王正軍,呂 明,沈 艷,李 羿△
1.湖北醫(yī)藥學院附屬太和醫(yī)院 藥學部(十堰 442000);2.成都醫(yī)學院 藥學院(成都 610083)
莪術(shù)首載于《藥性論》,為姜科植物蓬莪術(shù)CurcumaphaeocaulisVal.、廣 西 莪 術(shù)Curcuma kwangsiensisS.G.Lee et C.F.Liang或溫郁金CurcumawenyujinY.H.Chen et C.Ling的干燥根莖,分別習稱蓬莪術(shù)、廣西莪術(shù)和溫莪術(shù)。莪術(shù)主要含有揮發(fā)油和姜黃素類化合物兩大類化學成分,臨床用于治療癥瘕痞塊、瘀血經(jīng)閉、胸痹心痛和食積脹痛[1]。
蓬莪術(shù)、廣西莪術(shù)和溫莪術(shù)的道地產(chǎn)區(qū)分別為四川、廣西和浙江[2]。由于基原和產(chǎn)地不同,三種莪術(shù)所含化學成分和含量存在差異,不同差異對其臨床療效將產(chǎn)生較大影響。因此,本文結(jié)合性狀鑒定和理化鑒定的優(yōu)勢,以期建立一種快速簡便的綜合鑒定方法用于多基原莪術(shù)的生藥鑒定,確保莪術(shù)臨床用藥的安全有效。
藥材為產(chǎn)地采集或購買,經(jīng)成都醫(yī)學院生藥學教研室李羿教授鑒定為莪術(shù)。
Panasonic數(shù)碼相機、15cm 直尺、刀片、AS5150型超聲儀、電熱鼓風干燥箱、展開槽、0.3mm點樣玻璃管。
薄層層析硅膠G(青島海洋化工有限公司)、羧甲基纖維素鈉(青島海洋化工有限公司)、石油醚(天津市富宇精細化工有限公司)、丙酮(成都市科龍化工試劑廠)、乙酸乙酯(天津市富宇精細化工有限公司)、98%硫酸(成都市方舟化學試劑廠)、香草醛(天津市科密歐化學試劑有限公司),以上試劑均為分析純。
通過雙目觀察判斷三種基原莪術(shù)的外部形態(tài)、顏色、大小、質(zhì)地和斷面特征,用直尺測量其大??;通過嗅覺判斷其氣味特點[3]。
2.2.1 石油醚超聲提取物樣品液的制備 分別取三種基原莪術(shù)粗粉各0.5g,置于3支具塞離心管中,加石油醚(30~60℃)各10mL,超聲處理20min,靜置片刻,用漏斗過濾,取濾液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中蒸干溶劑,加無水乙醇定容至1mL,待用[4]。
2.2.2 薄層鑒定 分別用點樣玻璃管各吸取約10μL的3種莪術(shù)石油醚超聲提取物樣品液,在已活化的硅膠板點上樣品,以石油醚、丙酮和醋酸乙酯(94∶5∶1)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以5%香草醛硫酸乙醇溶液,于烘箱中105℃加熱至斑點顯色清晰[5]。
3.1.1 蓬莪術(shù) 長圓形或卵圓形,基部鈍圓,頂端鈍尖,長2~5.5cm,直徑1.5~2cm。表面土黃色至灰黃色,粗糙,有明顯的環(huán)節(jié)凸起,中上部較稀,基部較密,兩側(cè)各有一列下陷的芽痕和類圓形的側(cè)生根莖痕,有的可見刀削痕。質(zhì)堅實而重,難折斷,擊破面黃綠色,稍帶粉性,內(nèi)皮層環(huán)明顯,皮層與中柱易分離。氣微香,味微苦而辛(圖1)。
圖1 蓬莪術(shù)切片
3.1.2 廣西莪術(shù) 長圓形或卵形,基部鈍圓,頂端多鈍尖,長3.5~7.5cm,直徑1.5~3cm。表面黃棕色至灰色,光滑,環(huán)節(jié)稍凸起或不見,有點須狀根痕或殘留須根,有的兩側(cè)各有一列下陷的芽痕和類圓形的側(cè)生根莖痕。質(zhì)堅實,難折斷,擊破面棕黃色至黃褐色,蠟樣光澤,皮層與中柱易分離。氣濃香,味微苦而辛(圖2)。
圖2 廣西莪術(shù)切片
3.1.3 溫莪術(shù) 長卵形或卵形、紡錘形,基部鈍圓,頂端長尖,長4~8cm,直徑2~4.5cm。表面深棕色至灰棕色,粗糙,上部環(huán)節(jié)凸起,基部有圓點狀下陷的須根痕,有刀削痕。質(zhì)堅實而重,擊破面黃褐色至棕褐色,角質(zhì)狀,內(nèi)皮層環(huán)明顯,并有點狀或條狀維管束散在。氣香或微香,味苦(圖3)。
圖3 溫莪術(shù)切片
3種基原莪術(shù)在外觀性狀上存在差異。通過肉眼觀察外部形態(tài)特征,發(fā)現(xiàn)蓬莪術(shù)和廣西莪術(shù)的基部均為鈍圓,而溫莪術(shù)基部為鈍圓或鈍尖;3種基原莪術(shù)個體的平均大小按從小到大的順序依次是蓬莪術(shù)、廣西莪術(shù)和溫莪術(shù);用手觸摸,蓬莪術(shù)和溫莪術(shù)表面均粗糙,而廣西莪術(shù)表面較為光滑;用鼻嗅氣味,廣西莪術(shù)的氣味濃重,而蓬莪術(shù)和溫莪術(shù)的氣味均較輕淡??傊?,根據(jù)性狀鑒定可以從3種基原的莪術(shù)中初步鑒定出廣西莪術(shù),而蓬莪術(shù)和溫莪術(shù)由于性狀相似尚難以鑒定區(qū)分。
3種基原莪術(shù)粉末的石油醚超聲提取物均為透明澄清物,但顏色差異突出:廣西莪術(shù)的石油醚超聲提取物顏色最深,顯金黃色;蓬莪術(shù)的石油醚超聲提取物顏色其次,顯淺黃色;溫莪術(shù)的石油醚超聲提取物顏色最淺,顯淺紫色。通過比較薄層色譜圖上的斑點數(shù)目可以鑒別出蓬莪術(shù),而通過比較另兩個樣品的斑點Rf值和顏色可以區(qū)分廣西莪術(shù)和溫莪術(shù)(圖4、表1)。
筆者結(jié)合多基原莪術(shù)的性狀鑒定和理化鑒定的優(yōu)勢,建立了一種多基原莪術(shù)的綜合鑒定法,可實現(xiàn)對其快速準確地鑒定[6],以凸顯不同基原莪術(shù)藥材的差異,保證其臨床用藥的安全有效。除了常規(guī)的性狀鑒定、顯微鑒定和理化鑒定外,一些新的鑒定技術(shù)也有望應用于多基原莪術(shù)的生藥鑒定。目前,電子鼻、DNA分子鑒定等新技術(shù)由于其突出的優(yōu)勢,被廣泛應用于人參、西洋參和川芎等中藥材的鑒定中,并成為生藥鑒定的熱點[7-10]。 電子鼻、DNA 分子鑒定應用于多基原莪術(shù)的鑒定,為建立其快速準確的鑒定方法提供了新的思路。
圖4 三種不同基原莪術(shù)石油醚超聲提取物薄層色譜圖
表1 三種不同基原莪術(shù)石油醚超聲提取物的薄層色譜圖比較
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