白菜、生菜和黃瓜中硝酸鹽與亞硝酸鹽的測(cè)定—離子色譜法

李媛

摘要：硝酸鹽與亞硝酸鹽因廣泛存在于自然界中，也是植物生長(zhǎng)必不可少的元素之一，因此會(huì)在植物中有所殘留，并且可通過食物鏈進(jìn)入動(dòng)物和人體，一旦過量即會(huì)對(duì)人體健康產(chǎn)生一定的危害。此文主要采用離子色譜法測(cè)定白菜、生菜和黃瓜中硝酸鹽與亞硝酸鹽的濃度，其重現(xiàn)性及加標(biāo)回收率均可達(dá)到質(zhì)量控制的要求。

關(guān)鍵詞：硝酸鹽與亞硝酸鹽 離子色譜法

中圖分類號(hào)：TS255.7 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1672-5336（2014）16-0023-02

1 前言

硝酸鹽、亞硝酸鹽廣泛存在于人類環(huán)境中，其對(duì)人類健康和生態(tài)環(huán)境的危害，日益受到人們的普遍關(guān)注。研究表明，人體攝入的硝酸鹽81.2%來自蔬菜。硝酸鹽在細(xì)菌的作用下可還原成亞硝酸鹽，使血液的載氧能力下降，從而導(dǎo)致高鐵血紅蛋白癥；另一方面，亞硝酸鹽可與次級(jí)胺（仲胺、叔胺、酰胺及氨基酸）結(jié)合，形成亞硝胺，從而誘發(fā)消化系統(tǒng)癌變。

因此蔬菜中硝酸鹽和亞硝酸鹽含量的高低已成為衡量蔬菜安全與否的一項(xiàng)重要指標(biāo)。

1.1 污染來源

蔬菜中硝酸鹽的污染主要來自于氮肥的不合理使用，由于農(nóng)民過分渴望產(chǎn)量，不合理的對(duì)農(nóng)作物施加氮肥，致使農(nóng)作物中硝酸鹽含量增高；另一方面，冬季大棚種植也會(huì)使土壤鹽分積累，加重了硝酸鹽污染的危險(xiǎn)。

亞硝酸鹽和硝酸鹽廣泛存在于土壤、水域及植物中，如綠色蔬菜中的甜菜、萵苣、菠菜、芹菜及蘿卜等硝酸鹽含量較高，硝酸鹽在某些細(xì)菌的還原作用下可變成亞硝酸鹽。目前廣泛采用的含氮農(nóng)藥、化學(xué)氮肥及含氮工業(yè)廢水、廢渣對(duì)環(huán)境土壤和水造成污染，使蔬菜中亞硝酸鹽含量不斷增加。而土壤則是水體、植物性食品亞硝酸鹽的主要來源。

1.2 健康危害

硝酸鹽對(duì)人體健康的損害不亞于農(nóng)藥。因?yàn)橄跛猁}不僅容易誘發(fā)糖尿病，對(duì)腎臟造成的損害也十分嚴(yán)重。腎臟是過濾血液和廢物、排泄水分及鹽分的重要器官，如果人們攝取了高濃度的硝酸鹽，腎臟的負(fù)擔(dān)加重，容易引起溶血性貧血。除此之外，留存在蔬菜內(nèi)的硝酸鹽在酶和細(xì)菌的作用下，被還原成亞硝酸鹽，進(jìn)而與人體內(nèi)的蛋白質(zhì)類物質(zhì)結(jié)合，生成致癌性極強(qiáng)的亞硝酸胺類物質(zhì)。

亞硝酸鹽為強(qiáng)氧化劑，進(jìn)入人體后，可使血中低鐵血紅蛋白氧化成高鐵血紅蛋白，十血紅蛋白失去攜氧能力，致使組織缺氧，并對(duì)周圍血管有擴(kuò)張作用。亞硝酸鹽的危害還不只是使人中毒，它還有致癌作用。亞硝酸鹽可以與食物或胃中的仲胺類物質(zhì)作用轉(zhuǎn)化為亞硝胺。亞硝胺具有強(qiáng)烈的致癌作用，主要引起食道癌、胃癌、肝癌、和大腸癌等。此外，亞硝酸鹽還可通過乳汁進(jìn)入嬰兒體內(nèi)，造成嬰兒機(jī)體組織缺氧，皮膚黏膜出現(xiàn)青紫斑。

2 我國(guó)現(xiàn)有食品中亞硝酸鹽與硝酸鹽的監(jiān)測(cè)分析方法

GB/T 5009.33-2003食品中亞硝酸鹽與硝酸鹽的測(cè)定。

3 實(shí)驗(yàn)部分

3.1 方法的應(yīng)用范圍

此方法適用于蔬菜中硝酸鹽和亞硝酸鹽的測(cè)定。

3.2 方法原理

硝酸鹽：試樣經(jīng)弱堿溶液提取后，注入離子色譜儀中，所得的儀器響應(yīng)值與硝酸鹽含量成正比，與說繪制的校準(zhǔn)系列比較定量。

亞硝酸鹽：試樣經(jīng)弱堿溶液提取后，注入離子色譜儀中，所得的儀器響應(yīng)值與亞硝酸鹽含量成正比，與說繪制的校準(zhǔn)系列比較定量。

3.3 儀器設(shè)備

（1）離子色譜儀：美國(guó)戴安公司ICS-1500型離子色譜儀。（2）分離柱型號(hào)：lonPac AS4A-SC。

3.4 試劑和材料

（1）蒸餾水：無氮離子干擾的三蒸超純水。（2）氫氧化鈉：0.01mol/L。（3）淋洗儲(chǔ)備液：NaHCO30.17M- Na2CO30.18M。（4）硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)貯備液：1000mg/L，亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)貯備液：1000mg/L。

3.5 樣品的采集及保存

3.5.1 樣品采集

蔬菜洗凈后風(fēng)干。

3.5.2 樣品保存

樣品應(yīng)盡快分析。

3.5.3 樣品處理

稱取風(fēng)干后的蔬菜50克于攪拌機(jī)中，加水50ml，攪拌2分鐘，再加入50ml氫氧化鈉，攪拌1分鐘。密閉超聲30分鐘，于70℃水浴30分鐘，冷卻至室溫后用布氏漏斗過濾至500ml容量瓶中，加水至刻度，混勻，靜置取部分上清夜于離心管中，5000r/min離心10分鐘后過0.45μm濾膜后備用；同時(shí)作試劑空白。

3.6 樣品分析

3.6.1 儀器工作條件

（1）流動(dòng)相：NaHCO31.7 mM- Na2CO31.8mM。（2）柱溫：35℃。（3）流速：0.8 ml/min。（4）泵壓：Psi 864。（5）進(jìn)樣量：25ul。

3.6.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

配置硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)使用液：將硝酸鹽貯備液配置成200mg/L的工作液，配置標(biāo)準(zhǔn)曲線；

配置亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)使用液：將亞硝酸鹽貯備液配置成100mg/L的工作液，配置標(biāo)準(zhǔn)曲線；各點(diǎn)濃度見表1。

硝酸鹽及亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)貯備液已用國(guó)家環(huán)境保護(hù)總局標(biāo)準(zhǔn)樣品研究所的硝酸鹽及亞硝酸鹽標(biāo)樣進(jìn)行分析過，濃度均在不確定度范圍之內(nèi)。

打開電腦，接通氣源，將離子色譜儀打開，預(yù)熱至柱溫箱溫度到達(dá)35℃，打開泵，流速為0.8ml/min至儀器穩(wěn)定。按照標(biāo)準(zhǔn)曲線各工作點(diǎn)依次進(jìn)樣，并記錄儀器響應(yīng)值，求得一元線性回歸方程。

3.6.3 試樣測(cè)定

取處理好的樣品進(jìn)樣分析（根據(jù)濃度適量對(duì)樣品進(jìn)行稀釋），記錄儀器響應(yīng)值，代入標(biāo)準(zhǔn)系列的一元線性回歸方程中，求得相對(duì)應(yīng)的濃度。

4 結(jié)語(yǔ)

4.1 方法檢出限

硝酸鹽：0.8mg/kg亞硝酸鹽：0.6mg/kg。

4.2 方法精密度

（1）使用本方法對(duì)白菜、生菜和黃瓜三種樣品進(jìn)行硝酸鹽分析，分別進(jìn)行三次平行稱量進(jìn)樣，分別計(jì)算三次結(jié)果的平均值和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD。見表2。

（2）使用本方法對(duì)白菜、生菜和黃瓜三種樣品進(jìn)行亞硝酸鹽分析，分別進(jìn)行三次平行稱量進(jìn)樣，分別計(jì)算三次結(jié)果的平均值和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD。見表3。

4.3 回收率

向樣品中加入硝酸鹽標(biāo)液及亞硝酸鹽標(biāo)液與樣品同步處理定容測(cè)定，見表4-表5。

參考文獻(xiàn)

[1]徐霞，應(yīng)興華，段彬伍，陳能.蔬菜中硝酸鹽和亞硝酸鹽測(cè)定方法的研究進(jìn)展[J].中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)， 2005，5（21）：149-152.

[2]王守箐.離子色譜法測(cè)定蔬菜總亞硝酸鹽和硝酸鹽的含量[J].上海蔬菜，2005（4）：13-14.

[3]林國(guó)劍，楊敏.鐘國(guó)華.離子色譜法測(cè)定新鮮蔬菜中無機(jī)陰離子[J].仲愷農(nóng)業(yè)技術(shù)學(xué)院學(xué)報(bào)，2004，17（3）：31-34.