妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥患者胎盤滋養(yǎng)細胞中TNF-α mRNA的表達及其與膽汁酸水平變化的關系

黃娟

妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥患者胎盤滋養(yǎng)細胞中TNF-α mRNA的表達及其與膽汁酸水平變化的關系

黃娟

目的 探討腫瘤壞死因子α(TNF-α)在妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥(ICP)發(fā)病機制中的作用。方法 66例剖宮產(chǎn)術分娩的妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥產(chǎn)婦作為A組, 隨機抽取同期行單純剖宮產(chǎn)術的70例健康產(chǎn)婦作為B組。對A、B兩組臨床資料進行對比分析。結果 A組與B組相比, 新鮮的胎盤組織滋養(yǎng)細胞中TNF-α mRNA的表達水平分別為(2.24±0.27)和(1.10±0.09)；兩組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)；培養(yǎng)并處理后胎盤組織滋養(yǎng)細胞中TNF-α mRNA的表達水平分別為(3.97±0.35)和(1.07±0.12)；兩組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。結論 TNF-α與妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥發(fā)生關系密切, 應引起臨床治療的注意。

腫瘤壞死因子α；妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥；TNF-α mRNA

妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥(ICP)是妊娠期比較常見的一種并發(fā)癥, 主要表現(xiàn)為血清膽汁酸水平升高和肝臟酶學指標異常。妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥嚴重危害胎兒, 早產(chǎn)、胎兒窘迫、胎死宮內(nèi)的發(fā)生率很高。胎盤是胎兒和母體直接接觸的界面,胎盤滋養(yǎng)細胞的變化是直接影響胎兒的。目前, 膽汁酸直接形成的危害是研究的重點, 為防治胎兒不良反應的發(fā)生, 揭示妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥的發(fā)病機制, 具有重要的臨床意義。本研究通過檢測妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥患者胎盤滋養(yǎng)細胞中腫瘤壞死因子α(TNF-α)的表達水平來探討TNF-α在妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥發(fā)病機制中的作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2011年7月～2013年7月收治的剖宮產(chǎn)術分娩產(chǎn)婦136例, 孕周為37～40周。66例妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥產(chǎn)婦作為A組, 妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥(ICP)診斷標準如下：①妊娠期出現(xiàn)無法解釋的皮膚瘙癢, 排除皮膚疾??；②血清膽紅素約在1.1～5.0 mg/dl, 血清SGPT或SGOT約60～100 U, 更高者少見；③排除肝臟疾病、膽道疾病、需用抗生素的感染。隨機抽取同期行單純剖宮產(chǎn)術的70例健康產(chǎn)婦為B組, 比較兩組間術中出血量、術后24 h血紅蛋白下降、術后排氣時間、產(chǎn)后病率、手術時間以及手術后住院時間的情況。兩組患者年齡、孕周、產(chǎn)次差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05), 具有可比性。

1.2 方法 在胎盤娩出后無菌條件下進行取材, 置于DMEM培養(yǎng)液中送細胞培養(yǎng)室, 并制備新鮮的胎盤組織冰凍切片。先應用實時熒光定量PCR技術檢測A、B兩組新鮮的胎盤組織滋養(yǎng)細胞中TNF-α mRNA的表達水平；再對滋養(yǎng)細胞體外培養(yǎng)72 h后, A組滋養(yǎng)細胞加入膽酸混合物, B組滋養(yǎng)細胞加入等體積的乙醇, 6 h后應用實時熒光定量PCR技術檢測兩組滋養(yǎng)細胞中TNF-α mRNA的表達水平。

1.3 統(tǒng)計學方法 本研究所得數(shù)據(jù)通過SPSS13.0統(tǒng)計學軟件進行分析。計量資料以均數(shù)±標準差( x-±s)表示, 采用t檢驗；計數(shù)資料采用χ2檢驗。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 A組與B組新鮮的胎盤組織滋養(yǎng)細胞中TNF-α mRNA的表達水平分別為(2.24±0.27)和(1.10±0.09)；兩組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。

2.2 A組與B組培養(yǎng)并處理后胎盤組織滋養(yǎng)細胞中TNF-α mRNA的表達水平分別為(3.97±0.35)和(1.07±0.12)；兩組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。

3 討論

妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥可導致早產(chǎn)、胎兒宮內(nèi)窘迫增加圍生兒死亡率, 發(fā)病機制及臨床過程復雜, 母嬰死亡率較高。本文對妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥發(fā)病機制進行探討。妊娠時胎盤作為內(nèi)分泌器官產(chǎn)生大量重要的細胞因子, 這些細胞因子進入母體及胎兒血液循環(huán), 對代謝、免疫、血管等系統(tǒng)發(fā)揮多種作用。在整個妊娠期, 這些細胞因子進行著復雜的平衡調(diào)節(jié), 維持了正常妊娠的過程。近年來研究表明, 細胞因子作為參與免疫反應的重要介質(zhì), 在妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥的發(fā)生、發(fā)展過程中起重要的作用［1］。TNF-α主要是由單核-巨噬細胞分泌, 其他類型的細胞, 如淋巴細胞、平滑肌細胞、成纖維細胞等在一定條件下也具有產(chǎn)生和釋放TNF-α的能力, 妊娠期TNF-α主要由胎盤和脂肪組織合成和分泌。TNF-α是一種由單核巨噬細胞產(chǎn)生的細胞因子,在妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥的發(fā)生、發(fā)展過程中起重要的作用,參與了滋養(yǎng)細胞的凋亡過程。TNF-α的主要生化作用有：直接殺傷細胞, 損壞肝細胞；刺激氧自由基產(chǎn)生, 導致肝細胞過氧化損傷；促進胎盤合成、分泌雌激素［2］。其主要通過受體發(fā)揮作用,參與多種生理與免疫過程。腫瘤壞死因子1受體(TNFR1)介導了TNF-α的主要生物學效應, TNFR1含死亡結構域, 可觸發(fā)信號傳導級聯(lián)反應而導致細胞凋亡或通過激活核轉(zhuǎn)錄因子——核因子кB(NFкB)促使細胞增殖、分化［3］。子宮內(nèi)膜和胎盤組織中存在大量的巨噬細胞, 適量的TNF-α參與胎兒與胎盤組織的生長、分化調(diào)節(jié), 刺激滋養(yǎng)細胞合成和分泌孕酮及HCG, 防止母體對胎兒的排斥反應。有研究提示, TNF-α可以提高超氧離子水平及超氧離子激活NO的能力, 使血管內(nèi)皮功能失調(diào), 使胎盤滋養(yǎng)細胞發(fā)生凋亡。

本研究顯示妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥組滋養(yǎng)細胞中TNF-α mRNA的表達水平明顯高于健康產(chǎn)婦組, 在高濃度膽酸的作用下, TNF-α水平明顯升高, 導致胎盤滋養(yǎng)細胞凋亡的增加, 引起的胎盤功能障礙, 盡而出現(xiàn)胎兒發(fā)育遲緩、胎兒窘迫、早產(chǎn)、死胎等不良現(xiàn)象。結論與杜巧玲等［4］一致,高膽汁酸環(huán)境導致胎盤組織TNF-α水平增高, 導致滋養(yǎng)細胞凋亡增加, 引起不良妊娠結局。說明TNF-α與妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥關系相當密切, 抑制TNF-α的分泌或許會減輕對產(chǎn)婦和胎兒的危害, 對妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥治療達到新的切入點。

［1］ 黎智彪.肝功能檢測與妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥的臨床研究.當代醫(yī)學, 2013(18):43-44

［2］ 曹麗瓊,曲廣第,王冬梅.妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥IL-10、TNF-α表達變化及其與肝功能變化的關系.免疫學雜志, 2012(5):424-426.

［3］ 李晶媛,李樹臣,楊維良.TNF-α誘導肝細胞凋亡機制的回顧與展望.世界華人消化雜志, 2007(6):606-611.

［4］ 杜巧玲,段濤.妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥患者胎盤滋養(yǎng)細胞中TNF-α mRNA的表達及其與膽汁酸水平變化的關系.中華婦產(chǎn)科學雜志, 2013, 9(48):687-688.

2014-08-21］

467000 平頂山市第一人民醫(yī)院婦產(chǎn)科