飼料中水溶性氯化物檢測方法的研究進展

張珍珍，楊衛(wèi)軍

（秦皇島市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗中心，河北 秦皇島 066000）

食鹽，化學(xué)名氯化鈉（NaCl），是動物體必需的營養(yǎng)物質(zhì)之一，并能改善日糧的適口性，促進食欲，提高飼料利用率。飼料中食鹽不足，會對畜禽的生長發(fā)育造成不良影響，食鹽過量則導(dǎo)致動物食鹽中毒。因此，分析檢測飼料中食鹽含量尤為重要。由于飼料成分分析中測定鈉含量較困難，而測定氯含量較容易，所以飼料中食鹽的測定是通過測定飼料中的水溶性氯化物含量而求得的。本文就目前飼料中水溶性氯化物的測定方法作一綜述。

1 沉淀滴定法

沉淀滴定法又稱硫氰酸鹽反滴定法，是將樣品中的氯離子(Cl-）溶解于水溶液中，如果樣品含有有機物質(zhì)，需用活性炭、亞鐵氰化鉀配合乙酸鋅將溶液澄清，然后用硝酸稍加酸化，并加入AgNO3標準溶液使氯化物生成AgCl沉淀，過量的AgNO3溶液用硫氰酸銨或硫氰酸鉀標準溶液滴定（GB/T 6439-2007）。該方法測定結(jié)果較準確，不需大型儀器，操作易于實現(xiàn)。但由于根據(jù)生成紅棕色沉淀來指示終點，飼料樣品液大多渾濁有色，準確判別終點有一定困難，易產(chǎn)生較大滴定誤差，而且實驗中所用到的硝酸銀標準滴定溶液標定時較繁瑣（GB/T601-2002；GB/T 9725-2007）， 大批量樣品檢測費時、費力。黎浩勁（2010）在飼料中水溶性氯化物測定方法的討論中對該方法的結(jié)果表述有異議，因此對公式進行討論并進行實驗，修改了結(jié)果公式的表述。原公式為：

該公式中分子的單位是mg，分母的單位是g，所以數(shù)值如果以%表示，則應(yīng)再除以1000。然而經(jīng)過同一樣品多次實驗和不同樣品的對比實驗，發(fā)現(xiàn)（VS1－VS0）是很小的數(shù)值，（Vt1－Vt0）是負值，按公式中表示較難理解，公式中分子部分應(yīng)表述為：M×[（VS1－VS0）×Cs+（Vt0－Vt1）×Ct]。

2 快速測定法

快速測定法又稱銀量法，是將飼料樣品用水溶解，攪拌靜置后移取一定量上清液，以鉻酸鉀為指示劑，用硝酸銀標準溶液滴定（GB/T 6439-92）。該方法操作簡便、節(jié)省試劑、成本低。但對于浸提液為棕色或深棕色的魚粉類樣品，由于棕色或深棕色對滴定終點的影響造成結(jié)果偏高。同時，由于鉻酸鉀指示劑在等當點的突變點不明顯，導(dǎo)致經(jīng)常滴定過量而影響測定結(jié)果的準確性。目前該標準已廢止。王文正和黎秀卿（1999）對此方法做了改進，即用活性炭對魚粉樣品浸提液脫色，消除或減小了棕色或深棕色對滴定終點的干擾，從而提高滴定的準確性。李有堅（1997）采用遠紅外輻射加熱灰化（炭化）處理樣品，減少其干擾物質(zhì)，使滴定終點易于判斷，該方法回收率為95%～101%。

3 氯離子選擇性電極法

氯離子選擇性電極法是將樣品用水溶解，攪拌靜置后過濾，取濾液加入硝酸溶液及硝酸鉀溶液，用水定容。以Cl-選擇性電極為指示電極，以雙鹽橋飽和甘汞電極為參比電極，在酸度計上讀取電極電位值，同時，配制不同濃度的Cl-標準溶液，制作標準曲線，從回歸方程求得Cl-濃度值（唐煜，2004；歐陽真等，2004）。該方法不需要溶液的標定、滴定等步驟，但外界環(huán)境變化對電極電位有一定的影響。鐘國清（2002a）認為將飼料樣品用pH為4的乙酸-乙酸鈉緩沖溶液處理，一方面可控制溶液的pH值，使電極在此pH范圍內(nèi)靈敏度高、穩(wěn)定性好；另一方面可調(diào)節(jié)溶液的離子強度。該方法的回收率為96.9%～103.5%。高海軍等（2010）認為飼料成分復(fù)雜，對Cl-測定產(chǎn)生干擾的物質(zhì)多，因此在檢測中首先用亞鐵氰化鉀配合乙酸鋅作為沉淀劑把大量的有機物沉淀并過濾，減少有機物的干擾；其次加入濃硝酸，利用濃硝酸的氧化性將對 Cl-電極產(chǎn)生干擾的 Br-、I-、S2-等離子進行氧化，再用強堿調(diào)節(jié)至所需的pH值，同時生成的NaNO3可以作為測定液的離子強度調(diào)節(jié)劑；最后用格氏作圖法進行結(jié)果計算。

4 電位滴定法

電位滴定法是根據(jù)滴定過程中電極電位的突躍代替指示劑來指示終點，只需求一次終點電位，即可對批量樣品實現(xiàn)自動滴定。但溶液的pH對終點影響很大，如果pH值不適宜，終點電位誤差就大；而且終點電位的確定如通過二級微商法確定步驟較繁瑣。李永波和陳敏芳（2000）建立了電位滴定法測定飼料中氯化物，即樣品用pH為5的乙酸-乙酸鈉緩沖溶液及丙酮處理，樣品中的Cl-以硝酸銀為滴定劑，以氯電極為指示電極，隨著滴定劑的加入，電極電位也隨著變化，以二級微商法記錄其突變點即為滴定終點。李家勝和陳忠明（1993）認為滴定過程中生成的難沉淀物會吸附溶液中過量的陰、陽離子，導(dǎo)致電位突躍的傾斜及電位值不穩(wěn)定，從而影響測量精度。這種現(xiàn)象可將試液用硝酸酸化及加入適量硝酸鉀來消除。陳如登等（2006）建立了自動電位滴定儀法測定飼料中可溶性氯化物，以復(fù)合銀電極指示，用硝酸銀標準滴定液進行自動滴定。該方法回收率為（97.6±0.6）%。

5 比色法

胡冬生（1996）研究發(fā)現(xiàn)，硫氰酸汞不易溶于水，溶解后的物質(zhì)很難電離，所以即使加入Fe3+也幾乎不顯色。 這時如果有 Cl-存在，Cl-與 Hg（SCN）2反應(yīng)生成HgCl2和 SCN-，當加入 Fe3+時，即與SCN-反應(yīng)，呈現(xiàn)紅色。由于呈現(xiàn)的紅色深度隨Cl-濃度的增加而增加，故對其顏色進行比色，即可定量測出飼料中Cl-的含量。該方法通過扣除樣品空白，消除由于提取溶液顏色深帶來的干擾。但是，I-、Br-、CN-、S2-、S2O32-以及能與 Cl-發(fā)生激烈反應(yīng)的陽離子對實驗有干擾。石來鳳和阿曼古麗·牙森（2000）建立了比色法測定飼料中氯化物，即在不同濃度的氯化鈉標準溶液及樣品液中分別加入硝酸溶液、硝酸銀溶液，充分搖勻后置光線明亮處將樣品與標準氯化鈉溶液的濁度作對比，即可得出樣品中氯化物的含量，但該方法準確度不高。

6 紫外分光光度法

紫外分光光度法是根據(jù)物質(zhì)分子對波長在200～760 nm的電磁波的吸收特性所建立的一種定性、定量和結(jié)構(gòu)分析方法 （王海軍和寧新霞，2012）。本法是在樣品中加入硫酸鐵和氨水，過濾，濾液用稀硝酸中和后用水定容。取試液和標準系列工作液，加入顯色劑（0.3%硫氰酸汞甲醇溶液∶5%硝酸鐵=1∶1）混勻放置20 min，于460 nm波長處測吸光度，繪制標準曲線，或用回歸方程求得樣品中Cl-的含量 （馬丹和涂世英，2002）。鐘國清（2002b）認為氯化銀沉淀不穩(wěn)定，直接應(yīng)用分光光度法測定結(jié)果不理想。通過研究氯化銀沉淀在明膠-乙醇水溶液中的穩(wěn)定性，建立了一種測定微量氯離子的分光光度法，即樣品用硫酸鐵溶液及氨水溶液溶解后加入明膠-乙醇水溶液，混勻后再加入硝酸銀溶液，于300 nm處測定其吸光度，其方法回收率為98%～103%。此類方法簡便、快速、選擇性好，但要考慮前處理所用試劑的量對溶液吸光度穩(wěn)定性的影響。

7 微型滴定法

李瓊芳和莫海洪（2004）認為采用微型滴定法代替常規(guī)滴定法測定飼料中水溶性氯化物，由于微型滴定管滴頭細小，消耗試劑量少，滴定誤差小，準確度高，符合飼料分析的要求，消耗試劑量僅為常量滴定的1/10～1/8，經(jīng)濟效益顯著。朱兵和吳倩（1997）將樣品用水溶解，以鉻酸鉀作指示劑，用硝酸銀標準溶液按照微型滴定裝置進行滴定。結(jié)果表明，與常規(guī)滴定法的測量值絕對誤差最大為0.04%，在飼料分析允許誤差范圍以內(nèi)，其回收率均在95%以上。

8 離子色譜法

離子色譜法（IC）是美國 Small等（1975）于 20世紀70年代發(fā)明的一項新的液相色譜技術(shù)，具有靈敏度高、選擇性好、前處理簡單、試樣用量少、檢測限低，減少或免除樣品的提純，可同時測定多組分和分析不同化合價態(tài)，易實現(xiàn)自動化等優(yōu)點，彌補了經(jīng)典化學(xué)方法和其他儀器分析手段的不足（Licata等，2013）。目前已成為分析化學(xué)領(lǐng)域中發(fā)展最快的分析方法之一，并被廣泛地用于無機陰、陽離子和有機離子的測定。陳桂鸞等（2009）將飼料樣品中的Cl-溶解于水溶液中，微孔濾膜過濾，采用陰離子交換分離柱，以25 mmol/L KOH淋洗液分離Cl-，用電導(dǎo)檢測器進行檢測，將飼料樣品的色譜峰與標準溶液中Cl-的色譜圖相比較，根據(jù)保留時間定性，峰面積定量。方法回收率為92.6%～103.0%，檢出限為 0.05 μg/mL，線性相關(guān)系數(shù) r=0.9996，與國標法測定結(jié)果比較無顯著性差異。該方法簡便快捷、準確度高、重現(xiàn)性好、適宜大批量樣品檢測。

9 小結(jié)

綜上所述，飼料中水溶性氯化物的檢測方法較多，實際工作中可以根據(jù)實驗室條件選擇不同的檢測方法。隨著檢測技術(shù)水平的快速發(fā)展，離子色譜法因其具有樣品前處理簡單，所用試劑少，測定準確度和精密度高，檢測限低，自動化程度高，適用于批量樣品檢測等優(yōu)點，且在節(jié)省人力、提高工作效率等方面也占有一定優(yōu)勢。

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