離子色譜法測(cè)定生鮮乳中的硫氰酸根

穆阿麗，初曉娜，吳 燕，徐秀玲，李 輝，李 彥

（青島市飼料獸藥檢測(cè)站，山東青島 266071）

硫氰酸鈉是白色斜方晶，系結(jié)晶或粉末，易溶于水、乙醇和丙酮。原料乳或奶粉中摻入硫氰酸鈉后可有效抑菌、保鮮。但硫氰酸鈉是毒害品，少量的食入就會(huì)對(duì)人體造成極大傷害。2008年12月，衛(wèi)生部發(fā)布的《食品中可能違法添加的非食用物質(zhì)和易濫用的食品添加劑品種名單（第一批）》中明確規(guī)定乳及乳制品中硫氰酸鈉屬于違法添加物質(zhì)。硫氰酸根檢測(cè)的常見(jiàn)方法有滴定法、光譜法、頂空或衍生氣相色譜法和反相離子對(duì)色譜法等（黃麗等，2006；符展明等，1994）。 本實(shí)驗(yàn)采用離子色譜法對(duì)生鮮乳中硫氰酸根進(jìn)行測(cè)定。

1 材料和方法

1.1 儀器和試劑 瑞士萬(wàn)通850型離子色譜儀（配電導(dǎo)檢測(cè)器、858自動(dòng)進(jìn)樣器）；固相萃取小柱：Supelclean LC-18 SPE Tubes；硫氰化鉀標(biāo)準(zhǔn)品（純度≥98.5%）。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制 準(zhǔn)確稱(chēng)取于80℃烘箱內(nèi)烘至2 h的硫氰化鉀1.6986 g于1000 mL容量瓶中，定容，混勻，得1000 mg/L硫氰酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。取硫氰酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液1 mL，置于100 mL容量瓶中，加水至刻度，此溶液含硫氰酸10 mg/L。移取 0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0 mL 硫氰酸標(biāo)準(zhǔn)中間液，用水定容于10 mL容量瓶中，濃度分別為0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0 mg/L， 即為標(biāo)準(zhǔn)工作液，進(jìn)行檢測(cè)。

1.3 樣品前處理 準(zhǔn)確量取液態(tài)奶樣品4 mL，加入5 mL色譜純乙腈，渦旋混勻，6000 r/min離心5 min，取上清液用超純水稀釋2倍，過(guò)5 mL甲醇和10 mL水活化的LC-18小柱除去樣品中的脂肪，然后進(jìn)行樣品檢測(cè)。

1.4 色譜條件 色譜柱：Metrosep A Supp 5-250/4.0 mm；檢測(cè)器：電導(dǎo)檢測(cè)器；淋洗液：3.2 mmol/L Na2CO3+1.0 mmol/L NaHCO3+7.5%Acetone；流速：0.7 mL/min；柱溫：30 ℃；進(jìn)樣體積：20 μL。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜柱的選擇 硫氰酸根為疏水性的陰離子，具有易極化、保留性強(qiáng)的特點(diǎn)，在普通的離子色譜交換柱上易拖尾，峰形不對(duì)稱(chēng)。因此對(duì)硫氰酸根進(jìn)行檢測(cè)和分析，需要選擇親水性的色譜柱，這樣才能改善色譜的峰形，提高檢出靈敏度。 Metrosep A supp 5-150、A supp 5-250 為常見(jiàn)的陰離子交換柱。對(duì)這兩種色譜柱分別進(jìn)行實(shí)驗(yàn)比較（圖 1、圖 2），結(jié)果表明，使用 A supp 5-250柱能很好地將硫氰酸根與其他離子分開(kāi)，并且能大大縮短保留時(shí)間，進(jìn)而縮短樣品分析時(shí)間。

圖1 A supp 5-250測(cè)定硫氰酸根色譜圖

圖2 A supp 5-150測(cè)定硫氰酸根色譜圖

2.2 淋洗液條件的優(yōu)化 應(yīng)用離子色譜法測(cè)定硫氰酸根時(shí)，選用3.2 mmol/L Na2CO3+1.0 mmol/L NaHCO3的淋洗液濃度，能夠很好提高離子的分離效果，并能縮短保留時(shí)間。為了減少吸附作用，改善峰形和縮短分析時(shí)間，常常需要在淋洗液中加入一定比例的丙酮。本實(shí)驗(yàn)分別添加15%、10%、7.5%三種不同比例的丙酮進(jìn)行硫氰酸根的測(cè)定，結(jié)果表明，添加7.5%的丙酮完全可以達(dá)到實(shí)驗(yàn)需求，既能很好地改善硫氰酸根的峰形，同時(shí)又縮短了保留時(shí)間。

2.3 線性范圍和檢測(cè)限 在選定的色譜條件下，對(duì)硫氰酸根的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果表明：濃度在0.1～5 mg/L，與峰面積有良好的線性關(guān)系，以硫氰酸根的質(zhì)量濃度Q（mg/L）對(duì)相應(yīng)的峰面積A作標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到線性方程為A=-2.55107E-3+4.50037E-3×Q，線性相關(guān)系數(shù)為0.9993。以3倍的信噪比（S/N=3）計(jì)算得出方法的檢出限為1.3 μg/L，以 10 倍的信噪比（S/N=10）計(jì)算得出定量限為 4.2 μg/L。

2.4 加標(biāo)回收率和精密度 分別添加硫氰酸根標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液 10、20、40、60、100 μL 于 4 mL 生鮮乳中，使之成為硫氰酸根含量分別為2.5、5、10、15、25 mg/L的陽(yáng)性樣品，在選定實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，每個(gè)濃度平行測(cè)定6次，同時(shí)以牛奶做空白對(duì)照，檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1、表2。

表1 空白樣品中硫氰酸根的含量

表2 加標(biāo)樣品中硫氰酸根含量及回收率

由表1、表2可見(jiàn)，樣品加標(biāo)回收率在95% ～104%，RSD在0.9% ～1.5%，重復(fù)性良好，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)方法符合方法學(xué)的要求。

3 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，通過(guò)對(duì)離子色譜法的色譜條件進(jìn)行優(yōu)化，硫氰酸根的分離效果較好，保留時(shí)間大幅縮短，精密度和回收率符合分析要求，干擾小，能提高硫氰酸根的回收率及準(zhǔn)確度，適合應(yīng)用于生鮮乳中硫氰酸根的測(cè)定。

[1]符展明，羅珊華，朱慧敏.頂空氣相色譜法測(cè)定血清中硫氰酸鹽[J].職業(yè)醫(yī)學(xué)，1994，21（3）：44 ～ 45.

[2]黃麗，楊敏，莫曦明，等.有機(jī)改進(jìn)劑用于離子色譜法測(cè)定水中、SCN-、ClO-4的研究[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2006，16（4）：413 ～ 415.■