [1]李碧瓊,陳政明,凌龍振,等.利用廢菌渣栽培姬松茸優(yōu)良菌株的篩選試驗(yàn)[J].中國食用菌,2016,35(5):9-11.

    [2]談峰.不同木腐菌菌糠對雙孢蘑菇生長和產(chǎn)量的影響[J].中國食用菌,2016,35(5):12-16.

    [3]張丕奇,戴肖東,韓增華,等.黑木耳菌渣再利用栽培黑木耳試驗(yàn)[J].食用菌,2016,38(4):24-25.

    [4]劉明廣,陳毛華,丁寅寅,等.杏鮑菇菌渣有機(jī)肥栽培雪菜試驗(yàn)[J].食用菌,2016,38(3):67-68.

    [5]秦翠靜,程書梅,廉紅霞,等.菌糠在飼料中的應(yīng)用研究[J].食用菌,2016,221(2):5-6.

    [6]李勝杰,魏云輝,胡中娥,等.蘆筍桿菌渣有機(jī)肥在黃瓜栽培上的應(yīng)用效果[J].中國食用菌,2016,35(2):28-31.

    [7]魏云輝,李勝杰,胡中娥,等.富硒蘆筍稈菌渣有機(jī)肥在辣椒上的應(yīng)用研究[J].食用菌,2016,38(2):79-82.

    Study on Fungus Chaff Used as Inoculants Adsorbent

    LIU Dong-hua,WU Shan-dong,XIAO Lei,KONG Li-hua
    (Hunan Institute of Microbiology,Changsha 410009,China)

    In order to obtain the optimal adsorbent of Bacillus amyloliquefaciens 4-3,the wheat bran,peat and mushroom substrate were separately used as adsorbent of B.amyloliquefaciens 4-3,meanwhile,the preservation test was performed at room temperature.The results showed that the best adsorbent was the mushroom substrate in the preservation test,and the viable count of treatment 4 was the best among them,which was 6.5×108CFU·mL-1.The second one was peat and the worst one was wheat bran.

    fungus chaff;adsorbent;preservation

    S646.9

    A

    1003-8310(2017)02-0030-03

    10.13629/j.cnki.53-1054.2017.02.009

    湖南省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2015NK3056)。

    劉冬華(1956-),男,本科,副研究員,主要從事植物保護(hù)與肥料研究。E-mail:505212109@qq.com

    **通信作者:伍善東(1978-),男,本科,工程師,主要從事植物保護(hù)與微生物肥料研究。E-mail:1059995305@qq.com

    2017-01-23M2014320。

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