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    治療劑量環(huán)孢素A及他克莫司對大鼠血細(xì)胞的影響

    2014-11-02 04:00:14何綠茵陳業(yè)輝李淼沅陳林強林華欣徐邦牢
    現(xiàn)代醫(yī)院 2014年7期
    關(guān)鍵詞:血細(xì)胞血小板體重

    何綠茵 陳業(yè)輝 李淼沅 仉 智 陳林強 林華欣 聶 品 江 文 徐邦牢

    腎移植是終末期腎病的有效治療手段之一,術(shù)后我們常用鈣調(diào)磷酸酶類免疫抑制(CsA及FK506)來預(yù)防受體對供腎的免疫排斥反應(yīng)。臨床使用上述兩藥過程中,我們發(fā)現(xiàn)二者會不同程度影響血象,但缺乏相應(yīng)的實驗驗證及系統(tǒng)的臨床資料的分析。本研究就在模擬臨床上腎移植術(shù)后的用藥方案,來觀察上述兩藥對大鼠細(xì)胞的影響,進而指導(dǎo)臨床上用藥選擇。

    1 材料與方法

    1.1 實驗動物來源及分組

    雄性清潔級近交系SD大鼠(Sprague-Dawley)18只,體重200~250 g/只,由中山大學(xué)實驗動物中心提供并在該中心開展實驗,合格證號SCXK(粵)2009-0011。實驗前,先在實驗室飼養(yǎng)大鼠1周,以適應(yīng)SPF環(huán)境,飲用消毒飲用水,晝夜節(jié)律。采用隨機區(qū)組設(shè)計方式,將18只大鼠分為對照組、CsA組及FK506組3組,每組6只。

    1.2 實驗藥物及劑量

    CsA產(chǎn)自杭州中美華東制藥有限公司,F(xiàn)K506產(chǎn)自日本大阪藤澤公司。參考大鼠與人的劑量換算公式 DW1=[(R1W21/3)/(R2Wl1/3)]DW2,其中DW是藥物的劑量,R是體型指數(shù)(大鼠和人的R值分別為0.09和0.1~0.11),W是標(biāo)準(zhǔn)體重(大鼠和人的W值分別是200 g和60 kg)[1]。將腎移植術(shù)后首劑治療劑量換算為大鼠給藥方案為:CsA為25 mg·kg-1·d-1;FK506 為 0.8 mg·kg-1·d-1;而對照組則給予消毒飲用水1 mg·kg-1·d-1。用大鼠專用圓頭金屬灌胃針進行灌胃方式給藥,每天給藥1次,稱重2次/周,依據(jù)體重調(diào)整藥量,規(guī)律給藥4周,各組大鼠模型建立,遂處死大鼠并取血標(biāo)本。

    1.3 觀察指標(biāo)

    應(yīng)用日本東亞公司生產(chǎn)的sysmex系列的XN-2000血細(xì)胞分析儀及配套試劑對各組大鼠血液中WBC、RBC、HGB、PLT、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW 及 MPV 進行檢測。

    1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

    采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件包,實驗數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示;各組間比較采用方差分析(Analysis of Variance,ANOVA),兩兩比較采用LSD-t檢驗(Least Significant Difference,LSD),α =0.05。

    2 結(jié)果

    2.1 各組大鼠體重比較

    實驗前各組大鼠之間體重差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p>0.05)。實驗4周后,CsA組大鼠體重及體重增長值較對照組及FK506組低,且差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05),見表1及圖1。

    2.2 各組大鼠血細(xì)胞的比較

    對照組、CsA組及FK506組的RBC、HCT無明顯差異,且組間比較無統(tǒng)計學(xué)意義(p﹥0.05)。

    表1 各組大鼠實驗前后的體重比較(±s)g

    表1 各組大鼠實驗前后的體重比較(±s)g

    注:與對照組比較,1)p<0.05;與CsA組比較,2)p<0.05;與FK506組比較,3)p<0.05

    組別 數(shù)量 實驗前體重(g)實驗后體重(g)體重增長值(g)對照組 6 238±23 362±372) 124±242)CsA組 6 232±18 272±171)3) 40±41)3)FK506組 6 240±16 343±362) 103±232)

    圖1 各組大鼠實驗前后的體重及體重增長值的比較

    CsA組WBC、PLT較對照組及FK506組明顯升高,且CsA組與后兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05),而對照組與FK506組組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p>0.05)。

    CsA及FK506組的MPV較對照組增多,且CsA增加的幅度最大,CsA及FK506分別與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05),且CsA與FK506組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)。

    CsA組HGB、MCV、RDW 較對照組及 FK506組明顯降低,且CsA組與后兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05),而對照組與FK506組組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p>0.05)。

    CsA組MCH較對照組減少,F(xiàn)K506組較對照組增多,且CsA及FK606分別同對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)。

    FK506組MCHC較CsA及對照組升高,且差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)。見表2及表3。

    表2 各組大鼠給藥4周后血常規(guī)比較(±s)

    表2 各組大鼠給藥4周后血常規(guī)比較(±s)

    注:與對照組比較,1)p<0.05;與 CsA 組比較,2)p<0.05;與 FK506組比較,3)p<0.05

    組別 數(shù)量 WBC(109/L)RBC(1012/L)HGB(g/L)PLT(1012/L)HCT(L/L)對照組 6 4.98 ±1.862) 7.16 ±0.28 143.17 ±6.682) 975.17 ±70.712)0.40 ±0.03 CsA 組 6 11.80 ±2.071)3) 7.41 ±0.29 125.00 ±8.671)3)1190.00 ±73.701)3) 0.39 ±0.01 FK506 組 6 4.04 ±0.962) 7.11 ±0.29 147.00 ±6.072) 1010.83 ±35.072)0.40 ±0.01

    表3 各組大鼠給藥4周后血常規(guī)比較(±s)

    表3 各組大鼠給藥4周后血常規(guī)比較(±s)

    注:與對照組比較,1)p<0.05;與CsA組比較,2)p<0.05;與FK506組比較,3)p<0.05

    組別 數(shù)量 MCV(fl)MCH(pg)MCHC(g/L)RDW(%)MPV(fl)對照組 6 56.30 ±2.322) 18.90 ±0.402)3) 335.33 ±7.633) 17.32 ±0.392) 6.26 ±0.352)3)CsA 組 6 52.15 ±0.791)3) 17.42 ±0.641)3) 343.33 ±13.533) 8.97 ±0.221) 7.47 ±0.191)3)FK506 組 6 56.63 ±2.292) 20.68 ±0.301)2) 365.33 ±11.641)2) 16.43 ±1.272) 7.06 ±0.131)2)

    3 討論

    CsA與FK506同屬CNI類免疫抑制劑,是目前臨床上腎移植術(shù)后常用的免疫抑制,其作用機制相似,均作用與鈣調(diào)磷酸酶(CN),阻止T細(xì)胞活化及IL-2的釋放,來發(fā)揮抗免疫排除的作用,但運用的過程中會伴隨其他的不良反應(yīng),如肝腎毒性[2-3],性功能及生殖系統(tǒng)[4]的毒害,心臟毒性等,本文主要探討CsA及FK506對血細(xì)胞的影響。

    血細(xì)胞存在于外周血液循環(huán)系統(tǒng)內(nèi),主要包括:①紅細(xì)胞:主要的功能是運送氧和CO2,并在血液酸堿平衡中起到一定的緩沖作用。②白細(xì)胞:各類白細(xì)胞(中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等)均參與機體的防御功能。③血小板:止血過程中起著重要作用,同時還有助于維持血管壁的完整性。

    臨床上長期應(yīng)用CsA、FK506后,血常規(guī)中某些指標(biāo)會發(fā)生一定的變化,如CsA[5]會引起白細(xì)胞、血小板減少,貧血等,F(xiàn)K506[6]可能影響白細(xì)胞數(shù)量(升高或降低)、貧血及血小板減少。

    我們本研究發(fā)現(xiàn)CsA引起WBC升高,這與臨床上長期用藥后WBC減少[5]不符合,雖有報道稱有諸如硫唑嘌呤等免疫抑制劑骨髓移植導(dǎo)致白細(xì)胞減少后改用CsA后早期可升高WBC[7],但具體機制不詳。本組實驗大鼠體重最輕,體重增長值最小,精神差,嗜睡,脫毛發(fā),均可反映大鼠機能明顯變差,間接提示免疫系統(tǒng)相對較差。本實驗我們考慮WBC升高可能與CsA長期應(yīng)用引起機體免疫功能紊亂,導(dǎo)致機體感染有關(guān),或與CsA刺激骨髓造血功能有關(guān)。WBC增高是否確切由感染所致,暫缺乏直接證據(jù),還需進一步論證。

    本實驗中CsA引起PLT及MPV增高,前者提示血小板數(shù)量增多,后者提示血小板體積增大,二者同時增加,考慮可能與CsA在早期一定程度刺激骨髓造血功能或存在感染刺激有關(guān),但目前未有相關(guān)文獻報道。臨床上長期應(yīng)用CsA會導(dǎo)致PLT減少,其機制是CsA長期使用引發(fā)藥物免疫應(yīng)答導(dǎo)致血小板的消耗所致[8]。

    本實驗中CsA引起HBG、MCV、RDW減少,但RBC無明顯改變,我們考慮可能與長期應(yīng)用CsA引起腹瀉,影響胃腸道鐵離子的吸收,進而使得血紅蛋白合成不足,導(dǎo)致缺鐵性貧血(小細(xì)胞低色素);還有可能是CsA的長期作用引起腎毒性,減少了EPO的合成,導(dǎo)致貧血[9]。

    本研究中FK506對血細(xì)胞影響輕微。

    腎移植術(shù)后的處理和護理對移植腎的存活和移植病人的康復(fù)非常重要[10],我們的研究提示CsA對血細(xì)胞影響較大,因而我們在臨床上使用CsA的過程中,需定期復(fù)查血象,方能及時發(fā)現(xiàn)并處理可能合并的感染、貧血或血小板異常的情況。

    [1]陳業(yè)輝,梁顏笑,陳林強,等.治療劑量他克莫司對大鼠腎臟病理及超微結(jié)構(gòu)變化的影響[J].中華醫(yī)學(xué)雜志,2009,89(10):704-708.

    [2]仉 智,陳業(yè)輝,陳林強,等.腎移植術(shù)后不同免疫抑制劑首劑治療劑量對獨腎模型大鼠睪丸發(fā)育及精子質(zhì)量的影響[J].廣東醫(yī)學(xué),2012,33(1):54-56.

    [3]林華欣,陳業(yè)輝,仉 智,等.腎移植術(shù)后首劑治療劑量環(huán)孢素A和他克莫司及雷帕霉素對獨腎大鼠肝臟功能的影響[J].廣東醫(yī)學(xué),2013,34(13):1989 -1991.

    [4]CHEN Y,ZHANG Z,LIN Y,et al.Long-Term Impact of Immunosuppressants at Therapeutic Doses on Male Reproductive System in Unilateral Nephrectomized Rats:A Comparative Study[J].BioMed research international 2013,2013.

    [5]REIS F,PARADA B,TEIXEIRA DE LEMOS E,et al.Hypertension induced by immunosuppressive drugs:a comparative analysis between sirolimus and cyclosporine[J].In:Transplantation proceedings:2009:Elsevier,2009:868 -873.

    [6]張世俊,鄧龍華,趙文麗.他克莫司的臨床應(yīng)用評價[J].中國醫(yī)院用藥評價與分析,2012,12(4):292-295.

    [7]周曉霞,陳 實,章詠裳,等.腎移植術(shù)后因常規(guī)免疫抑制劑引起外周血白細(xì)胞減少而短期改用環(huán)孢素A的體會[J].中華器官移植雜志,1987,8(3).

    [8]張小東.腎移植診療學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2007:293.

    [9]雷東明,鄒洪斌,高弼虎,等.促紅細(xì)胞生成素及其受體在慢性環(huán)孢素A腎毒性大鼠腎組織中的表達(dá)[J].第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報,2013,34(8):823 -827.

    [10]蘇麗芳,容超賢,張偉婷,等.親屬活體腎移植受者腎功能延遲恢復(fù)的護理[J].現(xiàn)代醫(yī)院,2011,11(2):94 -95.

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