真菌性角膜炎臨床實驗室快速診斷方法的探討

于瑞

真菌性角膜炎是由真菌感染引起具有很高致盲率的感染性角膜病變, 近年來, 其發(fā)病率呈不斷升高趨勢。目前角膜刮片鏡檢和真菌培養(yǎng)是臨床常用的檢測方法, 但角膜刮片鏡檢靈敏度和特異性均較低, 真菌培養(yǎng)是臨床診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”,但耗時較長, 不利于患者的早期診斷, 患者常因確診延誤影響臨床治療［1］。因此選擇快速、簡便、有效的診斷方法以確定病因?qū)χ笇?dǎo)臨床治療具有重要的意義。自2010年5月以來,本院對送檢疑似真菌性角膜炎患者的角膜刮片標(biāo)本分別采用熒光染色法、真菌培養(yǎng)和墨汁-KOH濕片鏡檢三種方法檢測,并對結(jié)果進(jìn)行比較和分析, 現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2010年5月～2013年9月本院臨床送檢疑似真菌性角膜炎患者的角膜刮片標(biāo)本60例為研究對象,其中男31例, 女29例, 年齡23～56歲。

1.2 檢測方法 患者眼部采用愛爾卡因表面麻醉, 無菌棉拭棒擦去表面壞死組織, 用無菌手術(shù)刀片刮取角膜潰瘍周邊和基底部, 取樣標(biāo)本送本院實驗室檢測。墨汁-KOH濕片法：挑取送檢的角膜潰瘍組織于載玻片上涂片, 滴加10%KOH和墨汁混合液(按9:1比例混合)1滴, 蓋上蓋玻片后鏡檢；熒光染色法：取角膜潰瘍組織于載玻片上, 滴加熒光染色液1滴, 蓋上蓋玻片后鏡檢；真菌培養(yǎng)：將角膜潰瘍組織接種于沙氏培養(yǎng)基中, 25℃培養(yǎng)2周, 觀察培養(yǎng)結(jié)果、鑒定菌種并進(jìn)行藥敏試驗。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS17.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理, 計數(shù)資料用率(%)表示, 陽性率的比較采用χ2檢驗, P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

60例臨床送檢疑似真菌性角膜炎患者的角膜刮片標(biāo)本中, 真菌培養(yǎng)陽性45例, 陽性率為75.00%。以真菌培養(yǎng)結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn), 45例真菌培養(yǎng)陽性標(biāo)本中墨汁-KOH濕片法28例陽性, 陽性率為62.22%, 熒光染色法40例陽性, 陽性率為88.89%, 墨汁-KOH濕片法和熒光染色法檢測結(jié)果比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05), 詳見表1。

表1 兩種染色方法鏡檢結(jié)果比較(n, %)

3 討論

真菌性角膜炎是由曲霉菌、鐮刀菌等致病性真菌引起的感染性眼部疾病, 患者常伴有視力減退、角膜潰瘍等癥狀。近年來, 由于糖皮質(zhì)激素、廣譜抗菌藥物、免疫抑制劑的濫用及角膜接觸鏡的使用不當(dāng)?shù)? 導(dǎo)致角膜真菌感染的發(fā)病率呈明顯上升趨勢。真菌性角膜炎發(fā)病具有進(jìn)展快、癥狀隱匿、不易診斷等特點, 常造成臨床的漏診和誤診, 加之一些抗真菌藥物對眼部疾病的療效有限, 如治療不及時, 可導(dǎo)致角膜混濁、潰瘍甚至穿孔, 嚴(yán)重影響患者的工作和生活質(zhì)量［2］。因此早期診斷和治療是患者獲得良好療效的關(guān)鍵。

真菌培養(yǎng)和KOH濕片法是真菌傳統(tǒng)的實驗室檢查方法,但真菌培養(yǎng)過程復(fù)雜, 培養(yǎng)時間需1～2周, 檢測結(jié)果往往具有一定的滯后性, 不能做到快速診斷, 因而影響患者的臨床治療［3］。本文作者采用的墨汁-KOH濕片法, 雖然具有診斷快、操作簡便及鏡下對比度強(qiáng)等優(yōu)勢, 但其檢測結(jié)果符合率偏低, 存在一定的假陽性結(jié)果, 易造成臨床的誤診和漏診而直接影響患者的治療。本文結(jié)果顯示, 在60例臨床送檢的疑似標(biāo)本中, 經(jīng)真菌培養(yǎng)后有45例陽性, 表明臨床僅從外傷史和臨床癥狀判斷患者真菌感染有一定的誤診率, 此外, 部分病例在進(jìn)行真菌培養(yǎng)前已經(jīng)應(yīng)用抗真菌藥物治療也是導(dǎo)致患者真菌培養(yǎng)結(jié)果陰性的原因。在45例真菌培養(yǎng)陽性的標(biāo)本中,墨汁-KOH濕片法檢測28例為陽性, 陽性率為62.22%, 熒光染色法40例為陽性, 陽性率為88.89%, 兩種檢測方法陽性率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義, 表明熒光染色法的檢測結(jié)果符合率明顯優(yōu)于墨汁-KOH濕片法, 并且在臨床常用的真菌檢測方法中熒光染色法的費用相對較低, 可以做到對眼部真菌病變的早期、快速診斷。

綜上所述, 作者認(rèn)為熒光染色法具有操作簡便、快速及陽性符合率較高等優(yōu)勢, 可作為眼部真菌感染臨床實驗室早期診斷的首選方法。

［1］魏文利,張蕊石,周向京.聯(lián)合試驗在真菌性角膜炎診斷中的應(yīng)用.實用醫(yī)學(xué)雜志, 2011,27(1):113-114.

［2］穆紅梅,皮百木,李家臣,等.真菌性角膜炎的流行病學(xué)、臨床和微生物特征分析.眼科新進(jìn)展, 2013,33(9):879-880.

［3］王連喜,劉宏巨.真菌性角膜炎的實驗室常規(guī)檢測方法.檢驗醫(yī)學(xué)與臨床, 2012,9(5):638-639.