GC—MS法測定食品中N—二甲基亞硝胺含量

馮秀娟　龔慧　張學玲

摘要：利用二氯甲烷提取各類食品中的N-二甲基亞硝胺，采用GC-MS法（SIM與Scan相結合）進行定性定量檢測。結果表明：該試驗方法較國標方法（ GB/T 5009.26-2003）前處理簡單快速、便于操作，回收率在80.1%～101.5%之間，其RSD可達1.67%～ 6.85%，線性相關系數(shù)為0.999917，檢測限為0.3μg/kg，滿足食品中N-二甲基亞硝胺的殘留含量的測定要求。

關鍵詞：N-二甲基亞硝胺 氣質聯(lián)用 選擇離子法

中圖分類號：TS254.7 文獻標識碼：A 文章編號：1672-5336（2014）16-0043-04

Abstract：N-dimethylnitrosamine in various food was extracted by Dichloromethane and make？qualitative and quantitative detection （SIM combined with Scan） with GC-MS method.The results showed that： Sample preparation is better than the？national standard method（GB/T？5009.26-2003） is simple，rapid and easy to operate.The average recoveries were 80.1%～101.5% ，their RSD was above 1.67%～6.85%，the linear correlation coefficients were 0.999917， the detection limit is 0.3μg/kg.

Key Words：N-Dimethylnitrosamine gas chromatography-mass SIM

N-二甲基亞硝胺是一種半揮發(fā)性有機化學品，為強致癌物質，可以引起肝臟腫瘤[1]。啤酒、肉制品及魚類腌制品等食品中均含有N-二甲基亞硝胺，我國制訂了部分亞硝胺檢測方法和限量標準，即GB/T5009.26-2003[2]《食品中N-亞硝胺類的測定》和GB2762-2012[3]《食品中污染物限量》對水產動物及其制品和肉及肉制品中的N-二甲基亞硝胺做了限量要求，而且限量很低，肉制品3.0μg/kg，水產品4.0μg/kg[4-5]。國標方法2中GC-MS法前處理復雜、耗時長，有機溶劑用量大，同時采用氣相色譜-質譜聯(lián)用法（GC-MS）檢測食品中的N-二甲基亞硝胺含量也有許多相關報道[6-8]，大多集中于對水產品的測定。本試驗采用改進的氣質聯(lián)用法測定了不同種類食品中N-二甲基亞硝胺含量，實驗結果表明，本方法前處理簡單，成本低，耗時少，且對各類制品的回收率及檢測限都能滿足定量要求。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

儀器：QPMS2010 plus氣相質譜聯(lián)用儀，配備AOC-20i自動進樣器（日本島津公司出品），超聲清洗器（昆山市超聲儀器有限公司），旋轉蒸發(fā)器（鞏義予華儀器有限責任公司），離心機，自動振蕩器（上海浦東物理學儀器廠）。

試劑：二氯甲烷（AR，國外進口）、氯化鈉（AR）、無水硫酸鈉（AR）；標準品：N-二甲基亞硝胺標準品。

樣品：由市場購得。

1.2 檢測方法

1.2.1 色譜條件

HP-5MS毛細管色譜柱（60m×0.32mm×0.25μm） （美國Agilent公司出品）；進樣口溫度200℃；分流進樣，分流比5：1；載氣為氦氣（純度99.999%），流速1.2mL/min；程序升溫：40℃下保持1min，以10℃/min升至200℃，保持1min，全部程序時間18min，自動進樣，進樣量1μL。

1.2.2 質譜條件

離子源溫度：230℃；接口溫度：250℃；電離方式：電子轟擊離子源；電子能量：70eV；質量數(shù)掃描范圍：30～100；溶劑延遲：3min；閾值：0；特征碎片峰：42、43、74；定量離子：74。

1.2.3 標準溶液的配制

將N-二甲基亞硝胺（100μg/mL）標準溶液準確配制成質量濃度為10μg/mL的標準儲備液，以二氯甲烷逐級稀釋配制0.005、0.01、0.05、0.10、0.50、1.0μg/mL系列濃度的N-二甲基亞硝胺標準溶液。

1.2.4 樣品的處理

（1）固體樣品的處理：將不同種類的肉樣連皮切成小塊，在組織搗碎機粉碎成勻漿或粉末狀均勻樣品。準確稱取已粉碎并混勻的樣品10g，加入適量的氯化鈉混勻，加入二氯甲烷20mL超聲提取5min，振蕩提取20min，收集提取液，重復上述提取過程兩次，合并有機溶劑相，經無水硫酸鈉過濾脫水后，在40℃水浴下抽真空濃縮至近干（不得干透）。定容至2.0mL混勻，供氣相色譜/質譜儀分析。

（2）液體樣品的處理：準確稱取液體樣品20g于離心管中，加入20mL二氯甲烷超聲提取20min，離心5min，收集有機相，重復上述提取過程三次，合并有機溶劑相，經無水硫酸鈉過濾脫水后，在40℃水浴下抽真空濃縮至近干（不得干透）。定容至2.0mL混勻，供氣相色譜/質譜儀分析。

2.2 線性關系

用二氯甲烷將濃度為10μg/mL的標準儲備液配制成0.005、0.01、0.05、0.10、0.50、1.0μg/mL系列濃度，按上述條件進樣1μL，以峰面積為縱坐標、濃度為橫坐標分別進行線性回歸。結果如表1所示。

2.3 回收率

2.3.1 不同提取方式及萃取次數(shù)對回收率響應的影響

考慮到不同提取方式和萃取次數(shù)會影響樣品中 N-二甲基亞硝胺的萃取效果，在其他試驗條件相同的情況下，對加入固定質量濃度N-二甲基亞硝胺標準溶液的10.0g空白肉樣進行萃取試驗。在相同的其他試驗條件下選擇（1）超聲提取20min，（2）振蕩提取20min，（3）超聲5min，振蕩15min，3個提取方式研究對待測物萃取效果的影響，結果如圖6（a）。同時選取萃取次數(shù)為1、2、3共三個水平對萃取效果的影響，結果如圖6（b）。

三種萃取方式中，對待測物采用即超聲又振蕩的提取其響應值最高。樣品萃取次數(shù)在2、3次時的響應值變化不大。因此在提高檢測效率，節(jié)約成本的前提下，樣品選擇超聲振蕩提取，重復兩次。

2.3.2 不同樣品在同一添加量水平的回收率

取未檢出N-二甲基亞硝胺的不同樣品，測定同一添加水平的回收率和精密度，測定結果如表2。不同樣品在同一水平的加標回收雖有一定的差別，但滿足國家標準規(guī)定的要求。

2.3.3 同一樣品在不同添加量水平的回收率

取未檢出N-二甲基亞硝胺的固體樣品10.0g，4份，測定4個添加水平的回收率和精密度，測定結果如表3，6次連續(xù)進樣的色譜圖如圖7。

2.4 精密度試驗

選擇同一樣品四個不同水平添加量的精密度測定結果如表3，其RSD的范圍為1.67%～6.85%，表明儀器檢測過程具有較好的精密度，該檢測方法重現(xiàn)性良好，具有良好的適用性。本試驗采用的樣品處理方法，能夠達到國家標準規(guī)定的要求，能夠滿足GB2762-2005規(guī)定的要求。

2.5 檢出限

配制0.005μg/mL的N-二甲基亞硝胺的標樣，采取分流進樣，進樣量為1μL，測得信噪比為10.0（提取離子74），檢測限以3倍噪聲計算，得到N-二甲基亞硝胺的儀器檢測限為（如表1）：

以10g稱樣量，最后定容體積為2mL，進樣量為1μL，本方法的檢測限為μg/kg

本試驗采用的檢測方法適宜檢測食品中的痕量亞硝胺。

3 結語

本試驗采用GC-MS法測定不同食品中N-二甲基亞硝胺的含量。比較了不同提取方式、不同萃取次數(shù)的影響。相對國家標準方法（GB/T 5009.26-2003[2]），本試驗方法前處理簡單、快速，便于操作，大大減少了有機溶劑的使用量。通過對線性、精密度、檢測限和樣品的測定，驗證了方法的可行性。其回收率在80.1%～101.5%之間，RSD可達RSD可達1.67%～6.85%，線性相關系數(shù)為0.999917，檢測限為0.3μg/kg，該法能夠滿足國家對食品中痕量N-二甲基亞硝胺的檢測要求，可以用于各類食品（包括啤酒、熏烤腸、海產品等）中N-二甲基亞硝胺的測定。

參考文獻

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[3]GB 2762-2012，食品中污染物限量[S].

[4]翁其香.氣質聯(lián)用法測定食品中N-二甲基亞硝胺含量[J].福建分析測試，2006，15（4）：18～19.

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