• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    黃芪甲苷對(duì)甲基苯丙胺依賴大鼠腦組織中NO、SOD和MDA的影響

    2014-10-23 10:20:52隋璐劉坤沈薇趙春瑩李新新
    中國(guó)當(dāng)代醫(yī)藥 2014年26期
    關(guān)鍵詞:超氧化物歧化酶甲基苯丙胺丙二醛

    隋璐+劉坤+沈薇+趙春瑩+李新新

    [摘要] 目的 探討黃芪甲苷對(duì)甲基苯丙胺慢性染毒大鼠腦組織損傷的干預(yù)與保護(hù)作用。 方法 建立甲基苯丙胺(MA)慢性染毒大鼠實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型,灌胃給予不同劑量的黃芪甲苷(10 mg/kg,20 mg/kg),觀察各組大鼠腦組織海馬區(qū)和紋狀體區(qū)一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量的變化及相互關(guān)系。 結(jié)果 MA慢性染毒組腦組織海馬區(qū)NO、MDA含量顯著升高,SOD活力下降,與對(duì)照組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);黃芪甲苷大劑量組(20 mg/kg)與MA模型組相比,腦組織海馬區(qū)NO、MDA含量降低,SOD活力升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。 結(jié)論 黃芪甲苷能夠降低MA慢性染毒大鼠腦組織海馬區(qū)NO、MDA含量,升高SOD活力,并通過(guò)抗氧化作用對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的損傷有一定的干預(yù)與保護(hù)作用。

    [關(guān)鍵詞] 甲基苯丙胺;黃芪甲苷;一氧化氮;超氧化物歧化酶;丙二醛

    [中圖分類號(hào)] R965 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721(2014)09(b)-0016-03

    Influence of astragaloside Ⅳon NO,SOD and MDA in methamphetamine-dependence rat brain

    SUI Lu1 LIU Kun1 SHEN Wei1 ZHAO Chun-ying1 LI Xin-xin2

    1.College of Basic Medicine,Shenyang Medical College,Shenyang 110034,China;2.Forensic of Shenyang Medical College,Shenyang 110034,China

    [Abstract] Objective To explore the intervention and protective effects of astragaloside Ⅳ on brain tissue in chronic methamphetamine dependent rat model. Methods The chronic methamphetamine dependent rat model was established by intragastric administration of astragasloside Ⅳ.NO,MDA content and SOD activity in hippocampus were detected in different groups. Results In chronic methamphephetamine group,the expression level of NO and MDA was increased,SOD activity was decreased,compared with the control group,there was statistically significance(P<0.01).In astragaloside Ⅳ high dose group(20 mg/kg),the content level of MDA was decreased and SOD activity was increased,there was statistically significance,compared with chronic methamphephetamine group(P<0.01). Conclusion Astragaloside Ⅳ can reduce the NO and MDA content in the hippocampus MA chronic infected rats,increases SOD activity.On the central nervous system damage,Astragaloside Ⅳ has a certain role in the intervention and protection by antioxidant function,and has protective effect on brain tissue.

    [Key words] Methamphetamine;Astragaloside Ⅳ;Nitric oxide;Superoxide dimutase;Malondialdehyde

    甲基苯丙胺 (methamphetamine,MA)屬于一種苯丙胺類中樞興奮劑,可以興奮中樞神經(jīng)系統(tǒng),誘導(dǎo)產(chǎn)生興奮感和欣快感。目前濫用勢(shì)頭增長(zhǎng)迅猛。MA的中毒機(jī)制、精神依賴性以及治療藥物的研發(fā)是當(dāng)前研究的熱點(diǎn)[1]。MA能造成神經(jīng)毒性,引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)化學(xué)、神經(jīng)病理和行為的改變。大量實(shí)驗(yàn)研究表明,MA染毒可引起動(dòng)物及人類5-羥色胺系統(tǒng)或中樞邊緣多巴胺系統(tǒng)的損傷[2]。黃芪甲苷可通過(guò)抗自由基及抑制細(xì)胞凋亡對(duì)腦組織有保護(hù)作用。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立MA慢性染毒動(dòng)物模型,觀察在黃芪甲苷干預(yù)下大鼠腦組織中一氧化氮(nitric oxide,NO)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量變化及相互關(guān)系,為進(jìn)一步研究MA藥物中毒機(jī)制、藥物控制及治療效果提供可靠的理論基礎(chǔ)。

    1 材料與方法

    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

    健康Wistar大鼠(沈醫(yī)動(dòng)物質(zhì)量合格證號(hào):0008180)80只,體重190~220 g,雌雄各半,購(gòu)自沈陽(yáng)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心,許可證號(hào)為SCXK(遼2010-0001)。

    1.2 藥品與試劑

    甲基苯丙胺(純度70%),由丹東市公安局提供;黃芪甲苷(純度98%)購(gòu)于成都康邦生物科技有限公司(批號(hào):120802);NO檢測(cè)試劑盒(批號(hào):2011 0709)、MDA檢測(cè)試劑盒(批號(hào):20111208)和SOD檢測(cè)試劑盒(批號(hào):20110818)均購(gòu)于南京建成生物工程研究所;其余試劑為國(guó)產(chǎn)分析純?cè)噭?,?yán)格按照說(shuō)明書操作。

    1.3 動(dòng)物分組、給藥與模型的建立[3]

    取Wistar大鼠40只,體重190~220 g,隨機(jī)分為4組:空白對(duì)照組(每日腹腔注射生理鹽水)、MA依賴組、黃芪甲苷小劑量組(10 mg/kg)、黃芪甲苷大劑量組(20 mg/kg)。參照文獻(xiàn)方法[2],MA依賴組采用逐日劑量遞增法腹腔注射給藥,按照0.5、1、2、8、10、15 和20 mg/kg 的劑量逐日遞增,2次/d(8:00,20:00),從第8天開始按照維持20 mg/kg 的劑量制造MA慢性染毒大鼠動(dòng)物模型。黃芪甲苷劑量組在逐日劑量遞增造模的基礎(chǔ)上,灌胃給予不同劑量的黃芪甲苷,1次/d,用以干預(yù)性治療;連續(xù)14 d用藥結(jié)束后,斷頭處死大鼠,快速開顱取腦,按文獻(xiàn)法將所取腦組織冰上分離海馬區(qū),用以制備腦組織勻漿。

    1.4 腦組織海馬區(qū)NO、MDA和SOD含量的測(cè)定

    采用購(gòu)自南京建成生物工程研究所的試劑盒,NO含量的測(cè)定采用硝酸還原酶法測(cè)定其代謝產(chǎn)物;MDA含量的測(cè)定采用硫代巴比妥法;SOD活力的測(cè)定采用亞硝酸鹽顯色法。其中大鼠腦組織中NO和MDA含量的測(cè)定,是將大鼠腦組織制成10%的勻漿;大鼠腦中SOD活力的測(cè)定,是將大鼠腦組織制成1%的勻漿。

    1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

    采用SPSS 15.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理,計(jì)量資料用x±s表示,采用t檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 不同組別大鼠腦組織海馬區(qū)NO含量的比較

    MA模型組與黃芪甲苷小劑量組腦組織海馬區(qū)NO含量升高,與鹽水對(duì)照組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);黃芪甲苷大劑量組腦組織海馬區(qū)NO含量顯著下降,與MA模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),與鹽水對(duì)照組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(表1)。

    表1 不同組別大鼠腦組織海馬區(qū)NO含量的比較(x±s)

    與鹽水對(duì)照組比較,*P<0.01;與模型組比較,#P<0.01

    2.2 不同組別大鼠腦組織海馬區(qū)SOD和MDA含量的比較

    MA模型組與黃芪甲苷小劑量組腦組織海馬區(qū)MDA含量上升,SOD含量下降,與鹽水對(duì)照組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);黃芪甲苷大劑量組腦組織海馬區(qū)MDA含量升高較少,SOD活性下降,與鹽水對(duì)照組水平相近,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),與MA模型組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)(表2)。

    表2 不同組別大鼠腦組織海馬區(qū)SOD和MDA的含量比較(x±s)

    與鹽水對(duì)照組比較,*P<0.01;與模型組比較,#P<0.01

    3 討論

    NO是一種氣體自由基分子,由一氧化氮合酶催化L-精氨酸生成。過(guò)量的NO具有神經(jīng)毒性,可與其它的氧化物發(fā)生反應(yīng),生成有活性的氧氮化物,從而發(fā)揮復(fù)雜的作用,其中最常見(jiàn)的就是過(guò)氧亞硝酸酯。過(guò)氧亞硝酸酯的產(chǎn)物沒(méi)有氧化作用,卻具有硝基化的功能,可進(jìn)一步引起DNA斷裂、蛋白質(zhì)脂質(zhì)氧化、核苷酸修飾和硝基化作用而導(dǎo)致細(xì)胞死亡[4]。體內(nèi)NO含量升高可直接或間接地參與組織細(xì)胞的損傷,導(dǎo)致細(xì)胞功能紊亂,使機(jī)體的免疫功能降低。

    機(jī)體內(nèi)存在著氧化和抗氧化系統(tǒng),正常時(shí)保持動(dòng)態(tài)平衡。病理?xiàng)l件下,該系統(tǒng)失衡將導(dǎo)致大量自由基在體內(nèi)堆積,自由基攻擊生物膜中的多聚不飽和脂肪酸可引發(fā)脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng),MDA是氧化反應(yīng)后的終末產(chǎn)物,可作為氧化反應(yīng)后的標(biāo)志物,MDA可反映機(jī)體脂質(zhì)過(guò)氧化的速率及強(qiáng)度,是體內(nèi)氧自由基代謝的重要指標(biāo)[5-6]。SOD是存在于生物體內(nèi)清除氧自由基的重要抗氧化酶,其功能是催化·O2-的歧化反應(yīng),即將·O2-歧化為過(guò)氧化氫和氧氣,從而降低機(jī)體的過(guò)氧化反應(yīng),對(duì)機(jī)體起到保護(hù)作用,維持機(jī)體氧化與抗氧化的平衡[7-9]。

    本研究結(jié)果顯示,與對(duì)照組比較,MA模型組大鼠腦中海馬區(qū)NO和MDA含量增加,SOD活力降低,提示給予MA后,大鼠腦組織細(xì)胞抗氧化能力減弱,脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)升高,可見(jiàn)MA對(duì)大鼠腦細(xì)胞損傷較大。黃芪甲苷可能降低了大鼠腦組織中NO和MDA的含量,提高了SOD活力,從而減輕MA對(duì)抗氧化系統(tǒng)的損害,對(duì)MA慢性染毒組大鼠腦組織有一定的保護(hù)作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示大劑量的黃芪甲苷(20 mg/kg)可顯著降低大鼠腦組織中NO和MDA含量,提高SOD活力,與MA模型組相比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。黃芪甲苷是黃芪的主要活性成分,近年來(lái)對(duì)黃芪甲苷藥理作用的研究顯示,其對(duì)腦組織有保護(hù)作用[10-13],周軍等[11]深入研究了黃芪甲苷對(duì)小鼠瞬間局灶性缺血所致的大腦損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制,推測(cè)其機(jī)制可能與抗自由基及抑制細(xì)胞凋亡有關(guān)。而本實(shí)驗(yàn)也提示,超氧化物參與了MA的神經(jīng)細(xì)胞毒性作用。當(dāng)MA劑量達(dá)到一定水平時(shí),能引起大鼠腦組織的脂質(zhì)過(guò)氧化,這可能是MA引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷的重要機(jī)制,而黃芪甲苷可以下調(diào)脂質(zhì)過(guò)氧化水平,能調(diào)節(jié)因MA導(dǎo)致的腦組織過(guò)氧化平衡失調(diào),對(duì)腦組織細(xì)胞發(fā)揮保護(hù)作用,這為進(jìn)一步深入研究MA中毒機(jī)制及治療干預(yù)提供了一定的實(shí)驗(yàn)室材料和理論基礎(chǔ)。

    [參考文獻(xiàn)]

    [1] 梁若冰,趙艷明,趙秀麗.苯丙胺類精神活性物質(zhì)依賴機(jī)制的研究進(jìn)展[J].中國(guó)藥物依賴性雜志,2009,18(6):452-456.

    [2] 李新新,楊秀麗,陳曉雷,等.Caspase-3抑制藥對(duì)甲基苯丙胺依賴大鼠腦組織中NO和SOD及MDA的影響[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2014,33(4):426-428.

    [3] 張麗華,張東,宣志恒,等.建立大鼠甲基苯丙胺的神經(jīng)精神毒性模型[J].中國(guó)藥物依賴性雜志,2013,22(2):95-97,106.

    [4] 陳漢,鄭世賢,席芳,等.煙酰胺對(duì)甲基苯丙胺注射后大鼠腦組織中SOD、NO和MDA表達(dá)的影響[J].西北國(guó)防醫(yī)學(xué)雜志,2009,30(6):435-437.

    [5] 周峰.煙酰胺對(duì)甲基苯丙胺注射后小鼠腦組織中脂質(zhì)過(guò)氧化的影響[J].江蘇醫(yī)藥,2014,40(1):13-15.

    [6] 高偉敏,任今今,楊永濱,等.清熱止瀉方治療急性放射性腸炎的作用機(jī)制[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2013,32(7):878-881.

    [7] 張歆薇,劉海強(qiáng),徐勝龍,等.次聲作用對(duì)大鼠血漿SOD、MDA、NO水平的影響[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2012,12(18):3416-3419.

    [8] 楊健,劉曉偉,彭樹靈,等.維胃方對(duì)實(shí)驗(yàn)性胃潰瘍大鼠血清超氧化物歧化酶活力及丙二醛含量的影響[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2011,22(8):1837-1839.

    [9] 高健,曲曉峰,劉洋,等.川芎生物堿對(duì)腦缺血-再灌注大鼠SOD、MDA、神經(jīng)功能及腦梗死容積的影響[J].中國(guó)老年學(xué)雜志,2009,29(1):22-24.

    [10] 段立軍,孫博航.黃芪甲苷的研究進(jìn)展[J].沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào),2011,28(5):410-416.

    [11] 周軍,劉軍.黃芪甲甙對(duì)大鼠局灶性腦缺血的保護(hù)作用及機(jī)制研究[J].醫(yī)學(xué)臨床研究,2008,25(5):814-816.

    [12] 李亮,陳立峰.中藥對(duì)腦缺血再灌注損傷保護(hù)作用的研究進(jìn)展[J].中南藥學(xué),2012,10(6):459-462.

    [13] 楊永飛,黃文東,朱邦豪.丹參素配伍川芎嗪對(duì)大鼠局灶性腦缺血的保護(hù)作用[J].中南藥學(xué),2013,11(7):488-491.

    (收稿日期:2014-06-23 本文編輯:祁海文)

    1.3 動(dòng)物分組、給藥與模型的建立[3]

    取Wistar大鼠40只,體重190~220 g,隨機(jī)分為4組:空白對(duì)照組(每日腹腔注射生理鹽水)、MA依賴組、黃芪甲苷小劑量組(10 mg/kg)、黃芪甲苷大劑量組(20 mg/kg)。參照文獻(xiàn)方法[2],MA依賴組采用逐日劑量遞增法腹腔注射給藥,按照0.5、1、2、8、10、15 和20 mg/kg 的劑量逐日遞增,2次/d(8:00,20:00),從第8天開始按照維持20 mg/kg 的劑量制造MA慢性染毒大鼠動(dòng)物模型。黃芪甲苷劑量組在逐日劑量遞增造模的基礎(chǔ)上,灌胃給予不同劑量的黃芪甲苷,1次/d,用以干預(yù)性治療;連續(xù)14 d用藥結(jié)束后,斷頭處死大鼠,快速開顱取腦,按文獻(xiàn)法將所取腦組織冰上分離海馬區(qū),用以制備腦組織勻漿。

    1.4 腦組織海馬區(qū)NO、MDA和SOD含量的測(cè)定

    采用購(gòu)自南京建成生物工程研究所的試劑盒,NO含量的測(cè)定采用硝酸還原酶法測(cè)定其代謝產(chǎn)物;MDA含量的測(cè)定采用硫代巴比妥法;SOD活力的測(cè)定采用亞硝酸鹽顯色法。其中大鼠腦組織中NO和MDA含量的測(cè)定,是將大鼠腦組織制成10%的勻漿;大鼠腦中SOD活力的測(cè)定,是將大鼠腦組織制成1%的勻漿。

    1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

    采用SPSS 15.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理,計(jì)量資料用x±s表示,采用t檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 不同組別大鼠腦組織海馬區(qū)NO含量的比較

    MA模型組與黃芪甲苷小劑量組腦組織海馬區(qū)NO含量升高,與鹽水對(duì)照組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);黃芪甲苷大劑量組腦組織海馬區(qū)NO含量顯著下降,與MA模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),與鹽水對(duì)照組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(表1)。

    表1 不同組別大鼠腦組織海馬區(qū)NO含量的比較(x±s)

    與鹽水對(duì)照組比較,*P<0.01;與模型組比較,#P<0.01

    2.2 不同組別大鼠腦組織海馬區(qū)SOD和MDA含量的比較

    MA模型組與黃芪甲苷小劑量組腦組織海馬區(qū)MDA含量上升,SOD含量下降,與鹽水對(duì)照組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);黃芪甲苷大劑量組腦組織海馬區(qū)MDA含量升高較少,SOD活性下降,與鹽水對(duì)照組水平相近,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),與MA模型組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)(表2)。

    表2 不同組別大鼠腦組織海馬區(qū)SOD和MDA的含量比較(x±s)

    與鹽水對(duì)照組比較,*P<0.01;與模型組比較,#P<0.01

    3 討論

    NO是一種氣體自由基分子,由一氧化氮合酶催化L-精氨酸生成。過(guò)量的NO具有神經(jīng)毒性,可與其它的氧化物發(fā)生反應(yīng),生成有活性的氧氮化物,從而發(fā)揮復(fù)雜的作用,其中最常見(jiàn)的就是過(guò)氧亞硝酸酯。過(guò)氧亞硝酸酯的產(chǎn)物沒(méi)有氧化作用,卻具有硝基化的功能,可進(jìn)一步引起DNA斷裂、蛋白質(zhì)脂質(zhì)氧化、核苷酸修飾和硝基化作用而導(dǎo)致細(xì)胞死亡[4]。體內(nèi)NO含量升高可直接或間接地參與組織細(xì)胞的損傷,導(dǎo)致細(xì)胞功能紊亂,使機(jī)體的免疫功能降低。

    機(jī)體內(nèi)存在著氧化和抗氧化系統(tǒng),正常時(shí)保持動(dòng)態(tài)平衡。病理?xiàng)l件下,該系統(tǒng)失衡將導(dǎo)致大量自由基在體內(nèi)堆積,自由基攻擊生物膜中的多聚不飽和脂肪酸可引發(fā)脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng),MDA是氧化反應(yīng)后的終末產(chǎn)物,可作為氧化反應(yīng)后的標(biāo)志物,MDA可反映機(jī)體脂質(zhì)過(guò)氧化的速率及強(qiáng)度,是體內(nèi)氧自由基代謝的重要指標(biāo)[5-6]。SOD是存在于生物體內(nèi)清除氧自由基的重要抗氧化酶,其功能是催化·O2-的歧化反應(yīng),即將·O2-歧化為過(guò)氧化氫和氧氣,從而降低機(jī)體的過(guò)氧化反應(yīng),對(duì)機(jī)體起到保護(hù)作用,維持機(jī)體氧化與抗氧化的平衡[7-9]。

    本研究結(jié)果顯示,與對(duì)照組比較,MA模型組大鼠腦中海馬區(qū)NO和MDA含量增加,SOD活力降低,提示給予MA后,大鼠腦組織細(xì)胞抗氧化能力減弱,脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)升高,可見(jiàn)MA對(duì)大鼠腦細(xì)胞損傷較大。黃芪甲苷可能降低了大鼠腦組織中NO和MDA的含量,提高了SOD活力,從而減輕MA對(duì)抗氧化系統(tǒng)的損害,對(duì)MA慢性染毒組大鼠腦組織有一定的保護(hù)作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示大劑量的黃芪甲苷(20 mg/kg)可顯著降低大鼠腦組織中NO和MDA含量,提高SOD活力,與MA模型組相比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。黃芪甲苷是黃芪的主要活性成分,近年來(lái)對(duì)黃芪甲苷藥理作用的研究顯示,其對(duì)腦組織有保護(hù)作用[10-13],周軍等[11]深入研究了黃芪甲苷對(duì)小鼠瞬間局灶性缺血所致的大腦損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制,推測(cè)其機(jī)制可能與抗自由基及抑制細(xì)胞凋亡有關(guān)。而本實(shí)驗(yàn)也提示,超氧化物參與了MA的神經(jīng)細(xì)胞毒性作用。當(dāng)MA劑量達(dá)到一定水平時(shí),能引起大鼠腦組織的脂質(zhì)過(guò)氧化,這可能是MA引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷的重要機(jī)制,而黃芪甲苷可以下調(diào)脂質(zhì)過(guò)氧化水平,能調(diào)節(jié)因MA導(dǎo)致的腦組織過(guò)氧化平衡失調(diào),對(duì)腦組織細(xì)胞發(fā)揮保護(hù)作用,這為進(jìn)一步深入研究MA中毒機(jī)制及治療干預(yù)提供了一定的實(shí)驗(yàn)室材料和理論基礎(chǔ)。

    [參考文獻(xiàn)]

    [1] 梁若冰,趙艷明,趙秀麗.苯丙胺類精神活性物質(zhì)依賴機(jī)制的研究進(jìn)展[J].中國(guó)藥物依賴性雜志,2009,18(6):452-456.

    [2] 李新新,楊秀麗,陳曉雷,等.Caspase-3抑制藥對(duì)甲基苯丙胺依賴大鼠腦組織中NO和SOD及MDA的影響[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2014,33(4):426-428.

    [3] 張麗華,張東,宣志恒,等.建立大鼠甲基苯丙胺的神經(jīng)精神毒性模型[J].中國(guó)藥物依賴性雜志,2013,22(2):95-97,106.

    [4] 陳漢,鄭世賢,席芳,等.煙酰胺對(duì)甲基苯丙胺注射后大鼠腦組織中SOD、NO和MDA表達(dá)的影響[J].西北國(guó)防醫(yī)學(xué)雜志,2009,30(6):435-437.

    [5] 周峰.煙酰胺對(duì)甲基苯丙胺注射后小鼠腦組織中脂質(zhì)過(guò)氧化的影響[J].江蘇醫(yī)藥,2014,40(1):13-15.

    [6] 高偉敏,任今今,楊永濱,等.清熱止瀉方治療急性放射性腸炎的作用機(jī)制[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2013,32(7):878-881.

    [7] 張歆薇,劉海強(qiáng),徐勝龍,等.次聲作用對(duì)大鼠血漿SOD、MDA、NO水平的影響[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2012,12(18):3416-3419.

    [8] 楊健,劉曉偉,彭樹靈,等.維胃方對(duì)實(shí)驗(yàn)性胃潰瘍大鼠血清超氧化物歧化酶活力及丙二醛含量的影響[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2011,22(8):1837-1839.

    [9] 高健,曲曉峰,劉洋,等.川芎生物堿對(duì)腦缺血-再灌注大鼠SOD、MDA、神經(jīng)功能及腦梗死容積的影響[J].中國(guó)老年學(xué)雜志,2009,29(1):22-24.

    [10] 段立軍,孫博航.黃芪甲苷的研究進(jìn)展[J].沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào),2011,28(5):410-416.

    [11] 周軍,劉軍.黃芪甲甙對(duì)大鼠局灶性腦缺血的保護(hù)作用及機(jī)制研究[J].醫(yī)學(xué)臨床研究,2008,25(5):814-816.

    [12] 李亮,陳立峰.中藥對(duì)腦缺血再灌注損傷保護(hù)作用的研究進(jìn)展[J].中南藥學(xué),2012,10(6):459-462.

    [13] 楊永飛,黃文東,朱邦豪.丹參素配伍川芎嗪對(duì)大鼠局灶性腦缺血的保護(hù)作用[J].中南藥學(xué),2013,11(7):488-491.

    (收稿日期:2014-06-23 本文編輯:祁海文)

    1.3 動(dòng)物分組、給藥與模型的建立[3]

    取Wistar大鼠40只,體重190~220 g,隨機(jī)分為4組:空白對(duì)照組(每日腹腔注射生理鹽水)、MA依賴組、黃芪甲苷小劑量組(10 mg/kg)、黃芪甲苷大劑量組(20 mg/kg)。參照文獻(xiàn)方法[2],MA依賴組采用逐日劑量遞增法腹腔注射給藥,按照0.5、1、2、8、10、15 和20 mg/kg 的劑量逐日遞增,2次/d(8:00,20:00),從第8天開始按照維持20 mg/kg 的劑量制造MA慢性染毒大鼠動(dòng)物模型。黃芪甲苷劑量組在逐日劑量遞增造模的基礎(chǔ)上,灌胃給予不同劑量的黃芪甲苷,1次/d,用以干預(yù)性治療;連續(xù)14 d用藥結(jié)束后,斷頭處死大鼠,快速開顱取腦,按文獻(xiàn)法將所取腦組織冰上分離海馬區(qū),用以制備腦組織勻漿。

    1.4 腦組織海馬區(qū)NO、MDA和SOD含量的測(cè)定

    采用購(gòu)自南京建成生物工程研究所的試劑盒,NO含量的測(cè)定采用硝酸還原酶法測(cè)定其代謝產(chǎn)物;MDA含量的測(cè)定采用硫代巴比妥法;SOD活力的測(cè)定采用亞硝酸鹽顯色法。其中大鼠腦組織中NO和MDA含量的測(cè)定,是將大鼠腦組織制成10%的勻漿;大鼠腦中SOD活力的測(cè)定,是將大鼠腦組織制成1%的勻漿。

    1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

    采用SPSS 15.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理,計(jì)量資料用x±s表示,采用t檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 不同組別大鼠腦組織海馬區(qū)NO含量的比較

    MA模型組與黃芪甲苷小劑量組腦組織海馬區(qū)NO含量升高,與鹽水對(duì)照組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);黃芪甲苷大劑量組腦組織海馬區(qū)NO含量顯著下降,與MA模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),與鹽水對(duì)照組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(表1)。

    表1 不同組別大鼠腦組織海馬區(qū)NO含量的比較(x±s)

    與鹽水對(duì)照組比較,*P<0.01;與模型組比較,#P<0.01

    2.2 不同組別大鼠腦組織海馬區(qū)SOD和MDA含量的比較

    MA模型組與黃芪甲苷小劑量組腦組織海馬區(qū)MDA含量上升,SOD含量下降,與鹽水對(duì)照組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);黃芪甲苷大劑量組腦組織海馬區(qū)MDA含量升高較少,SOD活性下降,與鹽水對(duì)照組水平相近,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),與MA模型組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)(表2)。

    表2 不同組別大鼠腦組織海馬區(qū)SOD和MDA的含量比較(x±s)

    與鹽水對(duì)照組比較,*P<0.01;與模型組比較,#P<0.01

    3 討論

    NO是一種氣體自由基分子,由一氧化氮合酶催化L-精氨酸生成。過(guò)量的NO具有神經(jīng)毒性,可與其它的氧化物發(fā)生反應(yīng),生成有活性的氧氮化物,從而發(fā)揮復(fù)雜的作用,其中最常見(jiàn)的就是過(guò)氧亞硝酸酯。過(guò)氧亞硝酸酯的產(chǎn)物沒(méi)有氧化作用,卻具有硝基化的功能,可進(jìn)一步引起DNA斷裂、蛋白質(zhì)脂質(zhì)氧化、核苷酸修飾和硝基化作用而導(dǎo)致細(xì)胞死亡[4]。體內(nèi)NO含量升高可直接或間接地參與組織細(xì)胞的損傷,導(dǎo)致細(xì)胞功能紊亂,使機(jī)體的免疫功能降低。

    機(jī)體內(nèi)存在著氧化和抗氧化系統(tǒng),正常時(shí)保持動(dòng)態(tài)平衡。病理?xiàng)l件下,該系統(tǒng)失衡將導(dǎo)致大量自由基在體內(nèi)堆積,自由基攻擊生物膜中的多聚不飽和脂肪酸可引發(fā)脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng),MDA是氧化反應(yīng)后的終末產(chǎn)物,可作為氧化反應(yīng)后的標(biāo)志物,MDA可反映機(jī)體脂質(zhì)過(guò)氧化的速率及強(qiáng)度,是體內(nèi)氧自由基代謝的重要指標(biāo)[5-6]。SOD是存在于生物體內(nèi)清除氧自由基的重要抗氧化酶,其功能是催化·O2-的歧化反應(yīng),即將·O2-歧化為過(guò)氧化氫和氧氣,從而降低機(jī)體的過(guò)氧化反應(yīng),對(duì)機(jī)體起到保護(hù)作用,維持機(jī)體氧化與抗氧化的平衡[7-9]。

    本研究結(jié)果顯示,與對(duì)照組比較,MA模型組大鼠腦中海馬區(qū)NO和MDA含量增加,SOD活力降低,提示給予MA后,大鼠腦組織細(xì)胞抗氧化能力減弱,脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)升高,可見(jiàn)MA對(duì)大鼠腦細(xì)胞損傷較大。黃芪甲苷可能降低了大鼠腦組織中NO和MDA的含量,提高了SOD活力,從而減輕MA對(duì)抗氧化系統(tǒng)的損害,對(duì)MA慢性染毒組大鼠腦組織有一定的保護(hù)作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示大劑量的黃芪甲苷(20 mg/kg)可顯著降低大鼠腦組織中NO和MDA含量,提高SOD活力,與MA模型組相比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。黃芪甲苷是黃芪的主要活性成分,近年來(lái)對(duì)黃芪甲苷藥理作用的研究顯示,其對(duì)腦組織有保護(hù)作用[10-13],周軍等[11]深入研究了黃芪甲苷對(duì)小鼠瞬間局灶性缺血所致的大腦損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制,推測(cè)其機(jī)制可能與抗自由基及抑制細(xì)胞凋亡有關(guān)。而本實(shí)驗(yàn)也提示,超氧化物參與了MA的神經(jīng)細(xì)胞毒性作用。當(dāng)MA劑量達(dá)到一定水平時(shí),能引起大鼠腦組織的脂質(zhì)過(guò)氧化,這可能是MA引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷的重要機(jī)制,而黃芪甲苷可以下調(diào)脂質(zhì)過(guò)氧化水平,能調(diào)節(jié)因MA導(dǎo)致的腦組織過(guò)氧化平衡失調(diào),對(duì)腦組織細(xì)胞發(fā)揮保護(hù)作用,這為進(jìn)一步深入研究MA中毒機(jī)制及治療干預(yù)提供了一定的實(shí)驗(yàn)室材料和理論基礎(chǔ)。

    [參考文獻(xiàn)]

    [1] 梁若冰,趙艷明,趙秀麗.苯丙胺類精神活性物質(zhì)依賴機(jī)制的研究進(jìn)展[J].中國(guó)藥物依賴性雜志,2009,18(6):452-456.

    [2] 李新新,楊秀麗,陳曉雷,等.Caspase-3抑制藥對(duì)甲基苯丙胺依賴大鼠腦組織中NO和SOD及MDA的影響[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2014,33(4):426-428.

    [3] 張麗華,張東,宣志恒,等.建立大鼠甲基苯丙胺的神經(jīng)精神毒性模型[J].中國(guó)藥物依賴性雜志,2013,22(2):95-97,106.

    [4] 陳漢,鄭世賢,席芳,等.煙酰胺對(duì)甲基苯丙胺注射后大鼠腦組織中SOD、NO和MDA表達(dá)的影響[J].西北國(guó)防醫(yī)學(xué)雜志,2009,30(6):435-437.

    [5] 周峰.煙酰胺對(duì)甲基苯丙胺注射后小鼠腦組織中脂質(zhì)過(guò)氧化的影響[J].江蘇醫(yī)藥,2014,40(1):13-15.

    [6] 高偉敏,任今今,楊永濱,等.清熱止瀉方治療急性放射性腸炎的作用機(jī)制[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2013,32(7):878-881.

    [7] 張歆薇,劉海強(qiáng),徐勝龍,等.次聲作用對(duì)大鼠血漿SOD、MDA、NO水平的影響[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2012,12(18):3416-3419.

    [8] 楊健,劉曉偉,彭樹靈,等.維胃方對(duì)實(shí)驗(yàn)性胃潰瘍大鼠血清超氧化物歧化酶活力及丙二醛含量的影響[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2011,22(8):1837-1839.

    [9] 高健,曲曉峰,劉洋,等.川芎生物堿對(duì)腦缺血-再灌注大鼠SOD、MDA、神經(jīng)功能及腦梗死容積的影響[J].中國(guó)老年學(xué)雜志,2009,29(1):22-24.

    [10] 段立軍,孫博航.黃芪甲苷的研究進(jìn)展[J].沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào),2011,28(5):410-416.

    [11] 周軍,劉軍.黃芪甲甙對(duì)大鼠局灶性腦缺血的保護(hù)作用及機(jī)制研究[J].醫(yī)學(xué)臨床研究,2008,25(5):814-816.

    [12] 李亮,陳立峰.中藥對(duì)腦缺血再灌注損傷保護(hù)作用的研究進(jìn)展[J].中南藥學(xué),2012,10(6):459-462.

    [13] 楊永飛,黃文東,朱邦豪.丹參素配伍川芎嗪對(duì)大鼠局灶性腦缺血的保護(hù)作用[J].中南藥學(xué),2013,11(7):488-491.

    (收稿日期:2014-06-23 本文編輯:祁海文)

    猜你喜歡
    超氧化物歧化酶甲基苯丙胺丙二醛
    甲基苯丙胺改變成癮小鼠突觸可塑性基因的甲基化修飾
    甲基苯丙胺神經(jīng)毒性作用及機(jī)制的研究進(jìn)展
    甲基苯丙胺對(duì)大鼠心臟血管通透性的影響初探
    不同施肥對(duì)岷山紅三葉中丙二醛(MDA)含量的影響
    利培酮和氯氮平對(duì)精神分裂癥患者PRL和SOD的影響探討
    白花敗醬草乙醇提取物對(duì)小鼠抗氧化作用的影響
    婦科腹腔鏡手術(shù)不同氣腹壓力時(shí)超氧化物歧化酶、TNF—α的動(dòng)態(tài)變化及意義
    精喹禾靈對(duì)板藍(lán)根SOD、POD酶活性的影響
    丙二醛對(duì)離體草魚腸道黏膜細(xì)胞的損傷作用
    z-DEVD-fmk對(duì)甲基苯丙胺依賴大鼠腦海馬組織caspase-3活性及其蛋白表達(dá)的影響
    精品酒店卫生间| videosex国产| 亚洲图色成人| 中文字幕最新亚洲高清| 午夜福利视频精品| 久久久久久久精品精品| 人人澡人人妻人| 国精品久久久久久国模美| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 黄色配什么色好看| 亚洲精品国产色婷婷电影| 99热国产这里只有精品6| 99热国产这里只有精品6| 亚洲国产av新网站| 女人精品久久久久毛片| 婷婷色综合大香蕉| 极品人妻少妇av视频| 女人精品久久久久毛片| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 国产精品人妻久久久影院| 亚洲精品色激情综合| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 看非洲黑人一级黄片| 99九九线精品视频在线观看视频| 免费日韩欧美在线观看| 美女中出高潮动态图| 制服丝袜香蕉在线| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 亚洲精华国产精华液的使用体验| 男女免费视频国产| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 韩国av在线不卡| 日韩电影二区| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 男女国产视频网站| 久久精品久久久久久久性| 97超碰精品成人国产| 大香蕉久久成人网| 久久青草综合色| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 国产在线免费精品| 亚洲av男天堂| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 高清在线视频一区二区三区| 久久人妻熟女aⅴ| 最近最新中文字幕免费大全7| 亚洲,一卡二卡三卡| 亚洲精品中文字幕在线视频| www.av在线官网国产| 91aial.com中文字幕在线观看| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 国产成人av激情在线播放 | 亚洲人成77777在线视频| 国产一区二区三区av在线| 99热网站在线观看| 免费高清在线观看视频在线观看| 免费黄频网站在线观看国产| 亚洲精品久久成人aⅴ小说 | 亚洲精品,欧美精品| 日韩强制内射视频| 超碰97精品在线观看| 麻豆成人av视频| 国产一区二区三区av在线| 久久青草综合色| 中文字幕亚洲精品专区| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 国产 精品1| av女优亚洲男人天堂| 国产成人a∨麻豆精品| 男人爽女人下面视频在线观看| 日韩强制内射视频| 国产成人a∨麻豆精品| 色婷婷久久久亚洲欧美| 日韩亚洲欧美综合| 狂野欧美激情性bbbbbb| 国产一级毛片在线| 十八禁高潮呻吟视频| 热99久久久久精品小说推荐| 99精国产麻豆久久婷婷| 如日韩欧美国产精品一区二区三区 | 伦精品一区二区三区| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 国产成人freesex在线| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 国产av码专区亚洲av| 久久99精品国语久久久| 国产精品成人在线| 久久久久视频综合| 国产视频首页在线观看| 日本av手机在线免费观看| 国产在视频线精品| 少妇熟女欧美另类| 国产日韩欧美视频二区| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 青春草视频在线免费观看| 欧美xxⅹ黑人| 亚洲国产精品一区三区| 99热这里只有是精品在线观看| 久久久久久人妻| 一级毛片aaaaaa免费看小| 一本一本久久a久久精品综合妖精 国产伦在线观看视频一区 | 成人无遮挡网站| 亚洲不卡免费看| 99视频精品全部免费 在线| 精品午夜福利在线看| 男人爽女人下面视频在线观看| 日韩电影二区| 制服诱惑二区| 亚洲四区av| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 制服丝袜香蕉在线| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 欧美亚洲日本最大视频资源| av.在线天堂| 2018国产大陆天天弄谢| 久久精品国产亚洲网站| 97超碰精品成人国产| 交换朋友夫妻互换小说| 亚洲综合色惰| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 久久国产亚洲av麻豆专区| 午夜福利影视在线免费观看| 精品人妻熟女av久视频| 99热这里只有是精品在线观看| 香蕉精品网在线| 久久这里有精品视频免费| 女性生殖器流出的白浆| 十八禁网站网址无遮挡| 熟妇人妻不卡中文字幕| 久久久久国产网址| 蜜臀久久99精品久久宅男| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 国产精品久久久久成人av| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 国产精品人妻久久久久久| 免费高清在线观看日韩| 男女免费视频国产| 高清毛片免费看| 亚洲三级黄色毛片| 黄色配什么色好看| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 蜜臀久久99精品久久宅男| 少妇的逼好多水| 插阴视频在线观看视频| 欧美3d第一页| 91成人精品电影| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 999精品在线视频| 日韩视频在线欧美| 两个人的视频大全免费| 一二三四中文在线观看免费高清| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 国产探花极品一区二区| 五月玫瑰六月丁香| 久热久热在线精品观看| 天天操日日干夜夜撸| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 国产色爽女视频免费观看| 男的添女的下面高潮视频| 日韩成人av中文字幕在线观看| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 国产成人一区二区在线| 久久99一区二区三区| 亚洲精品日韩av片在线观看| 一级片'在线观看视频| 精品卡一卡二卡四卡免费| 午夜激情福利司机影院| 国产在线一区二区三区精| 国产精品99久久久久久久久| 日本免费在线观看一区| 七月丁香在线播放| 在线观看www视频免费| 久久女婷五月综合色啪小说| 欧美性感艳星| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 国产免费福利视频在线观看| 午夜免费鲁丝| 精品视频人人做人人爽| 亚洲av成人精品一二三区| 一本一本综合久久| 欧美激情极品国产一区二区三区 | 高清av免费在线| 亚洲精品中文字幕在线视频| 成人毛片a级毛片在线播放| 99九九线精品视频在线观看视频| 国产亚洲精品第一综合不卡 | 精品久久国产蜜桃| 国产一级毛片在线| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 黑人欧美特级aaaaaa片| 男人添女人高潮全过程视频| 亚洲国产av新网站| 国产视频内射| 日本黄大片高清| 黑人欧美特级aaaaaa片| 成年女人在线观看亚洲视频| 亚洲精品视频女| 女人精品久久久久毛片| 亚洲一区二区三区欧美精品| 十分钟在线观看高清视频www| 国产日韩一区二区三区精品不卡 | 另类精品久久| 在线精品无人区一区二区三| 成人国产麻豆网| 老司机亚洲免费影院| 一区二区日韩欧美中文字幕 | 亚洲国产日韩一区二区| 成人国产麻豆网| 中国国产av一级| 一本一本综合久久| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 一级a做视频免费观看| 久久久久久久大尺度免费视频| 国产有黄有色有爽视频| 一区二区三区四区激情视频| 亚洲精品一二三| 人人妻人人澡人人看| 黄色视频在线播放观看不卡| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 黄片播放在线免费| 亚洲丝袜综合中文字幕| 国产伦精品一区二区三区视频9| av不卡在线播放| 国产在线视频一区二区| 一级a做视频免费观看| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 人妻夜夜爽99麻豆av| 国产黄片视频在线免费观看| 日韩在线高清观看一区二区三区| 97超视频在线观看视频| 飞空精品影院首页| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 丝袜美足系列| 三上悠亚av全集在线观看| 蜜桃国产av成人99| 国产老妇伦熟女老妇高清| 亚洲图色成人| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 精品酒店卫生间| 亚洲天堂av无毛| 国产精品女同一区二区软件| 少妇熟女欧美另类| 久久久久久久久久成人| 国产一区二区在线观看av| 青春草国产在线视频| 插逼视频在线观看| 美女内射精品一级片tv| 亚洲精品美女久久av网站| 多毛熟女@视频| av黄色大香蕉| 亚洲av欧美aⅴ国产| 制服人妻中文乱码| 色婷婷av一区二区三区视频| 成人影院久久| 男人爽女人下面视频在线观看| 亚洲精品中文字幕在线视频| 中文字幕久久专区| 亚洲精品aⅴ在线观看| 777米奇影视久久| 丝袜脚勾引网站| videosex国产| 久久99热这里只频精品6学生| 丁香六月天网| 搡女人真爽免费视频火全软件| a级毛片黄视频| 亚洲av二区三区四区| 日韩强制内射视频| 精品久久久噜噜| 精品国产一区二区久久| 久久久久久久国产电影| 五月伊人婷婷丁香| 亚洲精品中文字幕在线视频| av播播在线观看一区| 春色校园在线视频观看| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 欧美性感艳星| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 国产片内射在线| 天天影视国产精品| 十分钟在线观看高清视频www| 免费看av在线观看网站| 免费人妻精品一区二区三区视频| 在线 av 中文字幕| av.在线天堂| 卡戴珊不雅视频在线播放| 久久亚洲国产成人精品v| 国产男人的电影天堂91| 天天影视国产精品| 亚洲美女黄色视频免费看| 免费观看的影片在线观看| 久久久久久久久久久免费av| 一二三四中文在线观看免费高清| 亚洲人成网站在线观看播放| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 久久精品国产亚洲av天美| 黄片无遮挡物在线观看| 欧美丝袜亚洲另类| 中文欧美无线码| 欧美xxxx性猛交bbbb| 久久99一区二区三区| 一区二区三区乱码不卡18| 亚洲中文av在线| 久久综合国产亚洲精品| 欧美激情 高清一区二区三区| 十分钟在线观看高清视频www| 欧美亚洲日本最大视频资源| 亚洲天堂av无毛| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 插逼视频在线观看| 日韩免费高清中文字幕av| 亚洲经典国产精华液单| 精品少妇内射三级| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图 | 亚洲av日韩在线播放| 久久午夜福利片| 岛国毛片在线播放| 91久久精品国产一区二区成人| 蜜桃在线观看..| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 亚洲国产精品国产精品| 亚洲国产av新网站| 97在线人人人人妻| 我的女老师完整版在线观看| 涩涩av久久男人的天堂| 亚洲伊人久久精品综合| 十八禁高潮呻吟视频| 搡女人真爽免费视频火全软件| 啦啦啦啦在线视频资源| 如日韩欧美国产精品一区二区三区 | 乱码一卡2卡4卡精品| 精品国产一区二区久久| 97在线人人人人妻| 女人精品久久久久毛片| 国产一区有黄有色的免费视频| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 韩国av在线不卡| 男女啪啪激烈高潮av片| 狂野欧美激情性bbbbbb| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 成年人午夜在线观看视频| 全区人妻精品视频| 国产精品久久久久成人av| 精品国产露脸久久av麻豆| 好男人视频免费观看在线| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 黄色怎么调成土黄色| 高清视频免费观看一区二区| 综合色丁香网| 欧美激情极品国产一区二区三区 | 麻豆乱淫一区二区| 国产极品天堂在线| 韩国高清视频一区二区三区| 亚洲熟女精品中文字幕| 如何舔出高潮| 最黄视频免费看| 久热久热在线精品观看| 国产国语露脸激情在线看| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 日韩精品有码人妻一区| 三上悠亚av全集在线观看| 国产一区二区在线观看日韩| 久久久久久人妻| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 国产精品久久久久久久久免| 观看av在线不卡| 香蕉精品网在线| 婷婷色综合大香蕉| 久久精品国产亚洲av天美| 日本wwww免费看| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃 | 大片免费播放器 马上看| 性高湖久久久久久久久免费观看| 一区二区三区四区激情视频| 国产精品一区二区在线观看99| 色视频在线一区二区三区| 国产探花极品一区二区| 卡戴珊不雅视频在线播放| 成人免费观看视频高清| 精品国产国语对白av| 女性生殖器流出的白浆| 国产视频首页在线观看| 美女视频免费永久观看网站| 国产一级毛片在线| 精品熟女少妇av免费看| 久久久久人妻精品一区果冻| 亚洲成人一二三区av| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 99九九在线精品视频| 18+在线观看网站| 99热国产这里只有精品6| 曰老女人黄片| 尾随美女入室| 亚洲av男天堂| 日本黄色片子视频| 国产av码专区亚洲av| 久久久久久久精品精品| 国产深夜福利视频在线观看| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 日日爽夜夜爽网站| 一级毛片aaaaaa免费看小| 精品久久蜜臀av无| 97在线人人人人妻| 五月伊人婷婷丁香| 嘟嘟电影网在线观看| av免费观看日本| 自线自在国产av| 久久久久久久久大av| 一级爰片在线观看| a级毛片免费高清观看在线播放| 国产在线一区二区三区精| 日韩大片免费观看网站| 久久狼人影院| 黑人猛操日本美女一级片| 亚洲av成人精品一区久久| 日韩制服骚丝袜av| 中文字幕亚洲精品专区| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 91精品国产国语对白视频| 久久狼人影院| 精品一区二区免费观看| 热re99久久精品国产66热6| 插逼视频在线观看| 黄色怎么调成土黄色| 一级毛片aaaaaa免费看小| 在线观看免费日韩欧美大片 | 蜜桃久久精品国产亚洲av| 99国产综合亚洲精品| 国产精品一区二区在线不卡| 99国产精品免费福利视频| 午夜福利视频精品| 永久网站在线| 韩国av在线不卡| 五月伊人婷婷丁香| 午夜福利视频在线观看免费| 黑人猛操日本美女一级片| 亚洲性久久影院| 国产精品女同一区二区软件| 亚洲av成人精品一二三区| 久久97久久精品| 99精国产麻豆久久婷婷| 精品人妻熟女av久视频| 亚洲精品日韩av片在线观看| 美女视频免费永久观看网站| 91aial.com中文字幕在线观看| 国产老妇伦熟女老妇高清| 国产有黄有色有爽视频| 一级毛片我不卡| 伦理电影大哥的女人| 欧美性感艳星| 少妇被粗大的猛进出69影院 | 男女无遮挡免费网站观看| 97超视频在线观看视频| 97在线人人人人妻| 午夜久久久在线观看| 亚洲性久久影院| 91精品伊人久久大香线蕉| 亚洲av二区三区四区| 国产精品熟女久久久久浪| 这个男人来自地球电影免费观看 | 国产免费福利视频在线观看| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 91aial.com中文字幕在线观看| 另类精品久久| av免费在线看不卡| 国产又色又爽无遮挡免| 高清不卡的av网站| 九草在线视频观看| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 免费观看在线日韩| 九色亚洲精品在线播放| 少妇被粗大猛烈的视频| 丁香六月天网| 久久午夜综合久久蜜桃| 久久鲁丝午夜福利片| 久久午夜福利片| av网站免费在线观看视频| 青春草国产在线视频| 少妇丰满av| 夜夜爽夜夜爽视频| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 国产精品.久久久| 好男人视频免费观看在线| 成人毛片a级毛片在线播放| 麻豆乱淫一区二区| 精品一区二区免费观看| 赤兔流量卡办理| 校园人妻丝袜中文字幕| 中文字幕人妻丝袜制服| 国产视频内射| 精品国产一区二区久久| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 一区二区三区四区激情视频| 满18在线观看网站| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 一本色道久久久久久精品综合| 高清毛片免费看| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 欧美一级a爱片免费观看看| 99九九线精品视频在线观看视频| 亚洲国产日韩一区二区| 老司机亚洲免费影院| 91aial.com中文字幕在线观看| 成年av动漫网址| 日本wwww免费看| 一区二区日韩欧美中文字幕 | 毛片一级片免费看久久久久| 久久久久久久久久久久大奶| 18禁观看日本| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 中文字幕av电影在线播放| 在线看a的网站| 蜜桃国产av成人99| 在线观看三级黄色| 国产一区二区三区综合在线观看 | 麻豆精品久久久久久蜜桃| 免费高清在线观看视频在线观看| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 亚洲av国产av综合av卡| 人妻系列 视频| 亚洲精品日韩av片在线观看| 欧美成人精品欧美一级黄| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 久久人人爽人人片av| 国产极品天堂在线| 久久99热6这里只有精品| 国产精品偷伦视频观看了| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 久久久久久久久久久久大奶| 亚洲人与动物交配视频| 中文欧美无线码| 三上悠亚av全集在线观看| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 精品人妻一区二区三区麻豆| 亚洲精品乱久久久久久| 日韩电影二区| av天堂久久9| 亚洲在久久综合| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 亚洲中文av在线| 午夜91福利影院| 国产免费福利视频在线观看| 日韩 亚洲 欧美在线| 免费高清在线观看视频在线观看| 人妻少妇偷人精品九色| 一级,二级,三级黄色视频| 久久精品久久久久久久性| 少妇被粗大猛烈的视频| videos熟女内射| xxx大片免费视频| 亚洲人成网站在线观看播放| 青青草视频在线视频观看| 黄色配什么色好看| 大片免费播放器 马上看| 亚洲人成77777在线视频| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 永久网站在线| 少妇人妻精品综合一区二区| 国产精品一国产av| 久久久久久久国产电影| 日本wwww免费看| 午夜影院在线不卡| a级毛片免费高清观看在线播放| 国产精品国产av在线观看| 9色porny在线观看| 精品熟女少妇av免费看| 18禁动态无遮挡网站| 色哟哟·www| 欧美最新免费一区二区三区| 国产亚洲一区二区精品| 黑人高潮一二区| 岛国毛片在线播放| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 成人国语在线视频| 亚洲在久久综合| 简卡轻食公司| 久久久久久伊人网av| 久久久精品免费免费高清| 国产高清有码在线观看视频| 国产av精品麻豆| a 毛片基地| 在线观看免费日韩欧美大片 | 69精品国产乱码久久久| av在线app专区| 九色成人免费人妻av| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 久久 成人 亚洲| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 水蜜桃什么品种好| 日本与韩国留学比较| 纯流量卡能插随身wifi吗| 国产成人91sexporn| 青春草视频在线免费观看| 青春草亚洲视频在线观看| 精品酒店卫生间| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 婷婷色麻豆天堂久久| 亚洲国产成人一精品久久久| 久久久久久伊人网av| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 国产女主播在线喷水免费视频网站| 国内精品宾馆在线| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 免费日韩欧美在线观看| 视频在线观看一区二区三区| 国产一区有黄有色的免费视频| 黄色怎么调成土黄色| 男女边摸边吃奶| 国产色爽女视频免费观看|