唐 偉,李多孚,彭洪霞(.川北醫(yī)學(xué)院第二臨床醫(yī)學(xué)院/南充市中心醫(yī)院,四川南充 637000;.川北醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)系008級(jí),四川南充 637000)
C反應(yīng)蛋白(CRP)是肝臟分泌的一種重要的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白,其臨床應(yīng)用廣泛[1]。檢測(cè)CRP的方法主要有免疫比濁法、熒光免疫法等,檢測(cè)儀器有特種蛋白分析儀、生化分析儀以及床旁檢測(cè)(POCT)儀。POCT作為一種快速檢驗(yàn)手段,越來(lái)越受到臨床科室的青睞。但POCT測(cè)定CRP要使用全血標(biāo)本,而不同紅細(xì)胞壓積(HCT)量可能會(huì)干擾CRP的檢測(cè)。對(duì)此,作者將速率散射比濁法檢測(cè)血清CRP作為比較方法(IMMAGE 800),免疫比濁法檢測(cè)全血CRP作為試驗(yàn)方法進(jìn)行POCT,來(lái)評(píng)價(jià)兩種方法檢測(cè)CRP的一致性,以期為臨床使用POCT設(shè)備者提供參考。
1.1 一般資料選取低HCT(<0.35)標(biāo)本40例,其中男18例,女22例;正常HCT(0.37~0.50)標(biāo)本40例,其中男19例,女21例;高HCT(>0.5)標(biāo)本25例,其中男13例,女12例。分別用乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝管和無(wú)抗凝劑的真空管采集血液,抗凝管采血2mL,充分混勻,待用。真空管采血3mL,待血清分離后,4 000r/min離心5min,待用。采血后2h內(nèi)完成全部檢測(cè)。
1.2 儀器與試劑
1.2.1 NEPHSTAR PLUS三通道特定蛋白分析儀及其配套試劑(免疫比濁法),深圳市國(guó)賽生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品。
1.2.2 IMMAGE 800特定蛋白分析儀及其配套試劑(速率散射比濁法),美國(guó)Beckman-coulter公司產(chǎn)品。
1.2.3 SYSMEX XE-2100全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀及配套試劑。
1.3 方法
1.3.1 室內(nèi)質(zhì)控在控條件下,XE-2100全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀檢測(cè)全血標(biāo)本HCT。
1.3.2 分別按照各儀器操作規(guī)程測(cè)定各組標(biāo)本的全血CRP和血清CRP,記錄結(jié)果。NEPHSTAR PLUS儀器試劑設(shè)定的HCT值是0.40,對(duì)低HCT組標(biāo)本和高HCT組標(biāo)本,測(cè)定結(jié)果按照儀器給定公式:校正結(jié)果=0.6÷(1-HCT)×全血CRP,進(jìn)行結(jié)果換算。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS19.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,數(shù)據(jù)以±s(95%可信區(qū)間)表示,檢測(cè)結(jié)果比較采用配對(duì)資料t檢驗(yàn),相關(guān)性分析采用直線相關(guān)分析。以α=0.05為檢驗(yàn)水平,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.1 正常HCT標(biāo)本,全血CRP和血清CRP結(jié)果差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=1.34,P>0.05),見(jiàn)表1。二者相關(guān)性良好,相關(guān)系數(shù)r=0.992,Y=0.996 X+0.063。見(jiàn)圖1。
圖1 正常HCT標(biāo)本CRP的相關(guān)性
2.2 低HCT標(biāo)本和高HCT標(biāo)本,全血CRP與血清CRP測(cè)定結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(低HCT組t=3.25,P<0.05;高HCT組t=3.56,P<0.05),見(jiàn)表1。
表1 不同HCT測(cè)定全血CRP與血清CRP結(jié)果(±s,mg/L)
表1 不同HCT測(cè)定全血CRP與血清CRP結(jié)果(±s,mg/L)
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2.3 結(jié)果經(jīng)過(guò)校正后,全血CRP測(cè)定結(jié)果與血清CRP測(cè)定結(jié)果差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(低HCT組t=1.53,P>0.05;高HCT組t=1.78,P>0.05),見(jiàn)表2。
表2 校正后全血CRP與血清CRP結(jié)果(±s,mg/L)
表2 校正后全血CRP與血清CRP結(jié)果(±s,mg/L)
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POCT儀器測(cè)定CRP,具有標(biāo)本用量少,檢測(cè)過(guò)程簡(jiǎn)便、快速等優(yōu)點(diǎn),能滿(mǎn)足臨床及時(shí)判斷患者病情的需要。本研究結(jié)果顯示,在HCT正常的情況下,NEPHSTAR PLUS測(cè)定的結(jié)果與IMMAGE 800所得結(jié)果有良好的相關(guān)性(r=0.992,P>0.05)。而在低HCT或高HCT的情況下,NEPHSTAR PLUS測(cè)定結(jié)果有明顯的偏差,與相關(guān)文獻(xiàn)所得結(jié)果基本一致[2-3]。但對(duì)所得值進(jìn)行換算后,其結(jié)果與IMMAGE 800所得結(jié)果一致,說(shuō)明校正公式的應(yīng)用對(duì)于低或高HCT標(biāo)本是必需的。這主要是由于CRP存在于循環(huán)血漿中,IMMAGE 800檢測(cè)的是單位體積血清中的CRP量,POCT檢測(cè)的是單位體積血液中的CRP量,二者明顯有差異,不同的HCT直接導(dǎo)致單位體積內(nèi)血漿比例不同;此外,在檢測(cè)過(guò)程中,非正常濃度的紅細(xì)胞會(huì)干擾比濁結(jié)果。POCT已設(shè)計(jì)了正常HCT條件下測(cè)定全血CRP的試驗(yàn)參數(shù),并將其換算成單位體積血清中的作為報(bào)告方式。當(dāng)患者血液的HCT與儀器的HCT設(shè)定值相近時(shí),測(cè)得的CRP值就與其血清中的水平相近,否則就會(huì)出現(xiàn)偏差[3]。
臨床上,大量體液、血液丟失,真性紅細(xì)胞增多癥、新生兒等均可引起HCT增高,各種原因引起的貧血可導(dǎo)致HCT降低,不同年齡也可引起HCT差異。不同海拔地區(qū)HCT也會(huì)出現(xiàn)超出正常范圍的情況[4]。以上因素均可影響全血CRP測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性,使用POCT設(shè)備有一定的局限性[5]。因此,在應(yīng)用POCT檢測(cè)CRP時(shí),應(yīng)重視標(biāo)本的HCT值,才能保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
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[2]隆維東,李堅(jiān),劉萬(wàn)彬.不同紅細(xì)胞HCT對(duì)全血CRP測(cè)定的影響及校正措施[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2012,33(1):107-109.
[3]甄萍,姚新潔,喬艷梅.全血C-反應(yīng)蛋白快速檢測(cè)的應(yīng)用[J].臨床血液學(xué)雜志,2011,24(10):585.
[4]宋曉萍,傅新文.血液分析儀對(duì)不同年齡組紅細(xì)胞HCT參考值分析[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2008,26(2):207.
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