• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    人工濕地(SEEP)中重要微生物基因的分布

    2014-12-30 18:22:12宋成安德烈歐格母
    科技創(chuàng)新導(dǎo)報(bào) 2014年31期
    關(guān)鍵詞:區(qū)劃甲烷土壤

    宋成+安德烈歐格母

    摘 要:該論文旨在調(diào)查人工濕地SEEP的生態(tài)效益和影響。SEEP是與蓄水池相關(guān)的雨水生態(tài)建設(shè)項(xiàng)目的簡稱。該蓄水池具有不可否認(rèn)的價(jià)值,但是卻長期被人們忽視。經(jīng)過集中調(diào)查研究之后,發(fā)現(xiàn)這和整個(gè)環(huán)境具有聯(lián)系。例如,(1)產(chǎn)生數(shù)噸溫室氣體。(2)處理受污染的水源,例如從水中清除N和P資源。(3)關(guān)于碳、氮和硫循環(huán)的其他生態(tài)有利影響。因此,非常值得探索其功能并建立對(duì)濕地功能非常重要的基因分布基準(zhǔn)線。該文通過使用DNA提取和PCR技術(shù)對(duì)SEEP中每個(gè)區(qū)劃的不同基因種類(例如,dsrB、mcrA、nirK、nirS和amoA基因)進(jìn)行了研究并將在此進(jìn)行報(bào)告。

    關(guān)鍵詞:SEEP ?人工濕地 ?dsrB基因 ?mcrA基因 ?nirK ?nirS基因和amoA基因

    中圖分類號(hào):X17 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1674-098X(2014)11(a)-0119-03

    濕地是一片無論是永久性還是季節(jié)性都充滿水的區(qū)域,因此總是呈現(xiàn)出明顯的生態(tài)系統(tǒng)特征。濕地與陸地最重要的區(qū)別就是濕地有還原性土壤,支持水生植物生長。

    由于濕地對(duì)動(dòng)植物和人類有至關(guān)重要的好處,成千上萬的生態(tài)學(xué)家對(duì)濕地進(jìn)行了無數(shù)次研究,即使人們過去認(rèn)為濕地毫無用處,但是現(xiàn)在人們對(duì)該系統(tǒng)優(yōu)勢的認(rèn)識(shí)正處于熱火朝天的趨勢。濕地巨大的、不可或缺的價(jià)值包括:

    (1)具有商業(yè)價(jià)值的魚類棲息地。

    (2)地下水補(bǔ)給。

    (3)休閑機(jī)會(huì),例如療養(yǎng)。

    (4)美學(xué)價(jià)值。

    (5)改善水質(zhì)。

    (6)厭氧區(qū)域的研究價(jià)值。

    在地球上,有幾種微生物對(duì)碳循環(huán)、氮循環(huán)和硫循環(huán)相關(guān)的生態(tài)系統(tǒng)具有重要的作用。

    至于碳循環(huán),濕地可以作為蓄水池儲(chǔ)存非完全氧化碳源或產(chǎn)生甲烷和其他溫室氣體。

    硫酸鹽還原菌(SRB)可以對(duì)重金屬的直接和間接降解進(jìn)行調(diào)解并有助于有機(jī)污染物進(jìn)行生物降解(3)。因此,使用這些細(xì)菌處理徑流水非常有利。SRB還可以將硫酸鹽異化作用和異養(yǎng)碳降解或二氧化碳固定進(jìn)行結(jié)合,碳酸鹽還原會(huì)直接影響濕地中的碳循環(huán)(17)。對(duì)于我的項(xiàng)目來說,我將更加關(guān)注相關(guān)基因的相對(duì)豐度。在這些細(xì)菌中所發(fā)現(xiàn)的普通基因是dsrB(異化酸性亞硫酸鹽還原酶)基因。我將通過對(duì)比這種基因的濃度發(fā)現(xiàn)人工濕地的特殊功能。至于其他功能,他們對(duì)產(chǎn)甲烷的降解途徑所涉及的含微生物的酶作用物的競爭非常有利(4)。這意味著這些含dsrB基因的細(xì)菌也可能參與了產(chǎn)甲烷菌作用。關(guān)于濕地甲烷通量的硫酸鹽還原作用在將來有望進(jìn)一步擴(kuò)展。

    產(chǎn)甲烷菌是地球碳循環(huán)過程中的一種必要成分。他們可以在使用氫進(jìn)行二氧化碳降解或轉(zhuǎn)移甲基化混合物之前進(jìn)行厭氧催化產(chǎn)生甲烷。有一種酶能夠刺激受輔酶-M(被稱為甲基輔酶-M還原酶(MCR))束縛的甲基還原。這種酶能夠調(diào)節(jié)甲烷產(chǎn)生路徑中的目標(biāo)過程(10)。在特定環(huán)境中,例如高pH或高溫環(huán)境,人們認(rèn)為這種受產(chǎn)甲烷菌支配的酶種類繁多。這個(gè)因素可能影響濕地SEEP的生態(tài)系統(tǒng)(2、10、)。所以,我只選取了mcrA基因作為本項(xiàng)目的目標(biāo)基因,調(diào)查是否任何區(qū)劃都能產(chǎn)生與其他循環(huán)和生物作用相結(jié)合的甲烷。

    至于氮循環(huán),由于濕地近似于還原環(huán)境,用于處理受污染的城市徑流水,因此我選取了脫氮菌作為研究目標(biāo)。這指的是水中氮源的降解?,F(xiàn)在也有一些詳細(xì)說明脫氮作用基因的論文。我選取了nirK和nirS(亞硝酸還原酶)基因進(jìn)行試驗(yàn)。脫氮是一種厭氧過程,因?yàn)槲覀冃枰銐虻乃采w土壤。這個(gè)過程也結(jié)合了其他循環(huán)。

    最后一種我所感興趣的基因就是amoA(氨單加氧酶)基因。這種基因在濕地中不容易發(fā)現(xiàn),因?yàn)楹羞@種基因的微生物通常生活在含氧環(huán)境中。其他科學(xué)家已經(jīng)提純出了一種將單加氧酶特有遺傳密碼編入亞硝酸單胞菌物種中的特殊縮多氨酸,并且我可以從其他論文中獲取這些內(nèi)容(8)。這些細(xì)菌可以調(diào)解硝化作用中的一個(gè)非常重要的步驟(6)并參與甲烷和一氧化碳循環(huán)過程(8、9和10)。除此之外,他們還降解有機(jī)物,減少臭味(6)。我們最近發(fā)現(xiàn)越來越多的環(huán)境科學(xué)家在進(jìn)行厭氧環(huán)境中微生物的研究(9)。這也是選擇這種基因的最重要的原因。

    1 研究方向

    雨水生態(tài)建設(shè)項(xiàng)目(SEEP)開始于1995年,用于在自然區(qū)和教學(xué)實(shí)驗(yàn)室(NATL)范圍中其所在地內(nèi)的研究和教育。從根本上說,這是一個(gè)人工濕地,用于處理污染水并在深貯水池中存儲(chǔ)淡水。

    雨水徑流指大暴雨時(shí)或之后從土地中流走的水。這種徑流會(huì)造成大量污染物流入河流、湖泊或土壤下方的地下水中。在暴雨中流走的污染物的類型和來源包括:重金屬、懸浮體、氯化物和其他化學(xué)成分,例如碳?xì)浠衔铮?)。這些污染物會(huì)極大地影響水體的質(zhì)量和相關(guān)生態(tài)系統(tǒng)。在城市化地區(qū)(例如,大都市),每天都會(huì)產(chǎn)生大量廢棄物,如垃圾、油料和重金屬。這些污染物污染了水下的土壤。這些土壤通過生物富集會(huì)對(duì)人類或其他動(dòng)物產(chǎn)生不利影響。SEEP能夠收集一些城市地區(qū)的暴雨徑流水,緩慢排放,從而減少洪水泛濫的可能性,因此SEEP在處理這個(gè)問題方面起到了至關(guān)重要的作用。

    這也是一個(gè)管理計(jì)劃,在佛羅里達(dá)大學(xué)自然區(qū)和教學(xué)實(shí)驗(yàn)室(NATL)所在地增加一個(gè)雨水貯留池進(jìn)行生物多樣性研究(盡管所列物種相對(duì)于自然濕地來說遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠),同時(shí)優(yōu)化貯水池在研究和教育方面的用途。淡水濕地也在產(chǎn)生優(yōu)先的溫室氣體甲烷和其他碳化氣水源,但是淡水濕地同時(shí)又起到了碳沉積作用(10)。濕地中的水下環(huán)境是厭氧的,因此一些濕地促使或幫助厭氧生物存活下來,并通過提供充足的養(yǎng)分使它們發(fā)揮作用。這是指產(chǎn)生甲烷和一些發(fā)酵產(chǎn)物,例如丙酸鹽、丁酸鹽、醋酸鹽和酵類。

    SEEP可分為三個(gè)區(qū)域:(1)單元I,即前池,其作用是對(duì)受污染最嚴(yán)重的雨水進(jìn)行預(yù)處理,(2)單元II,其作用是對(duì)受污染比較嚴(yán)重的雨水渠進(jìn)行二線處理,(3)單元III,這是深淡水池的所在地。endprint

    本研究旨在找到適用于氮循環(huán)(對(duì)氨單加氧酶進(jìn)行編碼)、硫循環(huán)(硫酸鹽還原)和碳循環(huán)(甲烷產(chǎn)生和甲烷氧化)的基因。

    根據(jù)佛羅里達(dá)大學(xué)環(huán)境保護(hù)研究委員會(huì)2005-2015年總體綜合規(guī)劃,盡管已經(jīng)證明了SEEP多方面的好處,但是還未充分了解潛在危害徑流的影響,因此需要進(jìn)一步研究??偠灾磥硌芯恐谐錆M挑戰(zhàn),這也是我選擇將其作為畢業(yè)論文題目的原因。我所需要完成的就是提供一個(gè)SEEP的輪廓框架,說明某些微生物中基因相對(duì)豐度分布。從而使本論文對(duì)將來其他進(jìn)一步的研究起到引導(dǎo)作用。

    2 研究目的

    該論文的目的是繪制出SEEP在這些方面的整體框架。

    2.1 碳循環(huán)

    SEEP不同區(qū)劃中參與碳循環(huán)的基因的相對(duì)濃度。

    2.2 硫循環(huán)

    SEEP不同區(qū)劃中參與硫循環(huán)的基因的相對(duì)濃度。

    2.3 氮循環(huán)

    SEEP不同區(qū)劃中參與氮循環(huán)的基因的相對(duì)濃度。

    3 研究假設(shè)

    這個(gè)區(qū)域可能存在各種各樣的氮化物,例如,含有amoA基因的亞硝酸單胞菌只能在含氧環(huán)境中生存,我認(rèn)為amoA基因的濃度應(yīng)該從T1降低到DM1,或者根本沒有amoA基因。

    我應(yīng)該在所有區(qū)域都找到mcrA基因。用于SM1和SM2都屬于厭氧環(huán)境,因此在其中應(yīng)該能找到大量mcrA基因。一些細(xì)菌群可以和其他厭氧菌一起生存,是因?yàn)樗麄冃枰脜捬蹙?,從厭氧菌中獲得發(fā)酵產(chǎn)物存活下去。

    至于dsrB基因,所有區(qū)域應(yīng)該都含有。

    在所有區(qū)域(除B1和B2以外)都能找到脫氮原核生物,因?yàn)檫@些種類的細(xì)菌需要厭氧環(huán)境,例如水下土壤。相關(guān)基因有nirK和nirS。

    4 材料和方法

    4.1 采樣

    這次采樣之旅的帶頭人是Clark博士、Alex Rozin、Elise Morison和濕地俱樂部的學(xué)生。我們從2013年10月20日開始搜集材料。所需要的工具包括去心器、容器、過濾器、活塞、刀子、袋子、冷干冰、樣品勺、記號(hào)筆、數(shù)據(jù)表、鉛筆、帶夾子的寫字板、地圖、水桶、木槌和手套。我們起初需要將去心器埋入土壤,然后取出來。我們有一個(gè)活塞用來將有機(jī)質(zhì)土壤從去心器中擠到一個(gè)有刻度的容器中。最終將土壤轉(zhuǎn)移到塑料袋中,充分混合。之后,再次重復(fù),挖出更深層的土壤。通過土壤顏色就很容易區(qū)分礦質(zhì)土壤和有機(jī)土壤。有機(jī)土壤的顏色深,但是礦質(zhì)土壤的顏色十分淺。我們只需要有機(jī)土壤。

    我們有11個(gè)區(qū)域。我們從每個(gè)區(qū)域收集了3份土壤樣品,我們貼上了X-1、X-2和X-3標(biāo)簽(例如T-1,我們有T1-1、T1-2和T1-3),而DM1,我們只收集了一份樣品。對(duì)于深度,每個(gè)核心由于其所含的有機(jī)物質(zhì)量不同而有很大的差異,我們從T1-3中收集了2個(gè)深度范圍。一個(gè)是0~2 cm;另一個(gè)是2~16 cm。但是對(duì)于T2-3,我們所收集的范圍是0~2 cm和2~7 cm。收集樣品之后,我們將其儲(chǔ)存在了-80℃的冷凍箱中。除非深度在0~2 cm,否則收集不到礦質(zhì)土壤。(我們有了有機(jī)質(zhì)深度的數(shù)據(jù),在0~2 cm深度范圍,這些有機(jī)質(zhì)樣品有一些礦質(zhì)土壤)

    在進(jìn)行DNA提取之前,第一步是在研缽中將液氮用槌磨碎,磨得越碎越好。然后將土壤樣品變成粉末。

    4.2 DNA提取

    使用PowerSoil DNA Isolation Kit進(jìn)行DNA提取。附件A中列出了更加詳細(xì)的信息。

    下列步驟是通過凝膠電泳檢查結(jié)果。對(duì)于這個(gè)過程,我先制作了一瓶凝膠。凝膠的配方如下:

    (1)找到一個(gè)合適的瓶子。

    (2)稱3g瓊脂糖凝膠。

    (3)將所稱的瓊脂糖凝膠添加到瓶子中。

    (4)添加200 mL TAE(0.5倍)。

    (5)加熱,直到所有固體溶化。

    (6)添加2.5 μL/200 mL溴化乙錠。

    然后,我需要等凝膠冷卻,準(zhǔn)備運(yùn)行電泳。等到凝膠變得有一點(diǎn)熱的時(shí)候,將凝膠倒入容器中并添加0.5倍TAE緩沖。將電泳機(jī)器調(diào)整到120 V并運(yùn)行20 min。之后,我將凝膠取出,放到紫外光下進(jìn)行曝光,然后查看結(jié)果。

    4.3 聚合酵素鏈鎖反應(yīng)

    聚合酶鏈反應(yīng)擴(kuò)大我所需要的基因。附件B中列出了聚合酶鏈反應(yīng)試驗(yàn)計(jì)劃的詳細(xì)內(nèi)容。為了證實(shí)不是由于含有目標(biāo)DNA的緩沖池或試劑導(dǎo)致擴(kuò)大,需要一份陰性PCR對(duì)照樣品。陰性對(duì)照僅包括自分解水、引子和Gotaqs(使用水取代DNA)。

    同時(shí),還需要進(jìn)行陽性對(duì)照。以下是進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)陽性對(duì)照的步驟(只選了dsrB基因作為例子)。

    (1)從Elise(我們實(shí)驗(yàn)室的一名博士研究生)處獲得LB KAN盤,加熱到37 ℃。

    (2)使用活化環(huán)從Elise的4盤中記錄dsrB克隆數(shù)76。

    (3)將克隆品放到LB KAN盤上,并使用曲棍使其散開。(LB KAN是含有抗菌卡那霉素的培養(yǎng)基,將1 mL備用卡那霉素添加到1L熱壓處理過的LB瓊脂中而得到)。

    (4)放在37 ℃環(huán)境中培養(yǎng)2 d。

    (5)取出Elise的LB KAN液體培養(yǎng)基,取出500 μL液體培養(yǎng)基,用移液器吸到盤子上,將生物質(zhì)擦除,讓他們懸浮在500 μL液體培養(yǎng)基中。使用2轉(zhuǎn)每分鐘的速度分離10 min。

    (6)至于下列步驟,請參見QIAprep Spin Mini Prep Kit(目錄冊# 27104)。

    最后一步是為了檢查標(biāo)準(zhǔn)dsrB基因的濃度。城市徑流水從T1流向DM1,從未處理的水變成干凈淡水。T2是另一個(gè)處理受污染水的區(qū)劃,但是有一個(gè)截水溝阻止了水從T2流向DM1。但是,邊緣很少涉及到這個(gè)系統(tǒng)。市徑流水從T1流向DM1,從未處理的水變成干凈淡水。T2是另一個(gè)處理受污染水的區(qū)劃,但是有一個(gè)截水溝阻止了水從T2流向DM1。但是,邊緣很少涉及到這個(gè)系統(tǒng)。城市徑流水從T1流向DM1,從未處理的水變成干凈淡水。T2是另一個(gè)處理受污染水的區(qū)劃,但是有一個(gè)截水溝阻止了水從T2流向DM1。但是,邊緣很少涉及到這個(gè)系統(tǒng)。城市徑流水從T1流向DM1,從未處理的水變成干凈淡水。T2是另一個(gè)處理受污染水的區(qū)劃,但是有一個(gè)截水溝阻止了水從T2流向DM1。但是,邊緣很少涉及到這個(gè)系統(tǒng)。城市徑流水從T1流向DM1,從未處理的水變成干凈淡水。T2是另一個(gè)處理受污染水的區(qū)劃,但是有一個(gè)截水溝阻止了水從T2流向DM1。但是,邊緣很少涉及到這個(gè)系統(tǒng)。endprint

    5 結(jié)語

    采樣可能存在一些問題。從結(jié)果來看,對(duì)于每個(gè)基因聚合酶鏈反應(yīng)過程,每個(gè)區(qū)劃的3個(gè)復(fù)制品的環(huán)境應(yīng)該幾乎一樣。但很明顯,情況并不是這樣。我從Elise處得知,一些樣品不是從潮濕土壤中獲得的。由于是自然系統(tǒng),這當(dāng)然可以理解。在單個(gè)位置,不同的采樣位置之間也是各不相同的。這種變量并不意外。因此,我選擇計(jì)算平均值,取得更好、更合理的結(jié)果。

    至于DNA提取產(chǎn)物,我們可以發(fā)現(xiàn),我是從所有區(qū)劃中獲得DNA的,因此我可以繼續(xù)下列聚合酶鏈反應(yīng)過程。在他們所包含的有機(jī)物中他們的濃度各不相同。我僅對(duì)需要進(jìn)一步試驗(yàn)的區(qū)劃的幾個(gè)DNA運(yùn)行了電泳。DNA的數(shù)量能夠反映出有多少有機(jī)物。即使對(duì)于相同深度,即0~2 cm,我們發(fā)現(xiàn)他們的有機(jī)物豐度也是不同的。由于有氧環(huán)境的消費(fèi)率比厭氧環(huán)境的消費(fèi)率高,因此厭氧環(huán)境DNA平均質(zhì)量高于有氧環(huán)境DNA平均質(zhì)量。他們可以被完全氧化,但是卻無法積累足夠的有機(jī)物。我只在dsrB基因中遇到了一些污染物問題,但是相對(duì)于陽性對(duì)照和樣品來講,這些污染物微不足道。

    dsrB基因的結(jié)果是合理的。我們看到T1的dsrB基因豐度最大,緊接著是T2等。這非常適合將城市徑流水沖干凈。含有這種基因的微生物能夠降解受污染水中的硫化源。減少細(xì)菌的亞硫酸鹽所需的環(huán)境非常復(fù)雜。這種環(huán)境可能是浸水也可能是水流波動(dòng)。他們還能和其他細(xì)菌(例如,產(chǎn)甲烷菌)互養(yǎng),這樣產(chǎn)甲烷菌可以利用這些非完全氧化碳源或氫產(chǎn)生甲烷。很明顯,mcrA基因能和dsrB基因結(jié)合主要是為了互養(yǎng)。含有mcrA基因的細(xì)菌或古生菌需要持續(xù)的浸水狀態(tài),這就意味著完全缺氧環(huán)境。根據(jù)每個(gè)區(qū)劃的水深,我所獲得的結(jié)果是可以理解的。SM1和E2非常接近深水沼澤DM1。因此,他們也需要大量mcrA基因。

    NirS和nirK微生物更喜歡波動(dòng)的浸水環(huán)境,例如SM1和SM2。

    盡管NirS基因和nirK基因的作用幾乎是一樣的,但是NirS基因的豐度低于nirK基因的豐度。SEEP中種類各異的脫氮物種可以解釋這種情況。一些物種的nirK基因可能比NirS基因多。

    amoA基因的結(jié)果似乎比較復(fù)雜,但是我從另一篇論文中了解到了amoA基因的正確序列和尺寸(10)。由于不同區(qū)劃擁有不同類別的化學(xué)無機(jī)營養(yǎng)氨氧化菌,我因此得出我的結(jié)果是有意義的。這也是這些波段的主要原因。非常有趣的是,我們發(fā)現(xiàn)即使在深沼澤處也有大量amoA基因。下面就是對(duì)此的解釋。在深沼澤處,有一種植物擁有通氣組織。這種植物組織能夠?qū)⑼獠康难鮽魉偷礁恐車@樣一些蓄養(yǎng)細(xì)菌就可以在這個(gè)地方生長。因此,DM1的amoA基因濃度高也就可以理解了。其作用和擁有高濃度的C2相同。

    這些基因可以組成一個(gè)很長的濕地生物鏈。在深土壤地帶,薄壁組織可以傳送氧,并將氧提供給氨氧化菌。氨氧化菌會(huì)將氨鹽基轉(zhuǎn)化成硝酸鹽并將其釋放到周圍的土壤中。大多數(shù)地點(diǎn)都是厭氧的,并遠(yuǎn)離植物根部。這些脫氧菌會(huì)通過將硝酸鹽轉(zhuǎn)化成亞硝酸鹽(NO3andNO2)而獲得養(yǎng)分。他們還能和產(chǎn)甲烷菌結(jié)合。這些細(xì)菌在獲取養(yǎng)分時(shí),他們還能去除水中氮物質(zhì)。

    我的SM1-1土壤樣品仍然沒有獲得基因聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增的結(jié)果。這也是有可能的,因?yàn)樵摌悠分幸恍┮种埔蜃咏M織了聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增,例如Taq聚合酶抑制劑。

    參考文獻(xiàn)

    [1] Alexander,L.M.,R.Morris.聚合酶鏈反應(yīng)和環(huán)境監(jiān)測—— 前進(jìn)之路[J].水科學(xué)與技術(shù),1991(24):291-294.

    [2] Bodik I.,B.Herdova,M.Drtil.好寒環(huán)境中城市廢水的厭氧處理[J].生物工藝過程,2000(22):385-390.

    [3] CostaM.C,Duarte J.C.酸性礦水排水通過柱式反應(yīng)器中酸性土壤和有機(jī)廢物促進(jìn)硫酸鹽還原細(xì)菌活動(dòng)進(jìn)行生物降解[J].水、土壤和空氣污染,2005(1-4):325-345.

    [4] Gauci V.,Matthews E.,Dise N.,etal.20世紀(jì)和21世紀(jì)濕地甲烷源的硫污染抑制.美國國家科學(xué)協(xié)會(huì)公報(bào),2004.

    [5] Henry,S.,E.Baudoin,J.C.Lo ?pez-Guti?errez,F(xiàn).Martin-Laurent,A.Brau-man,L.Philippot.通過nirK基因的定向、定量對(duì)土壤中的反硝化細(xì)菌的量化[J].聚合酶鏈反應(yīng)微生物學(xué)方法雜志,2004(59):327-335.(勘誤表, 61:289-290.)

    [6] Hyman, M. R., I. B. Murton, D. J.Arp.烷類、烯類和炔類亞硝酸單胞菌中氨單加氧酶的相互作用[J].應(yīng)用與環(huán)境微生物學(xué),1988(54):3187-3190.

    [7] Joke Geets,Brigitte Borremans,Ludo Diels,et al.以DsrB基因?yàn)榛A(chǔ)的變性梯度凝膠電泳用于硫酸鹽還原菌的群落和多樣性調(diào)查[J].微生物方法雜志,2006(66):194-205.

    [8] Jones,R.D.,R.Y.Morita.使用無機(jī)化能營養(yǎng)氨基氧化劑進(jìn)行一氧化碳氧化[J].加拿大微生物學(xué)雜志,1983(29):1545-1551.

    [9] Jones,R.D.,R.Y.Morita.通過亞硝化球菌和亞硝酸單胞菌進(jìn)行甲烷氧化[J].應(yīng)用與環(huán)境微生物學(xué),1983(45):401-410.

    [10] Jones,R.D.馬尾藻海透光區(qū)一氧化碳和甲烷的分布和消耗,1991.endprint

    猜你喜歡
    區(qū)劃甲烷土壤
    土壤
    土壤里種下“萬有引力”
    液氧甲烷發(fā)動(dòng)機(jī)
    論煤炭運(yùn)輸之甲烷爆炸
    水上消防(2020年1期)2020-07-24 09:26:02
    靈感的土壤
    林芝市雷電風(fēng)險(xiǎn)區(qū)劃
    識(shí)破那些優(yōu)美“擺拍”——鏟除“四風(fēng)”的土壤
    基于“三線一單”的環(huán)境功能區(qū)劃實(shí)證研究
    Gas from human waste
    川渝傳統(tǒng)民居區(qū)劃的環(huán)境蘊(yùn)意
    午夜福利在线在线| 伦理电影大哥的女人| 观看免费一级毛片| 国产欧美日韩一区二区精品| 久久久久久久精品吃奶| 国产精品98久久久久久宅男小说| 国产精品嫩草影院av在线观看 | 一a级毛片在线观看| 最近最新中文字幕大全电影3| 一二三四社区在线视频社区8| 一级黄色大片毛片| 免费观看的影片在线观看| 动漫黄色视频在线观看| bbb黄色大片| 国产精品一及| 婷婷亚洲欧美| 看黄色毛片网站| 国产成人啪精品午夜网站| 给我免费播放毛片高清在线观看| 十八禁人妻一区二区| 精品免费久久久久久久清纯| 久久精品国产清高在天天线| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 亚洲片人在线观看| 男女下面进入的视频免费午夜| 成人三级黄色视频| 少妇人妻一区二区三区视频| 亚洲成人中文字幕在线播放| 午夜福利免费观看在线| 天天躁日日操中文字幕| 色av中文字幕| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 91午夜精品亚洲一区二区三区 | 亚洲七黄色美女视频| 成人av在线播放网站| 简卡轻食公司| 91在线精品国自产拍蜜月| 九九热线精品视视频播放| 久久国产乱子免费精品| 12—13女人毛片做爰片一| 亚洲电影在线观看av| 1000部很黄的大片| 午夜福利高清视频| 国产男靠女视频免费网站| 在线观看av片永久免费下载| 久久国产精品影院| 在线国产一区二区在线| 高清在线国产一区| 淫妇啪啪啪对白视频| netflix在线观看网站| 免费av观看视频| 搞女人的毛片| 国产黄片美女视频| 亚洲精品在线美女| 成人国产一区最新在线观看| 精品久久久久久,| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 高清日韩中文字幕在线| 五月玫瑰六月丁香| 亚州av有码| or卡值多少钱| 日韩av在线大香蕉| 91在线精品国自产拍蜜月| 国产高清激情床上av| 他把我摸到了高潮在线观看| 波多野结衣高清作品| АⅤ资源中文在线天堂| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 99热只有精品国产| 久久久久久国产a免费观看| 九九热线精品视视频播放| 免费看美女性在线毛片视频| 制服丝袜大香蕉在线| 亚洲黑人精品在线| 久久午夜福利片| 51国产日韩欧美| 国产亚洲欧美98| 中文字幕av在线有码专区| 国产极品精品免费视频能看的| 亚洲成人精品中文字幕电影| 色哟哟·www| 1024手机看黄色片| 中文字幕久久专区| 日韩中文字幕欧美一区二区| 国产精品一及| 国产亚洲精品久久久com| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 十八禁人妻一区二区| 国产av一区在线观看免费| 国产精品国产高清国产av| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 听说在线观看完整版免费高清| 99热6这里只有精品| 波多野结衣巨乳人妻| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 国产精品一区二区三区四区久久| 毛片女人毛片| 观看免费一级毛片| 精品一区二区三区人妻视频| 国产成年人精品一区二区| 午夜福利视频1000在线观看| 亚洲天堂国产精品一区在线| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 国产欧美日韩精品亚洲av| 亚洲五月婷婷丁香| 免费在线观看日本一区| 91久久精品电影网| 国产成人福利小说| 国产美女午夜福利| 窝窝影院91人妻| 久久热精品热| av在线天堂中文字幕| 国产视频内射| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 欧美日本亚洲视频在线播放| 亚洲av一区综合| 中出人妻视频一区二区| 一本综合久久免费| 91av网一区二区| 国产黄色小视频在线观看| 又爽又黄无遮挡网站| 国产伦在线观看视频一区| 少妇人妻一区二区三区视频| 欧美成人a在线观看| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 欧美日韩综合久久久久久 | 久久人人爽人人爽人人片va | 在线观看66精品国产| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 亚洲精品久久国产高清桃花| 老师上课跳d突然被开到最大视频 久久午夜综合久久蜜桃 | 国产精品三级大全| 无人区码免费观看不卡| 搡老熟女国产l中国老女人| 国产三级在线视频| 免费人成视频x8x8入口观看| 精品久久久久久成人av| 免费看光身美女| 亚洲精品在线观看二区| 午夜影院日韩av| 午夜福利欧美成人| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 国产精华一区二区三区| 在线播放国产精品三级| 国产午夜精品论理片| 亚洲中文字幕日韩| 一进一出抽搐gif免费好疼| 亚洲综合色惰| 国产高清有码在线观看视频| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 51国产日韩欧美| 色尼玛亚洲综合影院| 国产伦一二天堂av在线观看| 在线观看免费视频日本深夜| 亚洲av五月六月丁香网| 国产毛片a区久久久久| 国产高潮美女av| 婷婷色综合大香蕉| 亚州av有码| 嫩草影院精品99| 亚洲黑人精品在线| 三级毛片av免费| 欧美另类亚洲清纯唯美| 淫妇啪啪啪对白视频| 国产精品亚洲美女久久久| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 桃红色精品国产亚洲av| 桃色一区二区三区在线观看| 最近最新中文字幕大全电影3| netflix在线观看网站| 成人特级黄色片久久久久久久| 精品人妻视频免费看| 国产成年人精品一区二区| 色精品久久人妻99蜜桃| 午夜精品在线福利| 真人一进一出gif抽搐免费| 热99re8久久精品国产| 脱女人内裤的视频| 国语自产精品视频在线第100页| 在线a可以看的网站| 国产一区二区激情短视频| 日本一二三区视频观看| 免费看日本二区| 日韩欧美在线乱码| 日韩欧美国产一区二区入口| 高清日韩中文字幕在线| 毛片一级片免费看久久久久 | 久久久成人免费电影| 综合色av麻豆| 国产亚洲精品久久久com| 亚洲人成网站在线播| 18+在线观看网站| 好男人电影高清在线观看| 国产精品一区二区三区四区久久| 久久久久性生活片| 国产毛片a区久久久久| 精品乱码久久久久久99久播| 国产中年淑女户外野战色| 国内精品一区二区在线观看| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 一级av片app| 精品福利观看| 男女床上黄色一级片免费看| 少妇人妻精品综合一区二区 | 99在线人妻在线中文字幕| bbb黄色大片| 亚洲国产精品合色在线| АⅤ资源中文在线天堂| 老司机福利观看| 999久久久精品免费观看国产| 久久久久久大精品| 在线播放国产精品三级| 日本五十路高清| 夜夜爽天天搞| 亚洲中文日韩欧美视频| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 亚洲美女搞黄在线观看 | 国产伦一二天堂av在线观看| 久久久久久久久久黄片| 日本黄色片子视频| 亚洲色图av天堂| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 成年女人毛片免费观看观看9| 亚洲专区国产一区二区| 午夜福利免费观看在线| 午夜久久久久精精品| 久久久久久九九精品二区国产| 最近中文字幕高清免费大全6 | 亚洲天堂国产精品一区在线| 亚洲乱码一区二区免费版| 欧美黑人巨大hd| 精品一区二区三区av网在线观看| 精品人妻视频免费看| 十八禁人妻一区二区| 脱女人内裤的视频| 国产不卡一卡二| 午夜精品在线福利| 国产毛片a区久久久久| 亚洲18禁久久av| 最新在线观看一区二区三区| 身体一侧抽搐| 狠狠狠狠99中文字幕| 亚洲人成网站在线播| 国产高清视频在线播放一区| 欧美zozozo另类| 直男gayav资源| 日本熟妇午夜| 亚洲av美国av| 日本黄色片子视频| 亚洲第一区二区三区不卡| 在线免费观看的www视频| 91在线精品国自产拍蜜月| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 国产毛片a区久久久久| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 国产人妻一区二区三区在| 久久久久久久久久成人| 亚洲av成人av| 久久伊人香网站| 国产高清视频在线播放一区| 啪啪无遮挡十八禁网站| 少妇的逼水好多| 国产一区二区在线观看日韩| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 国产探花极品一区二区| 精品午夜福利在线看| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 欧美区成人在线视频| 欧美性猛交黑人性爽| 校园春色视频在线观看| 悠悠久久av| 日韩欧美免费精品| 亚洲欧美日韩高清在线视频| avwww免费| 国产精品嫩草影院av在线观看 | 国产毛片a区久久久久| 亚洲18禁久久av| 国产69精品久久久久777片| 国产老妇女一区| 美女xxoo啪啪120秒动态图 | 成人特级av手机在线观看| 成年女人毛片免费观看观看9| 亚洲国产精品合色在线| 丁香欧美五月| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 三级国产精品欧美在线观看| 成人国产综合亚洲| 少妇人妻一区二区三区视频| 嫩草影院精品99| 欧美成狂野欧美在线观看| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 老熟妇仑乱视频hdxx| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 日本 欧美在线| 色av中文字幕| 亚洲欧美日韩东京热| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 日韩 亚洲 欧美在线| 99久久99久久久精品蜜桃| 成人国产一区最新在线观看| 2021天堂中文幕一二区在线观| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 日韩欧美精品免费久久 | 国产极品精品免费视频能看的| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 国产亚洲av嫩草精品影院| 精品一区二区三区av网在线观看| 日本免费一区二区三区高清不卡| 在线免费观看的www视频| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 欧美高清性xxxxhd video| 黄色日韩在线| 亚洲综合色惰| 久久久国产成人免费| 看片在线看免费视频| 亚洲真实伦在线观看| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 欧美+日韩+精品| 亚洲自偷自拍三级| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 婷婷精品国产亚洲av在线| 99riav亚洲国产免费| 91狼人影院| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 亚洲天堂国产精品一区在线| 一a级毛片在线观看| 久久99热6这里只有精品| 亚洲国产高清在线一区二区三| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 直男gayav资源| 精品人妻1区二区| 最近最新免费中文字幕在线| 伦理电影大哥的女人| 舔av片在线| 亚洲在线自拍视频| 国产一区二区在线观看日韩| 免费在线观看成人毛片| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 国模一区二区三区四区视频| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 国产精品电影一区二区三区| 久久久久久久久大av| 又爽又黄无遮挡网站| 精品人妻偷拍中文字幕| 简卡轻食公司| 精品不卡国产一区二区三区| 国产黄色小视频在线观看| 成人精品一区二区免费| 少妇的逼好多水| 欧美成人免费av一区二区三区| 成人国产综合亚洲| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 国产亚洲av嫩草精品影院| 波野结衣二区三区在线| 69人妻影院| 看黄色毛片网站| www.色视频.com| 久久久国产成人免费| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 亚洲成av人片在线播放无| 99久久九九国产精品国产免费| АⅤ资源中文在线天堂| 免费在线观看成人毛片| a级一级毛片免费在线观看| 国产三级在线视频| 欧美在线一区亚洲| 十八禁国产超污无遮挡网站| 中文字幕av成人在线电影| 日日干狠狠操夜夜爽| 国产在视频线在精品| 国产精品98久久久久久宅男小说| 午夜福利18| 亚洲精品影视一区二区三区av| 日本一本二区三区精品| 日韩免费av在线播放| 偷拍熟女少妇极品色| 亚洲avbb在线观看| 亚洲精品在线观看二区| 欧美xxxx性猛交bbbb| 国产精品亚洲一级av第二区| 在线观看午夜福利视频| 亚洲经典国产精华液单 | 日日夜夜操网爽| 黄片小视频在线播放| 欧美另类亚洲清纯唯美| 精品久久久久久久久亚洲 | a级一级毛片免费在线观看| 男女床上黄色一级片免费看| 亚洲三级黄色毛片| 色综合亚洲欧美另类图片| 成年女人毛片免费观看观看9| 午夜福利在线在线| 亚洲人成电影免费在线| 一区二区三区高清视频在线| 好男人在线观看高清免费视频| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 国模一区二区三区四区视频| 99视频精品全部免费 在线| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 99久久九九国产精品国产免费| 免费看美女性在线毛片视频| 欧美高清成人免费视频www| 欧美一区二区国产精品久久精品| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 九色成人免费人妻av| 亚洲av成人精品一区久久| 男女下面进入的视频免费午夜| 特大巨黑吊av在线直播| 一a级毛片在线观看| 国产精品伦人一区二区| 亚洲精品日韩av片在线观看| 免费看日本二区| 精华霜和精华液先用哪个| 欧美色欧美亚洲另类二区| 91久久精品电影网| 三级毛片av免费| 此物有八面人人有两片| aaaaa片日本免费| 在线观看av片永久免费下载| 久久久国产成人免费| 麻豆久久精品国产亚洲av| 成人av在线播放网站| av在线蜜桃| 日本一二三区视频观看| 永久网站在线| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 两个人的视频大全免费| 国产淫片久久久久久久久 | 99久久无色码亚洲精品果冻| 免费无遮挡裸体视频| 欧美黑人巨大hd| 亚洲色图av天堂| 日本 欧美在线| 99视频精品全部免费 在线| 一本久久中文字幕| 麻豆久久精品国产亚洲av| 简卡轻食公司| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 首页视频小说图片口味搜索| avwww免费| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 色综合亚洲欧美另类图片| 九色国产91popny在线| 男女床上黄色一级片免费看| 波多野结衣巨乳人妻| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 91九色精品人成在线观看| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 欧美精品啪啪一区二区三区| 精品久久久久久久末码| 1000部很黄的大片| 老司机深夜福利视频在线观看| 91麻豆精品激情在线观看国产| aaaaa片日本免费| 小说图片视频综合网站| 极品教师在线免费播放| 日韩大尺度精品在线看网址| 男女床上黄色一级片免费看| 丁香六月欧美| a级毛片a级免费在线| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 亚洲av二区三区四区| 18美女黄网站色大片免费观看| 在线天堂最新版资源| 成年人黄色毛片网站| 大型黄色视频在线免费观看| xxxwww97欧美| 午夜福利欧美成人| 国产精品一区二区免费欧美| 99在线人妻在线中文字幕| 欧美高清成人免费视频www| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 亚洲av五月六月丁香网| 久久午夜福利片| 色哟哟哟哟哟哟| 欧美xxxx性猛交bbbb| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 欧美极品一区二区三区四区| 黄色女人牲交| 欧美一级a爱片免费观看看| 久久久久久国产a免费观看| 91在线观看av| 欧美成人a在线观看| 成人特级黄色片久久久久久久| 日韩有码中文字幕| av在线观看视频网站免费| 亚洲av电影不卡..在线观看| 一进一出好大好爽视频| 99热精品在线国产| 观看美女的网站| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 久9热在线精品视频| 日韩精品青青久久久久久| 91麻豆av在线| 国产91精品成人一区二区三区| 国产av麻豆久久久久久久| 俄罗斯特黄特色一大片| av天堂中文字幕网| 精品一区二区三区视频在线| 精品人妻1区二区| 亚洲男人的天堂狠狠| 精品乱码久久久久久99久播| 亚洲午夜理论影院| 亚洲av熟女| 全区人妻精品视频| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 五月伊人婷婷丁香| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 人人妻人人看人人澡| 免费看美女性在线毛片视频| 国产午夜精品论理片| 久久亚洲真实| 人妻夜夜爽99麻豆av| 久久久久性生活片| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 99精品在免费线老司机午夜| 欧美日韩乱码在线| 日本黄色视频三级网站网址| 夜夜爽天天搞| 小说图片视频综合网站| 一个人观看的视频www高清免费观看| 欧美激情久久久久久爽电影| 亚洲av第一区精品v没综合| 搞女人的毛片| 最近中文字幕高清免费大全6 | 悠悠久久av| 午夜激情欧美在线| 此物有八面人人有两片| 免费在线观看成人毛片| av天堂在线播放| 日本黄色片子视频| 深夜a级毛片| 亚洲avbb在线观看| 国产主播在线观看一区二区| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 亚洲美女黄片视频| 欧美色欧美亚洲另类二区| av天堂在线播放| 在线免费观看不下载黄p国产 | 悠悠久久av| 99精品久久久久人妻精品| 亚洲真实伦在线观看| av黄色大香蕉| 一个人免费在线观看的高清视频| 少妇高潮的动态图| 精品欧美国产一区二区三| 成人三级黄色视频| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 国产精品爽爽va在线观看网站| 天天一区二区日本电影三级| 毛片女人毛片| 久久国产乱子免费精品| 真实男女啪啪啪动态图| 99国产综合亚洲精品| 欧美不卡视频在线免费观看| 久久6这里有精品| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 久久精品影院6| 成人精品一区二区免费| 51午夜福利影视在线观看| 色哟哟哟哟哟哟| 欧美中文日本在线观看视频| 香蕉av资源在线| 在线国产一区二区在线| 狠狠狠狠99中文字幕| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 亚洲精品影视一区二区三区av| 韩国av一区二区三区四区| 伦理电影大哥的女人| 欧美成人性av电影在线观看| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 欧美成人a在线观看| 国产精品亚洲一级av第二区| 亚洲成av人片免费观看| 我的老师免费观看完整版| 禁无遮挡网站| 999久久久精品免费观看国产| 欧美乱妇无乱码| 国内精品美女久久久久久| 日本 欧美在线| 国产高潮美女av| 免费在线观看亚洲国产| 亚洲精品在线观看二区| 性欧美人与动物交配| 一a级毛片在线观看| 日本在线视频免费播放| 久久中文看片网| 午夜精品一区二区三区免费看| 欧美精品国产亚洲| 日日夜夜操网爽| a级毛片a级免费在线| 91在线观看av| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 在线观看免费视频日本深夜| 亚洲成av人片免费观看| 1000部很黄的大片| 成人av在线播放网站| 国产精品影院久久| 很黄的视频免费| 亚洲成人精品中文字幕电影| 免费黄网站久久成人精品 | 国产精品久久电影中文字幕| 91麻豆精品激情在线观看国产| 亚洲在线自拍视频| 18禁在线播放成人免费| 久久精品91蜜桃| 99久国产av精品| 久久久久久久午夜电影| 免费无遮挡裸体视频| 51国产日韩欧美| 亚洲,欧美精品.| 老司机深夜福利视频在线观看|