清肺潤(rùn)肺方輔助辨治對(duì)大鼠肺炎后氣道高反應(yīng)影響的實(shí)驗(yàn)研究＊

寧 濤，盧國(guó)豪，張奇蘭

(成都醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)技術(shù)中心，成都 610500)

肺炎是指發(fā)生在氣道末端以及肺泡和肺間質(zhì)的炎癥，以咳嗽、咳痰等為主要臨床表現(xiàn)，是臨床十分常見的呼吸系統(tǒng)疾?。?］。部分遷延難愈的肺炎患者中，在接觸冷空氣、灰塵、油煙、季節(jié)變化等刺激時(shí)，表現(xiàn)出一種過(guò)度或過(guò)早的氣管平滑肌收縮反應(yīng)，從而引發(fā)咳嗽、胸悶、氣促等呼吸道癥狀，這類癥狀被稱為氣道高反應(yīng)性表現(xiàn)［2］。針對(duì)上述癥狀，西醫(yī)的治療一般以抗過(guò)敏治療為主，臨床效果較差。中醫(yī)學(xué)從整體角度辨證論治，提出清肺熱、養(yǎng)肺陰、潤(rùn)肺燥的治療原則，取得了一定的成果［3］。本研究通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的方法，驗(yàn)證清肺潤(rùn)肺方輔助辨治大鼠肺炎后氣道高反應(yīng)的影響，取得一定的成果，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取購(gòu)自天津動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室的SPF級(jí)Wistar大鼠180只為研究對(duì)象，常溫下飼養(yǎng)3 d，正常飲食。所選大鼠體質(zhì)量140～152 g，育齡4～5周。經(jīng)過(guò)自然感染途徑建立支原體感染性肺炎大鼠模型。將所有大鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分為西醫(yī)治療組、中西醫(yī)結(jié)合組和對(duì)照組3組，3組大鼠的體質(zhì)量及性別比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

1.2 建立肺炎大鼠模型

用乙醚麻醉所選用的大鼠，將含有1×107變色單位(ccu)/ml的肺炎支原體菌液滴注于大鼠的鼻腔，培養(yǎng)3 d后肺炎大鼠模型建立完成。

1.3 制作標(biāo)本

分別隨機(jī)選取3組大鼠中的30只處死，無(wú)菌條件下開胸取出肺葉、氣管等組織，一部分備用，一部分經(jīng)過(guò)固定、包埋、染色等步驟制作觀察切片。

1.4 病原菌培養(yǎng)

將3組處死大鼠體內(nèi)取出的組織分為大小、質(zhì)量一致的組織切塊，在37℃的無(wú)菌條件下，支原體培養(yǎng)基內(nèi)培養(yǎng)7 d，PCR法鑒定肺炎支原體是否陽(yáng)性。

1.5 誘發(fā)氣道高反應(yīng)性表現(xiàn)

對(duì)3組中剩余的大鼠模型分別給予1%的OVA溶液霧化吸入，誘發(fā)氣道高反應(yīng)性表現(xiàn)。

1.6 治療方案

1.6.1 西醫(yī)治療組 喂服大鼠400 mg/kg劑量的孟魯斯特水溶液10 ml，連續(xù)2 d。

1.6.2 中西醫(yī)結(jié)合組 喂服大鼠400 mg/kg劑量的孟魯斯特水溶液10 ml+清肺潤(rùn)肺方熬制的濃縮液10 ml，連續(xù)3 d。

1.6.3 對(duì)照組 喂服大鼠400 mg/kg劑量的清水 10 ml，連續(xù) 3 d。

1.7 二次誘發(fā)氣道高反應(yīng)性表現(xiàn)

對(duì)3組中剩余的大鼠模型分別給予1%OVA溶液霧化吸入，誘發(fā)氣道高反應(yīng)性表現(xiàn)。

1.8 制作標(biāo)本

對(duì)3組中剩余的大鼠同1.3步驟中進(jìn)行處理。

1.9 病原菌培養(yǎng)

對(duì)3組中剩余的大鼠同1.4步驟中進(jìn)行處理。

1.10 觀察指標(biāo)

1)肺炎支原體感染陽(yáng)性率:對(duì)取出的大鼠組織器官進(jìn)行培養(yǎng)和檢驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)肺炎支原體感染陽(yáng)性率;2)肺組織病理評(píng)分:①氣管浸潤(rùn)百分比。0分:無(wú);1分:＜25%;2分:25% ～75%;3分＞75%;②氣管浸潤(rùn)定性。0分:未發(fā)生浸潤(rùn)或浸潤(rùn)較輕微;1分:輕度浸潤(rùn)，常伴有間斷環(huán)狀;2分:中度浸潤(rùn)，存在完整或月牙形環(huán)狀，厚度不超過(guò)5個(gè)細(xì)胞;3分:嚴(yán)重浸潤(rùn)，存在完整的環(huán)，厚度約5～10個(gè)細(xì)胞;③氣管滲出。0分:無(wú);1分:輕度;2分:重度滲出;④周圍血管浸潤(rùn)百分比。0分:無(wú);1分:＜10%;2分:10% ～50%;3分:＞50%;⑤實(shí)質(zhì)性肺炎。0分:無(wú);1分:輕度;2分:重度;3)氣道高反應(yīng)性表現(xiàn):經(jīng)統(tǒng)計(jì)誘導(dǎo)后出現(xiàn)咳嗽、氣促的樣本數(shù)百分比。

1.11 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 15.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 肺炎支原體感染陽(yáng)性率

表1顯示，對(duì)治療前后3組大鼠標(biāo)本組織培養(yǎng)后，檢驗(yàn)并統(tǒng)計(jì)肺炎支原體感染陽(yáng)性率。治療前陽(yáng)性率比較，3組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。治療后中西醫(yī)結(jié)合組陽(yáng)性率為23.33%，明顯低于其他2組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

表1 肺炎支原體感染陽(yáng)性率比較(%)

2.2 肺組織病理評(píng)分

表2顯示，觀察治療前后的3組大鼠標(biāo)本切片，依據(jù)上述標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)分。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，治療前3組大鼠的病理評(píng)分比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。治療后中西醫(yī)結(jié)合組的病理評(píng)分最低(2.18±1.02)，遠(yuǎn)低于其他2組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

表2 肺組織病理評(píng)分比較(分)

2.3 氣道高反應(yīng)性表現(xiàn)

表3顯示，比較3組大鼠治療前后誘發(fā)氣道高反應(yīng)性的表現(xiàn)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，治療前3組大鼠氣道高反應(yīng)陽(yáng)性率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);治療后中西醫(yī)結(jié)合組的氣道高反應(yīng)陽(yáng)性率為30.00%，明顯低于其他2組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

表3 氣道高反應(yīng)性表現(xiàn)比較(%)

3 討論

肺炎是指發(fā)生在氣道末端以及肺泡和肺間質(zhì)的炎癥，以咳嗽、咳痰等為主要臨床表現(xiàn)，在臨床十分常見，一般由細(xì)菌、病毒、真菌以及衣原體、支原體等病原微生物感染所致，多存在自愈性［4］。但部分患者由于炎癥破壞了氣道以及肺泡黏膜細(xì)胞，在接觸冷空氣、灰塵、油煙、季節(jié)變化等刺激時(shí)，表現(xiàn)出一種過(guò)度或過(guò)早的氣管平滑肌收縮反應(yīng)，從而引發(fā)咳嗽、胸悶、氣促等呼吸道癥狀，被稱為氣道高反應(yīng)性表現(xiàn)。目前臨床對(duì)氣道高反應(yīng)性表現(xiàn)的病因尚未完全清楚，推測(cè)可能與遺傳因素有關(guān)［5］。另外，對(duì)氣道高反應(yīng)患者的分析發(fā)現(xiàn)，遷延日久的肺炎患者，病程遷延難愈，也是氣道高反應(yīng)的高發(fā)人群。其原因在于呼吸系統(tǒng)長(zhǎng)時(shí)間的炎癥對(duì)呼吸道及肺泡黏膜細(xì)胞的破壞，造成上皮內(nèi)神經(jīng)的損傷，一旦刺激氣管平滑肌，會(huì)造成平滑肌刺激性收縮，其反射性的增強(qiáng)會(huì)引起上述癥狀［6］。

SKIEPKOR等在研究中發(fā)現(xiàn)，氣道高反應(yīng)患者多為過(guò)敏體質(zhì)，因此西醫(yī)治療一般以抗過(guò)敏治療為主［7］。孟魯斯特作為白三烯受體拮抗劑，是臨床針對(duì)氣道高反應(yīng)患者的常用藥，能夠有效抑制白三烯在肺炎反應(yīng)中的作用，達(dá)到降低氣道高反應(yīng)性表現(xiàn)的作用。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，肺部感染為肺熱傷津之證，肺熱煉液化痰，固于上焦，耗傷陰氣，進(jìn)而引起陰虛內(nèi)熱，既加重肺熱又內(nèi)熱化為內(nèi)風(fēng)，風(fēng)盛則燥加重津液損傷［8］。“肺喜潤(rùn)而惡燥”，咳嗽的產(chǎn)生即是由于肺氣失宣，發(fā)為咳嗽。氣道高反應(yīng)的癥狀，是肺熱傷津證的后期表現(xiàn)，此時(shí)炎癥稍退但內(nèi)熱未消，干咳少痰，遷延日久［9］。治療應(yīng)以清燥潤(rùn)肺、止痰化咳為主，黃芩、桑白皮清肺熱，沙參、麥冬養(yǎng)肺陰，玉竹、川貝母潤(rùn)肺生津，陳皮、枇杷葉、炙百部止咳化痰，最后用蟬蛻、僵蠶等起抗過(guò)敏的作用［10］。

本研究通過(guò)比較西醫(yī)治療組、中西醫(yī)結(jié)合治療組以及未治療對(duì)照組3組的治療前后病原學(xué)、病理學(xué)以及癥狀的變化，評(píng)價(jià)清肺潤(rùn)肺方輔助辨治對(duì)大鼠肺炎后的氣道高反應(yīng)的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，治療前病原學(xué)、病理學(xué)以及癥狀基本相同的3組大鼠，在治療后差異明顯，對(duì)照組情況略有改善，為自愈性表現(xiàn);西醫(yī)治療通過(guò)單純的孟魯斯特治療改善并不明顯，病原學(xué)陽(yáng)性率46.67%，病理學(xué)評(píng)分降低不到一半為(5.31±0.85)分，氣道高反應(yīng)性癥狀陽(yáng)性率63.33%，遠(yuǎn)高于中西醫(yī)結(jié)合治療組的23.33%(2.18±1.02)分和30.00%。

綜上所述，中西醫(yī)結(jié)合治療以清肺潤(rùn)肺方輔助辨治治療大鼠肺炎后的氣道高反應(yīng)，較單純西醫(yī)治療效果有明顯改善。

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