李 霞,伍亞云,郭建華,劉俊宏(.湖北省十堰市竹山縣婦幼保健院檢驗科 4400;.湖北省十堰市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院檢驗科 44000;.湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬太和醫(yī)院檢驗部,湖北十堰 44000)
正常情況下,漿膜腔內(nèi)僅有少量液體起潤滑作用,病理情況下可有大量液體潴留而形成漿膜腔積液,常分為漏出液和滲出液[1]。漿膜腔積液常規(guī)檢查的目的是鑒別漿膜腔積液的性質(zhì),為臨床診斷治療提供依據(jù)。漿膜腔積液常規(guī)分析的質(zhì)量控制,在分析中、分析后的檢驗質(zhì)量控制中,實驗室已有了較明確的質(zhì)量控制措施,并有嚴(yán)格的規(guī)章制度、操作規(guī)程、室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評[2]。而分析前質(zhì)量控制卻是一個容易被忽視但又非常重要的環(huán)節(jié)。作者對28份漿膜腔積液分析前的不同環(huán)節(jié),包括標(biāo)本放置時間、標(biāo)本檢查前混勻程度、計數(shù)池充池后放置時間進(jìn)行對比分析,以找出漿膜腔積液常規(guī)檢查前的影響因素,消除不必要的誤差,提高檢驗質(zhì)量,現(xiàn)報道如下。
1.1 一般材料隨機(jī)抽取竹山縣婦幼保健院門診和住院就醫(yī)患者漿膜腔積液28份。其中男18例,女10例,年齡21~87歲,平均60歲。
1.2檢驗器材求精XB-K-25計數(shù)板(上海醫(yī)用光學(xué)儀器廠一分廠生產(chǎn)),CX31RTSF-OLYMPUS顯微鏡,日本B80型自動平衡離心機(jī)(河北安新白洋離心機(jī)廠生產(chǎn))。
1.3 檢測方法
1.3.1 漿膜腔積液分別放置1、3、5、10h后常規(guī)分析 分別記錄其紅細(xì)胞數(shù)量、有核細(xì)胞數(shù)量取均值。通過對比分析,觀察其結(jié)果與放置時間的關(guān)系。
1.3.2 漿膜腔積液標(biāo)本混勻后常規(guī)分析、不混勻常規(guī)分析分別記錄紅細(xì)胞數(shù)量、有核細(xì)胞數(shù)量取均值,通過對比分析,觀察其前后結(jié)果的差異。
1.3.3 計數(shù)池充池后漿膜腔積液放置0、1、3、5min細(xì)胞計數(shù)檢查 分別記錄紅細(xì)胞數(shù)量、有核細(xì)胞數(shù)量。通過對比分析,觀察其不同放置時間下計數(shù)結(jié)果的差異。
1.4 統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS17.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析,檢測結(jié)果比較采用t檢驗及方差檢驗,以α=0.05為檢驗水準(zhǔn),P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
2.1 漿膜腔積液放置不同時間后常規(guī)分析結(jié)果比較漿膜腔積液取出后,標(biāo)本中紅細(xì)胞數(shù)量隨放置時間的延長而降低。3h與1h比較,紅細(xì)胞數(shù)減少,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);1h與5h及10h比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。標(biāo)本中有核細(xì)胞數(shù)量隨放置時間的延長無明顯改變,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。
表1 不同放置時間紅細(xì)胞、有核細(xì)胞結(jié)果比較(109/L,x±s)
2.2 漿膜腔積液標(biāo)本混勻與不混勻常規(guī)分析結(jié)果比較漿膜腔積液取出后,標(biāo)本混勻與不混勻常規(guī)分析,其紅細(xì)胞數(shù)量和有核細(xì)胞數(shù)量差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表2。
表2 漿膜腔積液標(biāo)本混勻與不混勻分析結(jié)果比較(109/L,±s)
表2 漿膜腔積液標(biāo)本混勻與不混勻分析結(jié)果比較(109/L,±s)
注:與不混勻組比較,aP<0.05。
?
2.3 計數(shù)池充池后不同放置時間計數(shù)分析漿膜腔積液取出后計數(shù)細(xì)胞時,計數(shù)池充池后放置0、1、3、5min,其紅細(xì)胞數(shù)0min與3min及5min分別比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);但0min與1min、3min與5min比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。有核細(xì)胞計數(shù),0min與3min、5min分別比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);0min與1min、3min與5min比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表3。
表3 計數(shù)池充池后不同放置時間紅細(xì)胞、有核細(xì)胞計數(shù)結(jié)果比較(109/L,±s)
表3 計數(shù)池充池后不同放置時間紅細(xì)胞、有核細(xì)胞計數(shù)結(jié)果比較(109/L,±s)
注:與3、5min比較,aP<0.05。
?
臨床實驗室全面質(zhì)量控制分為分析前、中、后3個主要過程。分析前質(zhì)量控制是指從醫(yī)生選擇檢測項目,提出檢測申請單,直至將檢測標(biāo)本送至實驗室階段的質(zhì)量控制[3-4]。而分析前質(zhì)量控制卻是一個容易被忽視卻非常重要的環(huán)節(jié),實驗室工作人員在對每份標(biāo)本的分析前預(yù)處理過程,更顯得尤其重要。分析的每一步前期準(zhǔn)備是否合格,都會對檢驗結(jié)果產(chǎn)生非常大的影響。有研究表明,臨床實驗室的誤差大部分發(fā)生于標(biāo)本的分析前階段,分析前階段的誤差比例占總誤差的半數(shù)以上[5-7]。因此,如何做好分析前質(zhì)量控制已成為當(dāng)務(wù)之急。
漿膜腔積液通常指胸膜腔(胸腔)、腹膜腔(腹腔)、心包腔積液等。其常規(guī)分析有助于鑒別滲出液與漏出液,為臨床診斷和治療提供依據(jù)。本文對28份漿膜腔積液常規(guī)分析前的不同環(huán)節(jié),包括標(biāo)本放置時間、標(biāo)本檢查前混勻程度、計數(shù)池充池后放置時間進(jìn)行對比分析,以找出漿膜腔積液常規(guī)檢查前的影響因素。漿膜腔積液由臨床醫(yī)生抽取后,如果不能及時送檢或送檢后實驗室沒有及時處理,經(jīng)常會放置較長時間。在這段時間內(nèi),積液內(nèi)細(xì)胞形態(tài)及數(shù)量會發(fā)生改變,如紅細(xì)胞溶解、間皮細(xì)胞腫脹變性等,對常規(guī)分析結(jié)果產(chǎn)生影響。本組分析結(jié)果顯示,漿膜腔積液取出后,標(biāo)本中紅細(xì)胞數(shù)量隨放置時間的延長而降低。1h與3h比較,紅細(xì)胞數(shù)減少,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);1h與5h及10h比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);標(biāo)本中有核細(xì)胞數(shù)量隨放置時間的延長無明顯改變,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。表明漿膜腔積液內(nèi)紅細(xì)胞,隨著放置時間的延長而破壞增加。其原因是積液離體后,隨著放置時間的延長,標(biāo)本內(nèi)中微生物(如細(xì)菌等)可分解積液中的糖類,導(dǎo)致積液滲透壓發(fā)生改變,可使?jié)B透壓降低明顯,使紅細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變或破壞,導(dǎo)致紅細(xì)胞數(shù)量減少。而有核細(xì)胞在此環(huán)境影響下,其細(xì)胞形態(tài)可有明顯改變,如間皮細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)空泡變性;或隨著滲透壓的改變,細(xì)胞內(nèi)外水和離子的交換,導(dǎo)致有核細(xì)胞出現(xiàn)胞質(zhì)和核腫脹變性,或核溶解現(xiàn)象,導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)上出現(xiàn)明顯改變,常常在細(xì)胞學(xué)檢查中出現(xiàn)誤認(rèn),而出現(xiàn)假陽性結(jié)果,在此提示漿膜腔積液細(xì)胞學(xué)檢查過程中應(yīng)必須注意。標(biāo)本中有核細(xì)胞形態(tài)雖有不同程度的改變,但有核細(xì)胞破壞不明顯,其細(xì)胞數(shù)量隨放置時間的延長無明顯改變,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
臨床醫(yī)生抽吸漿膜腔積液后,由護(hù)士或護(hù)工將標(biāo)本送到實驗室進(jìn)行檢查,但由于工作忙碌或與實驗室之間的距離較遠(yuǎn),或至實驗室后沒有及時進(jìn)行檢查,標(biāo)本有一定時間的放置,其中的有核細(xì)胞、紅細(xì)胞會自然沉降。所以在進(jìn)行漿膜腔積液常規(guī)分析時,必須將標(biāo)本充分混合后再進(jìn)行常規(guī)分析,如直接取上清液進(jìn)行常規(guī)分析,其細(xì)胞數(shù)量會明顯減少。本研究結(jié)果顯示,漿膜腔積液取出后,標(biāo)本混勻與不混勻常規(guī)分析,其紅細(xì)胞數(shù)量及有核細(xì)胞數(shù)量差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。因此,檢驗工作者的必須加強(qiáng)責(zé)任心,不能粗枝大葉,隨心所欲。同時,在漿膜腔積液常規(guī)計數(shù)分析前,計數(shù)池充池后必須放置一段時間,再進(jìn)行計數(shù),否則會有較多細(xì)胞浮于計數(shù)池表面而使計數(shù)結(jié)果降低。作者對計數(shù)池充池后放置0、1、3、5min,其紅細(xì)胞數(shù)0min與3min及5min分別比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);但0min與1min、3min與5min比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);有核細(xì)胞計數(shù),0min與3min及5min分別比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);0min與1min、3 min與5min比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。表明計數(shù)細(xì)胞過程時,必須在沖池后放置一定時間,否則會因為細(xì)胞懸浮于液面上,導(dǎo)致所計數(shù)細(xì)胞相互重疊或細(xì)胞未在一個平面上停留,導(dǎo)致少計數(shù),而使細(xì)胞計數(shù)結(jié)果降低。顯微鏡的使用不當(dāng),也可使計數(shù)細(xì)胞減少,如聚光器未下降或光柵未關(guān)、光線太亮等都可使細(xì)胞計數(shù)出現(xiàn)明顯誤差。
漿膜腔積液常規(guī)檢查,是一個非常普通的常檢查項目,但在正常檢測過程中的許多細(xì)節(jié),并非都能做到,之前有借用血細(xì)胞分析儀替代手工操作的先例,但由于漿膜腔積液中纖維蛋白較高、易凝固,常常引起血細(xì)胞分析儀管道堵塞,影響儀器的正常工作而被禁止。檢驗工作的質(zhì)量控制是一個非常重要的內(nèi)容,是每位檢驗工作者必須注意的工作環(huán)節(jié),細(xì)節(jié)決定成敗,醫(yī)學(xué)檢驗的細(xì)節(jié)可影響檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。本文闡述的漿膜腔積液常規(guī)分析,雖然是一個比較簡單的常規(guī)檢驗項目,但在其分析過程中,每個醫(yī)學(xué)檢驗工作者在分析前是否都能嚴(yán)格操作,尚難確定。因此,漿膜腔積液常規(guī)分析前的質(zhì)量控制,對提高檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性非常重要。
[1]熊立凡,劉成玉.臨床檢驗基礎(chǔ)[M].3版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2003:225-231.
[2]高文香,鄒愛民,李秋生,等.臨床實驗室分析前質(zhì)量控制的對策探討[J].內(nèi)蒙古中醫(yī)藥,2011,30(15):172-173.
[3]王清濤.臨床生物化學(xué)檢驗分析前及分析后階段的質(zhì)量保證[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2007,30(2):238-240.
[4]段洪云,段玲.檢驗標(biāo)本采集與分析前的質(zhì)量控制[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2009,30(4):366.
[5]Plebani M.Errors in clinical laboratories or errors in laboratory medicine[J].Clin Chem Lab Med,2006,44(6):750-759.
[6]叢玉隆,鄧新立.實驗室ISO15189認(rèn)可對學(xué)科建設(shè)的幾點啟示[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2007,30(2):128-131.
[7]李華信.檢驗科樣本分析前質(zhì)量控制探討[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2011,32(1):133-134.