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    超高效液相色譜質(zhì)譜結(jié)合主成分分析方法研究制川烏配伍前后的腸內(nèi)菌代謝差異

    2014-11-19 21:05:50李雪?┢ぷ臃?邢俊鵬林娜劉志強(qiáng)
    分析化學(xué) 2014年11期
    關(guān)鍵詞:川烏生物轉(zhuǎn)化防己

    李雪?┢ぷ臃? 邢俊鵬 林娜 劉志強(qiáng) 宋鳳瑞

    1引言

    制川烏(Radix Aconiti Preparata, RAP)為川烏的炮制品,是一種廣泛用于治療風(fēng)濕性疾病的常用中藥,其主要化學(xué)成分為二萜類生物堿,該類化合物既是活性成分同時(shí)又具有一定的毒性\[1\]。中醫(yī)理論常通過(guò)配伍的方式達(dá)到減毒增效的目的。川烏與白芍、川烏與防己配伍是中醫(yī)治療風(fēng)濕痹癥的常用藥對(duì),前者出自于漢代張仲景的烏頭湯,后者最早見于唐代孫思邈的防己湯\[2\]。近年來(lái),對(duì)于烏頭與白芍或防己藥對(duì)配伍減毒增效的機(jī)理研究主要集中在鎮(zhèn)痛、抗炎和免疫調(diào)節(jié)等藥效學(xué)方面\[3,4\],而對(duì)于其藥理活性成分在發(fā)揮藥效前生物轉(zhuǎn)化情況卻鮮有報(bào)道。

    經(jīng)口服給藥的中藥在到達(dá)靶器官之前,其中的化學(xué)成分可能受到腸內(nèi)菌群的作用而發(fā)生生物轉(zhuǎn)化\[5\]。因此,藥物經(jīng)腸內(nèi)菌的代謝研究對(duì)闡明其生理作用機(jī)制具有重要意義。但是由于中藥化學(xué)成分的復(fù)雜性及代謝產(chǎn)物的多樣性,多組樣品代謝后差異的分析面臨著巨大的挑戰(zhàn)。本研究采用UPLCMS技術(shù)對(duì)制川烏單煎液、制川烏白芍共煎液、及制川烏防己共煎液在大鼠腸內(nèi)菌中代謝前后的烏頭類生物堿及其代謝產(chǎn)物進(jìn)行了高效的分離鑒定,進(jìn)而采用主成分分析方法對(duì)液質(zhì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。首次從整體原型及代謝產(chǎn)物的角度分析了白芍、防己對(duì)制川烏腸內(nèi)菌生物轉(zhuǎn)化的影響,為闡明制川烏與白芍、防己配伍后減毒增效機(jī)理提供了新的依據(jù)。

    2實(shí)驗(yàn)部分

    2.1儀器與試劑

    Accela UPLC高效液相色譜系統(tǒng)串聯(lián)FinniganLTQ XL離子阱質(zhì)譜儀(美國(guó)Thermo公司產(chǎn)品),配備ESI電噴霧離子源; 手套式厭氧培養(yǎng)箱(美國(guó)Thermo公司產(chǎn)品)。

    制川烏(四川江油); 白芍、防己(長(zhǎng)春市吉林大藥房); 利血平(美國(guó)Sigma公司); GAM培養(yǎng)基(日本日水公司); 甲醇、乙腈(色譜純,英國(guó)Fisher Scientific公司); 乙酸乙酯(分析純,北京試劑廠); 去離子水由Millipore純水儀制備。

    1引言

    制川烏(Radix Aconiti Preparata, RAP)為川烏的炮制品,是一種廣泛用于治療風(fēng)濕性疾病的常用中藥,其主要化學(xué)成分為二萜類生物堿,該類化合物既是活性成分同時(shí)又具有一定的毒性\[1\]。中醫(yī)理論常通過(guò)配伍的方式達(dá)到減毒增效的目的。川烏與白芍、川烏與防己配伍是中醫(yī)治療風(fēng)濕痹癥的常用藥對(duì),前者出自于漢代張仲景的烏頭湯,后者最早見于唐代孫思邈的防己湯\[2\]。近年來(lái),對(duì)于烏頭與白芍或防己藥對(duì)配伍減毒增效的機(jī)理研究主要集中在鎮(zhèn)痛、抗炎和免疫調(diào)節(jié)等藥效學(xué)方面\[3,4\],而對(duì)于其藥理活性成分在發(fā)揮藥效前生物轉(zhuǎn)化情況卻鮮有報(bào)道。

    經(jīng)口服給藥的中藥在到達(dá)靶器官之前,其中的化學(xué)成分可能受到腸內(nèi)菌群的作用而發(fā)生生物轉(zhuǎn)化\[5\]。因此,藥物經(jīng)腸內(nèi)菌的代謝研究對(duì)闡明其生理作用機(jī)制具有重要意義。但是由于中藥化學(xué)成分的復(fù)雜性及代謝產(chǎn)物的多樣性,多組樣品代謝后差異的分析面臨著巨大的挑戰(zhàn)。本研究采用UPLCMS技術(shù)對(duì)制川烏單煎液、制川烏白芍共煎液、及制川烏防己共煎液在大鼠腸內(nèi)菌中代謝前后的烏頭類生物堿及其代謝產(chǎn)物進(jìn)行了高效的分離鑒定,進(jìn)而采用主成分分析方法對(duì)液質(zhì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。首次從整體原型及代謝產(chǎn)物的角度分析了白芍、防己對(duì)制川烏腸內(nèi)菌生物轉(zhuǎn)化的影響,為闡明制川烏與白芍、防己配伍后減毒增效機(jī)理提供了新的依據(jù)。

    2實(shí)驗(yàn)部分

    2.1儀器與試劑

    Accela UPLC高效液相色譜系統(tǒng)串聯(lián)FinniganLTQ XL離子阱質(zhì)譜儀(美國(guó)Thermo公司產(chǎn)品),配備ESI電噴霧離子源; 手套式厭氧培養(yǎng)箱(美國(guó)Thermo公司產(chǎn)品)。

    制川烏(四川江油); 白芍、防己(長(zhǎng)春市吉林大藥房); 利血平(美國(guó)Sigma公司); GAM培養(yǎng)基(日本日水公司); 甲醇、乙腈(色譜純,英國(guó)Fisher Scientific公司); 乙酸乙酯(分析純,北京試劑廠); 去離子水由Millipore純水儀制備。

    1引言

    制川烏(Radix Aconiti Preparata, RAP)為川烏的炮制品,是一種廣泛用于治療風(fēng)濕性疾病的常用中藥,其主要化學(xué)成分為二萜類生物堿,該類化合物既是活性成分同時(shí)又具有一定的毒性\[1\]。中醫(yī)理論常通過(guò)配伍的方式達(dá)到減毒增效的目的。川烏與白芍、川烏與防己配伍是中醫(yī)治療風(fēng)濕痹癥的常用藥對(duì),前者出自于漢代張仲景的烏頭湯,后者最早見于唐代孫思邈的防己湯\[2\]。近年來(lái),對(duì)于烏頭與白芍或防己藥對(duì)配伍減毒增效的機(jī)理研究主要集中在鎮(zhèn)痛、抗炎和免疫調(diào)節(jié)等藥效學(xué)方面\[3,4\],而對(duì)于其藥理活性成分在發(fā)揮藥效前生物轉(zhuǎn)化情況卻鮮有報(bào)道。

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    2實(shí)驗(yàn)部分

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    制川烏(四川江油); 白芍、防己(長(zhǎng)春市吉林大藥房); 利血平(美國(guó)Sigma公司); GAM培養(yǎng)基(日本日水公司); 甲醇、乙腈(色譜純,英國(guó)Fisher Scientific公司); 乙酸乙酯(分析純,北京試劑廠); 去離子水由Millipore純水儀制備。

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