王 輝,劉長路,杜惠蓉
(四川文理學(xué)院 “特色植物開發(fā)研究”四川省高校重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,四川 達(dá)州635000)
淫羊藿為常用中藥,具有補(bǔ)腎陽、強(qiáng)筋骨、祛風(fēng)濕之功效.[1]淫羊藿苷為其主要有效成分之一.為更好地發(fā)揮其藥用功效,我們采用微波輔助乙醇回流提取的方法、通過正交實(shí)驗(yàn)[2-3]對比選擇微波法提取淫羊藿中淫羊藿苷的最佳工藝條件.
UV2550紫外分光光度計(日本島津),MASII微波萃取反應(yīng)儀(上海新儀).
淫羊藿藥材(采購于達(dá)州市藥店,產(chǎn)地四川),淫羊藿苷標(biāo)準(zhǔn)品(阿拉丁試劑),其余試劑均為分析純.
1.3.1 淫羊藿苷標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:精密稱取淫羊藿苷標(biāo)準(zhǔn)品10.8mg置于100mL容量瓶中,甲醇溶解并稀釋至刻度;分別從中取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL置于25mL容量瓶中,甲醇定容至刻度.用UV2550紫外分光光度計在270nm處,以甲醇為空白分別測其吸光度值,以淫羊藿苷濃度C對吸光度A進(jìn)行線性回歸(見圖1).回歸方程為:C=27.706A +0.4203(r=0.9999)
圖1 淫羊藿苷標(biāo)準(zhǔn)曲線
1.3.2 微波輔助乙醇提取工藝考察
(1) 正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計
淫羊藿經(jīng)中藥粉碎機(jī)粉碎后準(zhǔn)確稱取5.0g分別按照正交實(shí)驗(yàn)L9(34)因素條件(表1)進(jìn)行提取,提取后進(jìn)行抽濾除去濾渣后濾液定容于100mL容量瓶中,然后取0.2mL定容于25mL容量瓶中后在270nm處測其吸光度.
(2)正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果
按照表1中正交實(shí)驗(yàn)的因子與水平,設(shè)計并進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn),所得實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表2所示.
表1 正交實(shí)驗(yàn)的因素與水平
表2 正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果
從表2分析可見,四個正交實(shí)驗(yàn)因素對淫羊藿苷的提取影響可以看出其中R-A為最大值,說明提取劑濃度為淫羊藿總黃酮提取的關(guān)鍵因素;R-B為最小值,說明微波功率對淫羊藿總黃酮影響最小.綜合以上各因素的影響,對淫羊藿苷的提取影響大小的順序?yàn)锳>C>D>B.并可以確定微波法提取淫羊藿總黃酮最佳工藝為70% 乙醇、400W微波功率、40min回流時間以及1:40的料液比.
我們根據(jù)文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)乙醇提取淫羊藿苷的效果較佳,[4]微波又具有加熱快提取效率高等優(yōu)點(diǎn)吸引著研究人員的興趣.[5-6]所以我們選擇微波輔助乙醇水溶液進(jìn)行提取的工藝研究.從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出,乙醇的濃度對提取效果影響顯著,并且提取時間、料液比、微波功率各因素都對淫羊藿苷的提取有著明顯的影響.根據(jù)正交實(shí)驗(yàn)影響因素的驗(yàn)證,我們最終確定了微波輔助法提取淫羊藿中淫羊藿苷的最佳工藝是70%的乙醇,微波功率400W,在1:40的料液比下回流40分鐘.
[1]王 靜,李建平,張躍文,等.淫羊藿藥理學(xué)研究進(jìn)展[J].中國藥業(yè),2009(8):60.
[2]張春華,嚴(yán)云良.醫(yī)藥數(shù)理統(tǒng)計[M].北京:科學(xué)技術(shù)出版社,2001:270.
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