濾除白細胞血液制品的臨床應用

方定安，周正東，何豐果（百色市中心血站供血科，廣西百色 533000）

輸血為臨床上搶救危重患者的有效手段之一，在挽救患者生命方面極為重要［1］。然而，輸血有可能導致多種繼發(fā)性疾病，尤其以供血者白細胞（WBC）引起的非溶血性發(fā)熱性輸血反應（FNHTR）尤為常見［2］。因此，輸注濾除 WBC的血液制品（去白細胞血液制品）以避免同種免疫反應及TNHTR的發(fā)生確保輸血治療安全、有效的重要手段之一。另一方面，去WBC血液制品的臨床治療效果與WBC過濾方法和過濾質量都有較大的關系［3］。筆者對2008年7月至2012年12月接受輸血治療的患者臨床資料進行了回顧性分析，旨在探討濾除WBC處理對血液制品質量的影響及去WBC血液制品的臨床應用效果。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2008年7月至2012年12月接受輸血治療患者5 012例，其中消化科患者1 812例、腎內科患者567例、血液科患者1 982例、其他科室患者651例，排除伴有血液滲透至血管外、隱性失血、紅細胞（RBC）體外循環(huán)丟失及脫水或大量補液導致血液稀釋的患者。根據(jù)患者是否為輸注去WBC血液制品，將患者分為實驗組與對照組，其中實驗組患者2 506例，男1 301例、女1 205例，年齡13～71歲，平均（45.6±1.2）歲，輸血前血紅蛋白（Hb）31～87g／L，平均（56.5±4.5）g／L；對照組患者2 506例，男1 230例、女1 276例，年齡13～70歲，平均（44.9±1.3）歲，輸血前 Hb 30～87g／L，平均（56.8±4.8）g／L。兩組患者在性別分布、年齡構成及輸血前Hb濃度等方面比較差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性，見表1。

表1 實驗組與對照組患者一般情況比較

1.2 方法

1.2.1 血液制品的制備 （1）儀器與試劑：一次性 WBC濾器（南京塞爾金生物醫(yī)學有限公司），生化分析儀（德國Eppendorf公司），血細胞計數(shù)儀（瑞典SWELAB公司），電解質分析儀（美國MEDICA公司），pH計（上海精密科學公司）等。（2）血液采集與制備：采集無償獻血者血液5 012袋，每袋400mL，隨機分為兩組，每組2 506袋，分別標記為實驗組與對照組。實驗組血液制品留取5mL作為濾前標本［4］。兩組血液制品均于4℃冰箱保存。實驗組血液制品于采血后4～6h內進行濾除WBC處理，作為濾除WBC血液制品，并留取過濾后的血液制品標本。分別檢測過濾前及過濾后血液制品標本的各項指標［5］。對照組血液制品不采用濾除 WBC處理，作為未濾除WBC血液制品。

1.2.2 輸血治療 所有患者輸血前后均避免使用糖皮質激素等藥物治療。對照組患者輸注未濾除WBC血液制品，實驗組患者輸注濾除WBC血液制品。

1.2.3 觀察指標 （1）比較濾除 WBC前后血液制品的質量指標，如 WBC、Hb、RBC及紅細胞滲透脆性（ROF）等。（2）檢測濾除WBC后的血液制品質量指標，如K＋、Na＋、細菌、WBC殘留量等。（3）比較兩組患者發(fā)生FNHTR及RBC輸注有效情況。FNHTR判斷標準：輸血過程中或輸血后1～2h內患者體溫上升1℃及其以上，出現(xiàn)以寒戰(zhàn)及發(fā)熱為主的臨床表現(xiàn)［6］。RBC輸注有效性判斷標準：患者輸血24h后復查Hb，若Hb上升至預期值，則說明RBC輸注有效。Hb上升預期值計算公式：Hb上升預期值（g／L）＝［血液制品輸入量（L）×輸入血液制品 Hb濃度（g／L）］／［患者體質量（kg）×0.085］×90%［7］。

1.3 統(tǒng)計學處理 采用SPSS19.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)處理與分析。計量資料表示，組間比較采用t檢驗；計數(shù)資料以百分率表示，組間比較采用卡方檢驗；P＜0.05為比較差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 濾除WBC前后血液制品質量比較 見表2。濾除WBC前血液制品WBC水平高于濾除后，且比較差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。濾除前后 Hb、游離血紅蛋白（FHb）及RBC比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

表2 濾除WBC前后血液制品質量比較（）

表2 濾除WBC前后血液制品質量比較（）

時間 WBC（×109／L） Hb（g／L） FHb（mg／L） RBC（×1012／L） ROF（%）5.12±1.430 135±14 301±21 4.6±0.6 75±4濾除后 0.01±0.001 130±12 298±19 4.4±0.7 77±5 P＜0.05 ＞0.05 ＞0.05 ＞0.05 ＜0.05濾除前

2.2 經濾除WBC處理后的血液制品質量指標檢測結果 見表3。濾除WBC處理后的血液制品Na＋、K＋、pH值、細菌、WBC殘留量及RBC回收率等指標檢測結果均在正常范圍內。

表3 血液制品濾除WBC后質量情況

2.3 兩組患者中RBC輸注效果及FNHTR發(fā)病情況 見表4。實驗組患者RBC輸注有效率高于對照組患者，F(xiàn)NHTR發(fā)生率則低于對照組患者，組間比較差異均具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

表4 實驗組與對照組患者RBC輸注有效率及FNHTR發(fā)生率比較［n（%）］

3 討 論

WBC為人體免疫系統(tǒng)的最主要組成部分，具有免疫活性，若輸注至異體，可導致FNHTR及人類白細胞抗原（HLA）同種異體免疫反應等不良反應的發(fā)生。FNHTR為臨床常見的輸血不良反應，其主要發(fā)病原因為多次輸入HLA不相合的異體血小板、WBC［8－9］。向患者輸注濾去 WBC的血液制品可減少，甚至避免輸血不良反應的發(fā)生。一般認為血液制品經濾除WBC處理后，若 WBC數(shù)量小于5×108個／升，即可避免FNHTR的發(fā)生，若進一步降低至5×108個／升，就可以避免WBC攜帶的相關病毒的傳播［10］。血液制品經濾除WBC處理后，其療效有可能受到一定的影響，而血液制品質量與濾除技術有極大的關系，若其中某個環(huán)節(jié)操作不當，極易導致濾除WBC后的血液制品質量不合格。

如何避免WBC引起的輸血不良反應和潛在的其他不良反應（如輸血導致的感染性疾?。┮殉蔀榘踩斞芯康闹攸c。研究資料表明，向患者反復輸注含有WBC的血液制品常引發(fā)FNHTR、血小板輸注無效、輸血相關性移植物抗宿主疾病等輸血不良反應，且不良反應的發(fā)生率隨著輸血次數(shù)的增加而升高［11］。主要原因是受血者由于反復接受帶有供血者 WBC的血液制品，導致供血者的HLA不斷刺激受血者機體發(fā)生HLA同種免疫，產生WBC抗體并破壞再次輸入體內的WBC和血小板，引起發(fā)熱反應。隨血液制品保存時間的延長，血液制品中的WBC不斷代謝分解，釋放大量的炎性細胞因子，如白細胞介素（IL）－1、IL－6、IL－8和腫瘤壞死因子α（TNF－α），這些細胞因子作為內源性致熱源輸入受血者體內，可導致受血者體溫升高［12］。一般認為，一次輸注的血液制品中WBC濃度不超過5×106個／升時，可有效預防受血者體內產生HLA抗體，輸注的WBC總量不超過5×108個時，即能避免發(fā)生輸血發(fā)熱反應［12］。濾除WBC的血液制品已濾除了99%以上 WBC，因此可避免輸血發(fā)熱反應和HLA同種免疫反應的發(fā)生。

在血液采集后48h內進行WBC濾除處理，比在輸血前進行的WBC濾除更具優(yōu)勢：血液采集后48h內進行WBC濾除既能提高WBC的濾除效果，又可進一步減少因WBC代謝分解而釋放炎性細胞因子，能更為有效地避免輸血發(fā)熱反應的發(fā)生［13］。此外，濾除白細胞處理通常是采用標準化的無菌連接技術，將血袋與WBC濾器連接，或采用帶有WBC濾器的多聯(lián)袋進行濾除WBC處理，可有效避免因開放操作而導致的血液制品污染。

血液制品過濾處理的質量涉及從原材料選擇、血液采集和過濾技術等多個因素，任何一個過程處理不當，均有可能導致血液制品質量不符合要求。已有研究分析了血液制品貯存前過濾與醫(yī)院床旁過濾對血液制品質量的不同影響［14］。目前國產濾器對WBC的濾除率基本達到美國血庫協(xié)會（AABB）及美國食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）血液制品質量標準中規(guī)定的WBC殘留量小于5×106個／單位（美國規(guī)定1個單位血液制品為450mL）的標準。要保證濾除WBC處理全過程的質量，采供血機構必須建立嚴格的WBC過濾質量管理體系，采用科學的方法對WBC濾除處理的每個過程進行質量控制，確保濾除WBC血液制品的質量。目前國內各地的去白細胞血液制品的用量存在一定的差異，為提高輸血治療的安全性和效果，應盡快普及去白細胞血液制品的應用［15］。

FNHTR的發(fā)生與輸注的血液制品中存在一定量的WBC有關，且好發(fā)于再次輸血患者或有妊娠史的女性。FNHTR屬于免疫介導性反應，是由于患者既往有輸血史或妊娠史，使患者體內產生 WBC抗體，再次輸血時，WBC抗體和新輸注的WBC表面的相應抗原發(fā)生反應，刺激內源性熱源物質（細胞因子）的產生和釋放，導致FNHTR的發(fā)生。內源性熱源物質主要包括IL－1β、IL－6和 TNF［16］。受血者體內巨噬細胞被活化并釋放上述細胞因子是引起FNHTR的因素。在此過程中，供血者WBC表面的抗原和患者體內的WBC抗體結合，進而激活補體，三者間的相互作用進一步激活患者體內的巨噬細胞，誘導其釋放上述細胞因子。引起FNHTR的因素除患者抗體存在的HLA抗體外，也包括粒細胞抗體和血小板抗體等。

引起FNHTR的WBC最低閾值為0.25×109個，通過濾除處理可去除血液制品中90%以上的WBC，但濾除效果因所使用的濾器不同而不同，WBC殘留量一般為5×106～5×106個／單位［17］。通常認為，如果 WBC殘留量不超過5×108個／單位，可以預防大部分因WBC導致的FNHTR。血液制品的WBC濾除處理可以在血液制品保存前（在血站）完成，也可以在血液制品保存后（在醫(yī)院）完成，即輸血前進行的患者床旁WBC濾除處理。如床旁WBC濾除處理，僅能夠去除血液制品中的WBC，無法去除血液制品中已存在的WBC釋放的可引起FNHTR的細胞因子，因此對FNHTR的預防效果較血液制品保存前WBC濾除處理相對差一些。血液制品保存前WBC濾除處理即在采血后短時間內進行WBC濾除，可以使血液制品在保存期間內由于所含WBC很少，由其釋放的相關細胞因子則更少，能夠更有效地預防WBC及其釋放的細胞因子所導致的FNHTR。

一旦患者在輸血后發(fā)生FNHTR，應首先立即停止輸血，改為緩慢輸注生理鹽水以保持靜脈通路，并將受血者血液標本及剩余的血液制品一起送輸血科進行相關的實驗室指標檢測。若受血者無其他禁忌證，可給予阿司匹林口服；若伴有血小板減少癥，可給予醋胺酚口服，小兒受血者適當減量。此外，須注意給受血者保暖。出現(xiàn)嚴重寒戰(zhàn)者，可給予哌替啶（杜冷丁）肌肉或皮下注射以緩解寒戰(zhàn)。高熱嚴重者，可給予物理降溫。若受血者出現(xiàn)輕度發(fā)熱，但因病情較重需要繼續(xù)輸血，應更換血液制品后予以輸注，但輸注速度應緩慢，且必須嚴密觀察受血者的基本生命體征。

本研究發(fā)現(xiàn)濾除WBC后的血液制品，其WBC、RBC等指標檢測結果較濾除前明顯改變（P＞0.05），且濾除處理后的血液制品相關指標均在正常范圍內，說明血液制品經濾除WBC處理后，質量未下降。表4結果顯示，輸注濾除 WBC血液制品的實驗組患者RBC輸注有效率高于輸注未濾除WBC血液制品的對照組患者，且實驗組患者FNHTR發(fā)生率低于對照組（P＜0.05），說明FNHTR有可能影響RBC輸注效果，輸注濾除WBC血液制品可減少FNHTR的發(fā)生，提高輸血效果。

綜上所述，對患者輸注濾除WBC血液制品可減少輸血不良反應的發(fā)生，提高輸血治療的效果，建議在臨床中推廣應用。

［1］陳莉，李永乾，王毅.去除白細胞血液臨床應用效果［J］.臨床薈萃，2006，21（11）：799－800.

［2］Higgins VL.Leukocyte－reduced blood components：patient benefit and practical applications［J］.Oncol Nurs Forum，1996，23（4）：659－667.

［3］陳愛蓉，戴芳，黃毅.外傷患者大量輸血后血鉀的變化及其影響因素［J］.實用醫(yī)學雜志，2011，27（13）：2374－2375.

［4］姚仁南，黃曉靜，李璽.去除白細胞輸血的臨床意義［J］.吉林醫(yī)學，2006，27（5）：493－494.

［5］閆東河，李延孝，孫福延.反復輸血者血小板抗體對血小板輸注效果的影響［J］.中國輸血雜志，2003，16（1）：7－9.

［6］肖樂宇，歧紅陽.白細胞過濾對血液質量的影響及臨床效果觀察［J］.職業(yè)與健康，2008，24（18）：1977－1978.

［7］趙鋒，李天君，劉曉麗.過濾去除白細胞血液質量控制和臨床效果評價［J］.河北醫(yī)藥，2009，31（5）：612－613.

［8］Lapierre V，Auperin A，Kobinet E，et al.Immune modulation and microchimerism after unmodified versus leukoreduced allogeneic red blood cell transfusion in cancer patients：results of a randomized study［J］.Transfusion，2007，47（9）：1691－1699.

［9］譚軒.臨床用血及成分輸血情況分析［J］.檢驗醫(yī)學與臨床，2010，7（18）：1991－1993.

［10］李小平，段景斌.白細胞過濾前后血液質量的測定［J］.成都醫(yī)藥，2005，31（1）：35－36.

［11］趙毅，徐恩英，朱志剛，等.去白細胞輸血器在白血病患者中的應用探討［J］.臨床輸血與檢驗，2002，4（3）：33－34.

［12］方捷，鄧安梅，陳育貴，等.去白細胞的濃縮紅細胞在消化系統(tǒng)疾病患者中的應用［J］.中國輸血雜志，2003，16（12）：16－17.

［13］肖文海，朱紅梅，毛建玉.白細胞過濾器去除白細胞的效果及臨床應用［J］.國外醫(yī)學：臨床生物化學與檢驗學分冊，2004，25（4）：372.

［14］羅光弟，李代渝，彭蘭，等.過濾法去除白細胞的效果及臨床應用觀察［J］.臨床輸血與檢驗，2001，3（3）：37.

［15］濮云峰，曹鎖春，張建華，等.去白細胞血小板的臨床應用［J］.臨床輸血與檢驗，2004，6（4）：261－262.

［16］畢曉琳，安萬新，明鳳琴，等.白細胞過濾器過濾前后血液質量及臨床效果的比較［J］.中國輸血雜志，2000，13（2）：99－100.

［17］劉達莊.免疫血液學［M］.上海：上?？茖W技術出版社，2002：116.